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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-01-23

高效液相色譜法介紹基本原理高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC),是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻。因?yàn)檩^小的填充顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,故又稱高壓液相色譜。使用高效液相色譜時(shí),液體待檢測(cè)物被注入色譜柱,通過(guò)壓力在固定相中移動(dòng),由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開(kāi)色譜柱,通過(guò)檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào),***通過(guò)分析比對(duì)這些信號(hào)來(lái)判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,***地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒(méi)有本質(zhì)的差別,它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測(cè)器和高效微粒固定相,適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。液相色譜系統(tǒng),就選上海禹重實(shí)業(yè)有限公司,用戶的信賴之選,歡迎新老客戶來(lái)電!廣東Vanquish液相色譜系統(tǒng)多少錢

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高效液相色譜分離原理離子對(duì)(IonPairChromatography)離子對(duì)色譜法是將一種(或多種)與溶質(zhì)分子電荷相反的離子(稱為對(duì)離子或反離子)加到流動(dòng)相或固定相中,使其與溶質(zhì)離子結(jié)合形成疏水型離子對(duì)化合物,從而控制溶質(zhì)離子的保留行為。其原理可用下式表示:X水相Y-水相===XY-有機(jī)相式中:X水相--流動(dòng)相中待分離的有機(jī)離子(也可是陽(yáng)離子);Y-水相--流動(dòng)相中帶相反電荷的離子對(duì)(如氫氧化四丁基銨、氫氧化十六烷基三甲銨等);XY---形成的離子對(duì)化合物。當(dāng)達(dá)平衡時(shí):KXY=[XY-]有機(jī)相/[X]水相[Y-]水相根據(jù)定義,分配系數(shù)為:DX=[XY-]有機(jī)相/[X]水相=KXY[Y-]水相[討論:DX與保留值的關(guān)系]離子對(duì)色譜法(特別是反相)解決了以往難以分離的混合物的分離問(wèn)題,諸如酸、堿和離子、非離子混合物,特別是一些生化試樣如核酸、核苷、生物堿以及藥物等分離。山東液相色譜系統(tǒng)供應(yīng)商上海禹重實(shí)業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng),有想法可以來(lái)我司咨詢!

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液相色譜類型液相色譜按其分離機(jī)理,可分為四種類型--吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜、凝膠色譜法凝膠色譜法目前,凝膠色譜法既適用于水溶液的體系,又適用于有機(jī)溶劑的體系。當(dāng)所用的洗脫劑為水溶液時(shí),稱為凝膠過(guò)濾色譜,凝膠過(guò)濾色譜在生物界的應(yīng)用比較多;采用有機(jī)溶劑為洗脫劑時(shí),稱為凝膠滲透色譜,凝膠滲透色譜在高分子領(lǐng)域應(yīng)用比較多。四種不同類型的液相色譜,可以依據(jù)樣品性質(zhì)的不同,選擇不同的方法,靈活應(yīng)用。

高效液相色譜綜述HPLC的出現(xiàn)不過(guò)三十多年的時(shí)間,但這種分離分析技術(shù)的發(fā)展十分迅猛,應(yīng)用十分***。其儀器結(jié)構(gòu)和流程多種多樣。典型的高效液相色譜儀結(jié)構(gòu)和流程可用下列方框圖表示(SeeFig.3-4)。高效液相色譜儀一般都具備貯液器、高壓泵、梯度洗提裝置(用雙泵)、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、恒溫器、記錄儀等主要部件。高效液相色譜更適宜于分離、分析高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、有生理活性及相對(duì)分子量比較大的物質(zhì),因而廣泛應(yīng)用于核酸、肽類、內(nèi)酯、稠環(huán)芳烴、高聚物、藥物、人體代謝產(chǎn)物、表面活性劑,抗氧化劑、殺蟲(chóng)劑、除銹劑的分析等物質(zhì)的分析。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng),期待您的光臨!

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高效液相色譜相關(guān)術(shù)語(yǔ)色譜圖(chromatogram)——樣品流經(jīng)色譜柱和檢測(cè)器,所得到的信號(hào)-時(shí)間曲線,又稱色譜流出曲線(elutionprofile)?;€(baseline)——經(jīng)流動(dòng)相沖洗,柱與流動(dòng)相達(dá)到平衡后,檢測(cè)器測(cè)出一段時(shí)間的流出曲線。一般應(yīng)平行于時(shí)間軸。噪音(noise)——基線信號(hào)的波動(dòng)。通常因電源接觸不良或瞬時(shí)過(guò)載、檢測(cè)器不穩(wěn)定、流動(dòng)相含有氣泡或色譜柱被污染所致。漂移(drift)——基線隨時(shí)間的緩緩變化。主要由于操作條件如電壓、溫度、流動(dòng)相及流量的不穩(wěn)定所引起,柱內(nèi)的污染物或固定相不斷被洗脫下來(lái)也會(huì)產(chǎn)生漂移。廣東Vanquish液相色譜系統(tǒng)多少錢