江蘇碧云天 cck8

細(xì)菌***對(duì)CCK8檢測(cè)的影響：我們做***的，經(jīng)常會(huì)做到細(xì)菌或***對(duì)細(xì)胞的影響。那這種情況下我們應(yīng)該怎么辦。其實(shí)細(xì)菌防御系統(tǒng)還是非常強(qiáng)大，單獨(dú)和CCK-8在一起孵育時(shí)，不會(huì)發(fā)生還原反應(yīng)，幾乎不會(huì)和細(xì)菌發(fā)生顯色反應(yīng)。而細(xì)菌不需要入胞繁殖，所以結(jié)果還是可信的。**討厭的就是***，我不知道有多少人是做***的。***是需要入胞繁殖的，而且需要借助細(xì)胞的東西來(lái)進(jìn)行繁殖。繁殖過(guò)程中就需要消耗宿主的能量，會(huì)產(chǎn)生氧化還原反應(yīng)，所以我用CCK-8來(lái)測(cè)定***對(duì)細(xì)胞活性的影響或者某個(gè)***對(duì)***復(fù)制的影響時(shí)，我都小心翼翼的測(cè)很多個(gè)時(shí)間點(diǎn)，說(shuō)實(shí)話，效果不是很好。所以我比較喜歡中性紅。CCK8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)原理.江蘇碧云天 cck8

再此，給大家分享個(gè)小事情，有次，因?yàn)閷?shí)驗(yàn)時(shí)間點(diǎn)已經(jīng)到，但是盒子不夠，我們就用了某天的CCK-8試劑盒，***出來(lái)的結(jié)果如圖3。這個(gè)結(jié)果是我所不能接受的。后來(lái)用Sigma的再重復(fù)了一次，如圖4，這種有深有淺的才是該有的結(jié)果。我想說(shuō)的是在有能力選擇范圍內(nèi)，盡量選擇好一點(diǎn)的試劑，免得浪費(fèi)時(shí)間。后來(lái)博士換了導(dǎo)師，換了課題，沒(méi)有再用Sigma的了，用了一個(gè)日本的牌子，名字和貨號(hào)如下，結(jié)果只能說(shuō)justsoso，肯定沒(méi)有Sigma的好用。二次上海cck8測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線***篩選：在測(cè)定一個(gè)***的毒性和安全有效濃度時(shí)，經(jīng)常會(huì)用到CCK-8。

在培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時(shí)間，測(cè)定450nm的吸光度即為空白對(duì)照。在做加藥實(shí)驗(yàn)時(shí)，還應(yīng)考慮***的吸收，可在加入***的培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時(shí)間，測(cè)定450nm的吸光度作為空白對(duì)照。·金屬對(duì)CCK-8顯色有影響：當(dāng)終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會(huì)***5%、15%、90%的顯色反應(yīng)，使靈敏度降級(jí)。如果終濃度是10mM的話，將會(huì)*****。·懸浮細(xì)胞由于染色比較困難，一般需要增加細(xì)胞數(shù)量和延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間。·加入CCK-8時(shí)，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，培養(yǎng)基顏色或pH值已變化，建議換用新鮮的培養(yǎng)基。·用酶標(biāo)儀檢測(cè)前需確保每個(gè)孔內(nèi)沒(méi)有氣泡，否則會(huì)干擾測(cè)定，且要擦拭干凈樣品板了。

CCK法與其他細(xì)胞增殖/毒性檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)比較檢測(cè)方法MTT法XTT法WST-1法CCK法甲臜產(chǎn)物的水溶性差（需加有機(jī)溶劑溶解再檢測(cè)）好好好產(chǎn)品性狀粉末2瓶溶液溶液1瓶溶液使用方法配成溶液后使用現(xiàn)配現(xiàn)用即開(kāi)即用即開(kāi)即用檢測(cè)靈敏度高很高很高高檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)較短較短**短檢測(cè)波長(zhǎng)560-600nm420-480nm420-480nm430-490nm細(xì)胞毒性高，細(xì)胞形態(tài)完全消失很低，細(xì)胞形態(tài)不變很低，細(xì)胞形態(tài)不變很低，細(xì)胞形態(tài)不變?cè)噭┓€(wěn)定性一般較差一般很好批量樣品檢測(cè)可以非常適合非常適合非常適合便捷程度一般便捷便捷非常便捷酚紅和血清對(duì)CCK法的檢測(cè)不會(huì)造成干擾；

CCK-8的用途1.細(xì)胞增殖測(cè)定：細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)在很多領(lǐng)域都會(huì)用到，比如**相關(guān)、損傷后修復(fù)等。

2.***篩選：在測(cè)定一個(gè)***的毒性和安全有效濃度時(shí)，經(jīng)常會(huì)用到CCK-8。

3.細(xì)胞毒性測(cè)定：這個(gè)可以和各個(gè)處理因素對(duì)細(xì)胞活性和增殖的影響，比如在UV、低氧或者什么化學(xué)物品對(duì)細(xì)胞的影響上。

4.**藥敏試驗(yàn)：這個(gè)是用的比較廣的，我見(jiàn)過(guò)做**的團(tuán)隊(duì)，買CCK-8都是一整箱，一整箱的買，比如果子老師所在的團(tuán)隊(duì)，哈哈哈。

5.微生物對(duì)細(xì)胞的毒性或增殖的實(shí)驗(yàn)。 在96孔板中接種細(xì)胞懸液（100μL/孔）。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)（37℃,5% CO2）.上海cck8增殖曲線

CCK8雖好,這些情況下不建議用!江蘇碧云天 cck8

酚紅和血清對(duì)CCK法的檢測(cè)不會(huì)造成干擾；◆細(xì)胞毒性非常低，因此加入WST-8顯色后，可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)從而找到比較好測(cè)定時(shí)間。實(shí)驗(yàn)二：細(xì)胞增殖-毒性檢測(cè)1、在96孔板中配置100μL的細(xì)胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時(shí)（37℃，5%CO2）。2、向培養(yǎng)板加入10μL不同濃度的待測(cè)物質(zhì)。3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間（例如：6、12、24或48小時(shí)）。4、向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要再孔中生成氣泡，它們會(huì)影響OD值的讀數(shù)）。5、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時(shí)。6、用酶標(biāo)儀測(cè)定在450nm處的吸光度。江蘇碧云天 cck8