細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢:1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時(shí)間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化工作.pei轉(zhuǎn)染試劑說明書是什么?通用型無血清轉(zhuǎn)染試劑一次加多少
簡介:
X-tremeGENE HP DNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動(dòng)物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。
優(yōu)勢:
1.簡單易用的多組分混合試劑,無動(dòng)物源性成分,室溫穩(wěn)定。
2.高轉(zhuǎn)染效率,對于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。
3.使用細(xì)胞毒性低的試劑,結(jié)果相關(guān)性好.
圖2. X-tremeGENE HP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENE HP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗(yàn)后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高于X-tremeGENE HP,導(dǎo)致存活細(xì)胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò)). 湖北轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)粒的比例包括常見細(xì)胞類型、干細(xì)胞、原代細(xì)胞以及歷來難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型)提供如此簡便、高效的siRNA輸送效果。
在選擇轉(zhuǎn)染方法時(shí),需考慮您希望輸送的運(yùn)載物(DNA、RNA或蛋白質(zhì))以及您希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型。您可通過下表選擇各類陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。
我們提供了各種DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA輸送選擇,讓您可以對自己的結(jié)果更加自信.***的輸送效果—可轉(zhuǎn)染多種類型的細(xì)胞無毒性作用—您之所以能看到結(jié)果,是因?yàn)楹怂岽嬖?,而不是因?yàn)樵噭┬枰膬?yōu)化工作更少—針對大多數(shù)細(xì)胞類型提供了快速、簡便的實(shí)驗(yàn)方案
連續(xù)細(xì)胞系 具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。但由于此類細(xì)胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。
細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢:1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時(shí)間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。
對 HepG2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較
右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟轉(zhuǎn)染到 HepG2 細(xì)胞(在膠原預(yù)處理的培養(yǎng)皿中培養(yǎng))。在轉(zhuǎn)染 48 小時(shí)之后,用流式細(xì)胞儀檢測 GFP 陽性細(xì)胞(%)和熒光強(qiáng)度。
左圖:血清和***存在的條件下能提高 LipoD293 試劑(升級版)對在 HepG2 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。通過三種不同的條件下轉(zhuǎn)染 HepG2 細(xì)胞(生長在膠原處理的培養(yǎng)皿上)---無血清和***,10% 血清和***的存在,轉(zhuǎn)染 5 小時(shí)后換液和不換液。
臨床級******毒載體生產(chǎn)必備轉(zhuǎn)染試劑..北京轉(zhuǎn)染試劑配好放多少錢
將20μL轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入孔中的細(xì)胞懸液中,前后移動(dòng)培養(yǎng)皿,混合均勻;通用型無血清轉(zhuǎn)染試劑一次加多少
羅氏X-TremeGENE 便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,升級版的多組分混合試劑,兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細(xì)胞毒性,在超過350株真核細(xì)胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗(yàn)證,尤其針對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株亦有出色表現(xiàn)。
兩種試劑對CHO-K1 細(xì)胞轉(zhuǎn)染帶GFP標(biāo)記的質(zhì)粒,A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖,B和D是明場顯微圖. 與競爭產(chǎn)品比較,X-tremeGENE HP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細(xì)胞毒性
不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株進(jìn)行轉(zhuǎn)染,X-tremeGENE HP 試劑遠(yuǎn)優(yōu)于其他試劑
超過350種細(xì)胞株的高效轉(zhuǎn)染驗(yàn)證
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