杭州凍存細(xì)胞凍存液用血清和培養(yǎng)基的區(qū)別

來源: 發(fā)布時間:2021-10-10

細(xì)胞類型:源于人多能干細(xì)胞的神經(jīng)祖細(xì)胞(NPCs)

用于凍存在神經(jīng)誘導(dǎo)后的任何時間通過STEMdiffTM神經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)生成的NPCs

解凍復(fù)蘇的NPCs具有可重復(fù)性的高回收率,表型正常,且保持了可擴(kuò)增及分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和其它神經(jīng)細(xì)胞類型的潛能

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱規(guī)格貨號mFreSRTM10 x 5 mL小管包裝0585450 mL05855FreSRTM-S50 mL05859STEMdiffTM神經(jīng)祖細(xì)胞凍存液100 mL05838MesenCultTM-ACF 凍存液50 mL05490


用于凍存在神經(jīng)誘導(dǎo)后的任何時間通過STEMdiffTM神經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)生成的NPCs 細(xì)胞凍存液需要現(xiàn)用現(xiàn)配?杭州凍存細(xì)胞凍存液用血清和培養(yǎng)基的區(qū)別

(一)細(xì)胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細(xì)胞凍存液,4℃預(yù)冷(新鮮配制的凍存液會產(chǎn)生大量的熱);取對數(shù)生長期的細(xì)胞,用細(xì)胞消化酶將單層生長的細(xì)胞消化下來;懸浮細(xì)胞則直接將細(xì)胞收集到離心管中;離心1200rpm,6min;去除上清液,逐漸加入適量預(yù)冷的細(xì)胞凍存液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中的細(xì)胞終濃度為5×10e6/ml~1×10e7/ml;將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱、凍存時間及操作人員姓名;凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;到達(dá)-80℃時,則可迅速放入液氮中。廣州配制好的細(xì)胞凍存液價格無血清細(xì)胞凍存液說明書.

細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以比較大限度的保存細(xì)胞活力。如今細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。理論上儲存時間是無限的。

凍存細(xì)胞類型:臍血及臍帶組織、外周血、間充質(zhì)干細(xì)胞、多能干細(xì)胞、組織樣本等

① 用于減輕冷凍和解凍復(fù)蘇期間由溫度引起的分子應(yīng)激反應(yīng)

② 分別以2%、5%或10%USP級的二甲基亞砜(DMSO)預(yù)先配制即用型細(xì)胞凍存液

凍存細(xì)胞類型:臍血及臍帶組織、外周血和骨髓

① BloodStor®55-5以55%(重量/體積)的DMSO(USP)級、5%(重量/體積)的葡萄糖-40(USP)級和注射液(WFI)級別的水預(yù)先配制

② BloodStor®100含有**(重量/體積)的DMSO(USP級)

細(xì)胞加凍存液沒有及時凍存會如何?

細(xì)胞凍存的操作步驟是什么

配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;

取對數(shù)生長期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。

去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細(xì)胞消化下來;

離心1000rpm,5min;

去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的**終密度為5×106/ml~1×107/ml;

將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;

在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時間及操作者;

凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。 液氮罐液氮不夠?qū)?xì)胞的影響么?廣州買細(xì)胞凍存液比例注意事項

無血清快速細(xì)胞凍存液,減少各類霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全.杭州凍存細(xì)胞凍存液用血清和培養(yǎng)基的區(qū)別

細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費,而且細(xì)胞一旦離開***開始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進(jìn)行細(xì)胞凍存十分必要。細(xì)胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細(xì)胞儲存在液氮中,溫度達(dá)-196℃,理論上儲存時間是無限的。細(xì)胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細(xì)胞損傷。杭州凍存細(xì)胞凍存液用血清和培養(yǎng)基的區(qū)別

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