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高效液相色譜法介紹

基本原理

高效液相色譜(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)，是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻。因?yàn)檩^小的填充顆粒具有高柱效，但會(huì)引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱高壓液相色譜。

使用高效液相色譜時(shí)，液體待檢測(cè)物被注入色譜柱，通過(guò)壓力在固定相中移動(dòng)，由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同，不同的物質(zhì)順序離開色譜柱，通過(guò)檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào)，***通過(guò)分析比對(duì)這些信號(hào)來(lái)判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法，***地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒(méi)有本質(zhì)的差別，它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測(cè)器和高效微粒固定相，適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。

可支持三個(gè)工作流程。雙梯度流路。同一集成式系統(tǒng)。安徽專業(yè)液相色譜系統(tǒng)廠家直銷

高效液相色譜梯度洗脫

類似于GC中的程序升溫。已成為現(xiàn)代高效液相色譜中不可缺少的部分。梯度洗提，就是載液中含有兩種（或更多）不同極性的溶劑，在分離過(guò)程中按一定的程序連續(xù)改變載液中溶劑的配比和極性，通過(guò)載液中極性的變化來(lái)改變被分離組分的分離因素，以提**離效果。梯度洗提可以分為兩種：

a.低壓梯度（也叫外梯度）：在常壓下，預(yù)先按一定程序?qū)煞N或多種不同極性的溶劑混合后，再用一臺(tái)高壓泵輸入色譜柱。

b.高壓梯度 ( 或稱內(nèi)梯度系統(tǒng) ) ：利用兩臺(tái)高壓輸液泵，將兩種不同極性的溶劑按設(shè)定的比例送入梯度混合室，混合后，進(jìn)入色譜柱。

江蘇賽默飛世爾液相色譜系統(tǒng)哪家好在設(shè)備高度上，Vanquish系統(tǒng)比類似的模塊化系統(tǒng)要矮25%，這**提高了實(shí)驗(yàn)室的安全性和儀器使用的便利性。

高效液相色譜分離原理

離子交換

(Ion-exchange Chromatography)

IEC是以離子交換劑作為固定相。IEC是基于離子交換樹脂上可電離的離子與流

動(dòng)相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子進(jìn)行可逆交換，依據(jù)這些離子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。以陰離子交換劑為例，其交換過(guò)程可表示如下：

X-（溶劑中） (樹脂-R4N Cl-)=== （樹脂-R4N X-) Cl- （溶劑中）

當(dāng)交換達(dá)平衡時(shí)：

KX=[-R4N X-][ Cl-]/[-R4N Cl-][ X-]

分配系數(shù)為：

DX=[-R4N X-]/[X-]= KX [-R4N Cl-]/[Cl-]

[討論：DX與保留值的關(guān)系]

凡是在溶劑中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換色譜法來(lái)進(jìn)行分離。

串聯(lián) LC 或 LC-MS應(yīng)用提**析通量 Vanquish Duo系統(tǒng)

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使用系統(tǒng)的主動(dòng)預(yù)加熱功能，以避免來(lái)自溫度效應(yīng)的性能損耗，確保進(jìn)入色譜柱內(nèi)的溶劑與色譜柱溫度匹配。安徽專業(yè)液相色譜系統(tǒng)廠家直銷

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“該儀器在同時(shí)運(yùn)行兩種相同化學(xué)分離或者同時(shí)運(yùn)行兩種不同化學(xué)分離時(shí)，極大地提高了分析通量，使我們能夠快速?gòu)耐粯悠分蝎@取大量表征數(shù)據(jù)。”--Jonathan Bones 博士 國(guó)家生物加工研究和培訓(xùn)研究所（NIBRT）

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