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來源: 發(fā)布時間:2022-08-14

關于HEPES緩沖溶液的配制,不同的文獻資料有不同的說法。根據用途,一種是單純的HEPES+NaOH,另一種是HEPES+鹽。各種配制方法總結如下:一、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸餾水中,加0.5~1M的NaOH水溶液調節(jié)至少所需pH(HEPES的有效pH范圍是6.8~8.2),然后用蒸餾水定容至500ml,于4攝氏度保存。二、加少量鹽的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、用0.5MNaOH水溶液調節(jié)pH值,***定容。三、2×HEPES緩沖鹽溶液的配制將1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸餾水,用0.5MNaOH調節(jié)至所需pH值,再用蒸餾水定容至100ml即可。AVT注射用HEPES已登記?北京高純HEPES醫(yī)院采購

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(5)緩沖溶液在穩(wěn)定性方面各顯利弊:①Tris-HCl緩沖溶液pH值受外界影響較大,一般現用現配。同時需要注意Tris是一級脂肪胺,分子結構中的氨基易與醛類化合物發(fā)生縮合反應,是一些生化實驗的抑制劑。②硼酸鹽緩沖液有一定毒性,不宜用做注射液或者口服液的緩沖液。③雖然磷酸鹽緩沖溶液穩(wěn)定性很好,但磷酸根具有一定的絡合能力會抑制一些與金屬離子有關的生化反應。④HEPES緩沖溶液是較理想的生物緩沖劑,但其有多種生物學效應,如:縮短血液凝固時間、減緩平滑肌收縮頻率以及阻斷細胞膜上的陰離子通道等,在一定程度上會影響患者身體狀態(tài),使用時應需注意。江蘇高純度HEPESAVT穩(wěn)定供貨注射級HEPES!

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注射級氨丁三醇緩沖液優(yōu)點如下:1.Tris堿的堿性較強,所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液,應用范圍廣;2.Tris緩沖液對生物化學過程干擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀;3.Tris在水中溶解度高,對很多酶的反應是惰性的;4.Tris緩沖能力高,在pH7.5-9.0之間有較強的緩沖能力;5.Tris緩沖劑應用***,在生物化學、分子生物學、體外診斷、化妝品、涂料等領域發(fā)揮重要作用。注射級HEPES!

Tris-HCl緩沖液缺點:1、溫度效應大,如4℃時pH=8.4,37℃時pH=7.42、pH值受溶液濃度影響較大,稀釋十倍,pH值的變化大于0.1;3、對某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。4、易吸收空氣中的CO2,所以配制的緩沖液要蓋嚴密封。HEPES緩沖液HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH7.2~7.4范圍內具有較好的緩沖能力,常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。HEPES緩沖液優(yōu)點:pKa值介于6.0和8.0之間;在水中具有高溶解度;具有膜不透性,不易穿透生物膜;對生化反應影響有限,可耐化學和酶解作用,且不與金屬離子生成復合物或沉淀;有極低的可見光和紫外光吸收;離子濃度、溶液組成和溫度對解離的影響小;HEPES緩沖液缺點:如果將HEPES水溶液暴露于環(huán)境光下三小時,會產生細胞毒性的H2O2;HEPES水溶液必須遠離光線以免影響實驗結果;而配置成溶劑后,要在4℃下保存,建議在短期內使用效果更佳;HEPES粉末放置的時候一般放于干燥的室內,不能直接長時間照射陽光。國內艾偉拓穩(wěn)定供貨注射級HEPES!

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HEPES的使用方法:1)HEPES可以按所需濃度直接加入制備的培養(yǎng)液中進行過濾除菌。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,溶解后用lNNaOH調節(jié)ph7.2,過濾除菌后使用。此時HEPES的使用濃度為10mmol/L。2)亦可配成100x貯存液(lmol/L),使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液,*終應用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES貯存液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,用lNNaOH調pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌,分裝小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存。艾偉拓穩(wěn)定供貨注射級HEPES!山東有登記號HEPES市場價格

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(1)hepes緩沖液可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,再過濾除菌.每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH調pH至7.2,濾過除菌后使用.此時HEPES的使用濃度為10mmol/L.(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L),使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液,**終應用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)hepes緩沖液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,用lNNaOH調pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌,分裝小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存.作者:知乎用戶0mmkBe北京高純HEPES醫(yī)院采購

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