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高效液相色譜分離原理液-液分配(Liquid-liquidPartitionChromatography)及化學(xué)鍵合相色譜(ChemicallyBondedPhaseChromatography) 流動(dòng)相和固定相都是液體。流動(dòng)相與固定相之間應(yīng)互不相溶(極性不同,避免固定液流失),有一個(gè)明顯的分界面。當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱,溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行分配。達(dá)到平衡時(shí),服從于高效液相色譜計(jì)算公式:式中,cs—溶質(zhì)在固定相中濃度;cm—溶質(zhì)在流動(dòng)相中的濃度;Vs—固定相的體積;Vm—流動(dòng)相的體積。LLPC與GPC有相似之處,即分離的順序取決于K,K大的組分保留值大;但也有不同之處,GPC中,流動(dòng)相對(duì)K影響不大,LLPC流動(dòng)相對(duì)K影響較大。a.正相液-液分配色譜法(NormalPhaseliquidChromatography):流動(dòng)相的極性小于固定液的極性。b.反相液-液分配色譜法(ReversePhaseliquidChromatography):流動(dòng)相的極性大于固定液的極性。c.液-液分配色譜法的缺點(diǎn):盡管流動(dòng)相與固定相的極性要求完全不同,但固定液在流動(dòng)相中仍有微量溶解;流動(dòng)相通過(guò)色譜柱時(shí)的機(jī)械沖擊力,會(huì)造成固定液流失。上世紀(jì)70年代末發(fā)展的化學(xué)鍵合固定相(見(jiàn)后),可克服上述缺點(diǎn)。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng),歡迎新老客戶(hù)來(lái)電!安徽液相色譜系統(tǒng)采購(gòu)
高效液相色譜法之實(shí)例:高效液相色譜法,只要求試樣能制成溶液,而不需要?dú)饣?,因此不受試樣揮發(fā)性的限制。對(duì)于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、相對(duì)分子量**于400以上)的有機(jī)物(這些物質(zhì)幾乎占有機(jī)物總數(shù)的75%~80%)原則上都可以應(yīng)用高效液相色譜法來(lái)進(jìn)行分離、分析。據(jù)統(tǒng)計(jì),在目前已知的化合物中,能用氣相色譜分析的大約占20%,而能用液相色譜分析的大約占70~80%。1、環(huán)境中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量分析;2、稠環(huán)芳烴的分析;3.陰離子分析。山西高效液相色譜系統(tǒng)哪家好上海禹重實(shí)業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng),歡迎您的來(lái)電哦!
高效液相色譜分離原理離子對(duì)(IonPairChromatography)離子對(duì)色譜法是將一種(或多種)與溶質(zhì)分子電荷相反的離子(稱(chēng)為對(duì)離子或反離子)加到流動(dòng)相或固定相中,使其與溶質(zhì)離子結(jié)合形成疏水型離子對(duì)化合物,從而控制溶質(zhì)離子的保留行為。其原理可用下式表示:X水相Y-水相===XY-有機(jī)相式中:X水相--流動(dòng)相中待分離的有機(jī)離子(也可是陽(yáng)離子);Y-水相--流動(dòng)相中帶相反電荷的離子對(duì)(如氫氧化四丁基銨、氫氧化十六烷基三甲銨等);XY---形成的離子對(duì)化合物。當(dāng)達(dá)平衡時(shí):KXY=[XY-]有機(jī)相/[X]水相[Y-]水相根據(jù)定義,分配系數(shù)為:DX=[XY-]有機(jī)相/[X]水相=KXY[Y-]水相[討論:DX與保留值的關(guān)系]離子對(duì)色譜法(特別是反相)解決了以往難以分離的混合物的分離問(wèn)題,諸如酸、堿和離子、非離子混合物,特別是一些生化試樣如核酸、核苷、生物堿以及藥物等分離。
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高效液相色譜法介紹基本原理高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC),是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻。因?yàn)檩^小的填充顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,故又稱(chēng)高壓液相色譜。使用高效液相色譜時(shí),液體待檢測(cè)物被注入色譜柱,通過(guò)壓力在固定相中移動(dòng),由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開(kāi)色譜柱,通過(guò)檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào),***通過(guò)分析比對(duì)這些信號(hào)來(lái)判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,***地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒(méi)有本質(zhì)的差別,它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測(cè)器和高效微粒固定相,適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司液相色譜系統(tǒng)服務(wù)值得放心。安徽賽默飛世爾液相色譜系統(tǒng)價(jià)格
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高效液相色譜綜述HPLC的出現(xiàn)不過(guò)三十多年的時(shí)間,但這種分離分析技術(shù)的發(fā)展十分迅猛,應(yīng)用十分***。其儀器結(jié)構(gòu)和流程多種多樣。典型的高效液相色譜儀結(jié)構(gòu)和流程可用下列方框圖表示(SeeFig.3-4)。高效液相色譜儀一般都具備貯液器、高壓泵、梯度洗提裝置(用雙泵)、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、恒溫器、記錄儀等主要部件。高效液相色譜更適宜于分離、分析高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、有生理活性及相對(duì)分子量比較大的物質(zhì),因而廣泛應(yīng)用于核酸、肽類(lèi)、內(nèi)酯、稠環(huán)芳烴、高聚物、藥物、人體代謝產(chǎn)物、表面活性劑,抗氧化劑、殺蟲(chóng)劑、除銹劑的分析等物質(zhì)的分析。安徽液相色譜系統(tǒng)采購(gòu)