懸浮細胞凍存液是哪些物質

來源: 發(fā)布時間:2021-11-10

細胞凍存常用凍存液的成分如下:

20%血清(FBS)、10%DMSO、70%1640培養(yǎng)液;或90%血清(FBS)、10%DMSO,更可防止細胞內冰晶形成。將DMSO和FBS加入DMEM中,各自含量占總體積的10%,然后濾膜過濾后分裝保存?zhèn)溆谩?

注意事項:

1.DMSO 不用高壓滅菌;DMEM不能高溫高壓滅菌,可以過濾除菌。

2.DMSO要用新的 ,而且要避光保存。

3.DMSO:含10%FBS的DMEM=1:9(體積比)。

DMSO在凍存液中的作用: DMSO在4℃時對細胞無明顯毒性,分子量小、溶解度大、易透過細胞膜,降低細胞外未結冰溶液中溶質濃度,使細胞免受高濃度溶質的損傷,細胞內水分也不會過分外滲,避免了細胞過分脫水皺縮;DMSO與水分子結合,可使冰點下降,減少細胞內冰晶的形成,從而減少冰晶損傷。 細胞凍存液的原理是什么?懸浮細胞凍存液是哪些物質

希望本期的分享能夠為您的細胞培養(yǎng)過程提供凍存方面的幫助,同時我公司也能為您提供凍存液等凍存相關產品,與成熟的實驗技術指導,非常感謝您的支持!

產品訂購信息:品牌貨號產品描述包裝OriGenCP-70USP級 **DMSO二甲基亞砜,CE、USP、EP認證70mL/瓶, 6瓶/盒OriGenCP-10USP級 **DMSO二甲基亞砜10mL/瓶, 12瓶/盒OriGenCD-100DMSO/Dextran/remainder water

55%二甲基亞砜,5%右旋糖酐40混合液,CE、USP、EP認證100mL/瓶,6瓶/盒OriGenCD-50DMSO/Dextran/remainder water

杭州hek293t細胞凍存液使用說明細胞凍存液要不要含血清?

3、取待凍存的細胞用胰蛋白酶消化(方法見細胞的傳代部分)。用含血清的培養(yǎng)基將細胞沖洗下來,將細胞懸液吸到無菌離心管中,800r/min離心5min,棄上清,收集細胞沉淀。如果是懸浮生長的細胞,則可直接離心收集細胞。





4、在沉淀中加入適量凍存液制成細胞懸液,細胞濃度宜大,300萬/mL左右,一般一個中方瓶中的細胞濃縮至1mL,凍存液中為宜。





5、細胞懸液裝入凍存管中。用封口膜封裹瓶口,做好標記。





6、凍存管在4℃下存放30min,轉放-20℃中30min,再轉入-70℃過夜,之后即可放入液氮中長久保存,注意進行登記。

埃澤思生物細胞凍存液、細胞消化液和胰酶消化溶液三項產品完成醫(yī)療器械分類界定2019年9月20日,埃澤思(福建)生物有限公司向福建省食品藥品監(jiān)督管理局提交三項產品:細胞凍存液、細胞消化液、胰酶消化溶液產品分類界定申請。經過**答辯,以及監(jiān)管部門批準,依據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局相關文件,**終正式將埃澤思生物科技有限公司的細胞凍存液、細胞消化液和胰酶消化溶液三種產品按照醫(yī)療器械管理,批準進行醫(yī)療器械備案。(圖1)以上信息可在中國藥監(jiān)醫(yī)療器械分類系統(tǒng)中進行查詢(圖2,3)。以下將對三項產品進行具體介紹:在細胞建株和建系中,及時凍存原始細胞是十分重要的。

細胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準備工作方面都需大量的耗費,而且細胞一旦離開***開始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要。細胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細胞儲存在液氮中,溫度達-196℃,理論上儲存時間是無限的。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結條件下,細胞內水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細胞損傷。細胞凍存液配制主要成分.吉林快速細胞凍存液要立刻放入冰箱嗎

細胞凍存液一般有兩種配置方法是什么?懸浮細胞凍存液是哪些物質

細胞復蘇

1. 從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化。

2. 從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;

3. 離心, 1000rpm,5min;

4. 棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數(shù),調整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);

5. 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。注意事項1.從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存,但比較好為對數(shù)生長期細胞。在凍存前***比較好換一次培養(yǎng)液;

2.將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作,以免***;

3.凍存和復蘇比較好用新配制的培養(yǎng)液。 懸浮細胞凍存液是哪些物質

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