數(shù)字PCR是一種核酸分子***定量技術(shù)。當(dāng)前核酸分子的定量有三種方法,光度法基于核酸分子的吸光度來定量;,Ct值就是指可以檢測到熒光值對應(yīng)的循環(huán)數(shù);數(shù)字PCR是***的定量技術(shù),基于單分子PCR方法來進(jìn)行計(jì)數(shù)的核酸定量,是一種***定量的方法。主要采用當(dāng)前分析化學(xué)熱門研究領(lǐng)域的微流控或微滴化方法,將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè)。這樣經(jīng)過PCR循環(huán)之后,有一個(gè)核酸分子模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號,沒有模板的反應(yīng)器就沒有熒光信號。根據(jù)相對比例和反應(yīng)器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度。準(zhǔn)確度不完全依賴于擴(kuò)增效率。南京國產(chǎn)...
基因檢測**前沿的兩種方法是:高通量測序(NGS)和數(shù)字PCR (dPCR)。 高通量測序技術(shù)又稱“下一代”測序技術(shù),可以一次對幾十萬到幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測定,功能強(qiáng)大,但是實(shí)驗(yàn)操作較復(fù)雜,數(shù)據(jù)分析難度較大,檢測周期長,成本較高。數(shù)字PCR技術(shù)是目前**精細(xì)**靈敏的基因檢測技術(shù),借助微液滴或微腔室,通過單個(gè)模板分子的PCR擴(kuò)增,可實(shí)現(xiàn)不依賴于標(biāo)準(zhǔn)曲線和參照樣本的***定量。與NGS相比,數(shù)字PCR靈敏度高、檢測速度快、操作簡便、結(jié)果易讀、成本低廉等優(yōu)勢使其更適合臨床檢測,成為精細(xì)醫(yī)療實(shí)現(xiàn)平民化、大眾化的比較好選擇。 ...
要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制,務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過程中發(fā)生了什么。基本 PCR 運(yùn)行可以分為三個(gè)階段: 指數(shù)期 每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定 ** 反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。 線性期(高變異性) 隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。 平臺期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測) 反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長,PCR 產(chǎn)物將...
MicroDrop-100數(shù)字PCR有什么優(yōu)勢? 1.MicroDrop-100數(shù)字PCR所產(chǎn)生的微滴數(shù)是目前市面微滴式數(shù)字PCR里相對較高的產(chǎn)品,可將樣品分割為10萬份,更符合泊松分布數(shù)學(xué)模型,可以忽略更多的誤差因素;此外,高微滴數(shù)在多重?cái)?shù)字PCR上的優(yōu)勢也會(huì)更大。 2.數(shù)字PCR可選全中文界面,對國內(nèi)用戶十分友好,可以說,拿到即可上手。 3.數(shù)字PCR是一個(gè)開放性的平臺,在試劑方面除了產(chǎn)品列表上的檢測試劑盒,還有通用的反應(yīng)預(yù)混液,客戶自行設(shè)計(jì)引物探針即可進(jìn)行新項(xiàng)目的檢測。此外,永諾非常歡迎進(jìn)行定制、合作開發(fā)檢測試劑盒。 ...
MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在2分鐘內(nèi)生成50萬微滴,單次運(yùn)行生成400萬微滴,微滴體積達(dá)皮升級,檢測線性范圍達(dá)到5個(gè)數(shù)量級,各項(xiàng)指標(biāo)均超越國內(nèi)外的主流產(chǎn)品。 MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動(dòng)的方法將樣本分割成50萬份,打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。 全封閉體系,自動(dòng)化流程操作。無錫微滴式數(shù)字PCR報(bào)價(jià) MicroDrop-100...
數(shù)字PCR是一種核酸分子***值定量技術(shù),能夠直接數(shù)出DNA分子的個(gè)數(shù),是對起始樣品的***值定量。該試劑盒采用創(chuàng)新的一步法逆轉(zhuǎn)錄數(shù)字PCR技術(shù),將*****的RNA逆轉(zhuǎn)錄及數(shù)字PCR擴(kuò)增整合到一個(gè)反應(yīng)體系,單管雙檢同時(shí)測定*****的兩個(gè)**基因,消除***變異帶來的漏檢風(fēng)險(xiǎn)。 MicroDrop-100全新微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)為永諾生物旗下子公司永諾醫(yī)療自主研發(fā)的檢測設(shè)備,此系統(tǒng)檢測無需依賴標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),可達(dá)到***定量,具有超高靈敏度,檢測靈敏度高達(dá)1個(gè)拷貝,且具有較好的重復(fù)性,降低同樣本不同批次的檢測差異。數(shù)字PCR結(jié)果采取終點(diǎn)判讀法,相比熒光定量PC...
要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制,務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過程中發(fā)生了什么?;?PCR 運(yùn)行可以分為三個(gè)階段: 指數(shù)期 每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定 ** 反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。 線性期(高變異性) 隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。 平臺期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測) 反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長,PCR 產(chǎn)物將...
MicroDrop-100數(shù)字PCR系統(tǒng)具有如下優(yōu)點(diǎn): 1、JUE對定量,結(jié)果判讀不需要依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線; 2、突破局限,檢測靈敏度可低至萬分之一; 3、專利設(shè)計(jì)的具有高精度復(fù)雜三維微納防污染結(jié)構(gòu)的微流控芯片,單張可同時(shí)處理1-8個(gè)樣本; 4、一鍵式自動(dòng)操作,20uL PCR體系可生成100,000微滴,8個(gè)樣本單次微滴生成*需2分鐘; 5、FAM、HEX(VIC)雙熒光通道,半導(dǎo)體激光器做為激發(fā)光源相比LED光源,穩(wěn)定性高,功率穩(wěn)定不影響檢測靈敏度,單色性能優(yōu)異降低對檢測特異性的影響,且方向性好; 6、檢測器為2個(gè)光電倍增管,靈敏度及增益優(yōu)于MPCC或CC...
定量PCR和數(shù)字PCR的特點(diǎn): 1. 在20多年的使用和發(fā)展中,定量PCR作為一種技術(shù)平臺,已經(jīng)產(chǎn)出海量的數(shù)據(jù),在工業(yè)界和分子檢測的某些應(yīng)用上,定量PCR已經(jīng)成為“金標(biāo)準(zhǔn)”。基礎(chǔ)研究方面,則形成了被稱為MIQE的“定量PCR標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)指南”。 2. 在定量PCR的各種應(yīng)用中,基因表達(dá)分析(gene expression analysis)的應(yīng)用比重約占七成,綜合各種因素來看,眼下定量PCR還是進(jìn)行基因表達(dá)研究的理想手段。 3. 上述的“各種因素”具體展開,主要包括:通量、自動(dòng)化程度、各種檢測探針與染料、檢測通道、成本和可參考...
dPCR的基本原理 目前dPCR主要有兩種形式,芯片式和液滴式,但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè)。這樣經(jīng)過PCR循環(huán)之后,有一個(gè)核酸分子模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號,沒有模板的反應(yīng)器就沒有熒光信號。根據(jù)相對比例和反應(yīng)器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度??梢允褂脦追N不同的方法來分配樣品,包括微孔板,毛細(xì)管,油乳劑和帶有核酸結(jié)合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過假設(shè)分子種群遵循泊松分布來估計(jì)不同分子的數(shù)量,根據(jù)泊松分布的原理,反應(yīng)體系中目標(biāo)分子的拷貝數(shù)可以通過公式A=-ln[(N-X)...
要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制,務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過程中發(fā)生了什么?;?PCR 運(yùn)行可以分為三個(gè)階段: 指數(shù)期 每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定 ** 反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。 線性期(高變異性) 隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。 平臺期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測) 反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長,PCR 產(chǎn)物將...
研究方向 *****的實(shí)時(shí)監(jiān)控 已有數(shù)篇文章報(bào)道了使用數(shù)字PCR技術(shù)對患者***過程中的循環(huán)**DNA(ctDNA)進(jìn)行檢測,實(shí)時(shí)監(jiān)控疾病進(jìn)展。在非小細(xì)胞肺*、乳腺*和腸*等多種**患者中都取得了令人鼓舞的結(jié)果。與影像學(xué)及其他常規(guī)指標(biāo)相比,ctDNA突變及豐度改變通常會(huì)提前數(shù)月出現(xiàn),這樣就可以提醒醫(yī)生及時(shí)調(diào)整***方案,使患者得到更有效的***。 隨著數(shù)字PCR熒光通道的增加和多指標(biāo)檢測的成熟,數(shù)字PCR將會(huì)進(jìn)入更多應(yīng)用領(lǐng)域,有力推動(dòng)生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)診斷、檢驗(yàn)檢疫、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域的快速發(fā)展。 分辨率——低至0.1倍基因表達(dá)差異。常州廣州永諾數(shù)字PCR ...
MicroDrop-100數(shù)字PCR有什么優(yōu)勢? 1.MicroDrop-100數(shù)字PCR所產(chǎn)生的微滴數(shù)是目前市面微滴式數(shù)字PCR里相對較高的產(chǎn)品,可將樣品分割為10萬份,更符合泊松分布數(shù)學(xué)模型,可以忽略更多的誤差因素;此外,高微滴數(shù)在多重?cái)?shù)字PCR上的優(yōu)勢也會(huì)更大。 2.數(shù)字PCR可選全中文界面,對國內(nèi)用戶十分友好,可以說,拿到即可上手。 3.數(shù)字PCR是一個(gè)開放性的平臺,在試劑方面除了產(chǎn)品列表上的檢測試劑盒,還有通用的反應(yīng)預(yù)混液,客戶自行設(shè)計(jì)引物探針即可進(jìn)行新項(xiàng)目的檢測。此外,永諾非常歡迎進(jìn)行定制、合作開發(fā)檢測試劑盒。 ...
數(shù)字PCR也叫Digital PCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說,數(shù)字PCR對結(jié)果的判定不依賴于擴(kuò)增曲線循環(huán)Ct值,不受擴(kuò)增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個(gè)數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。 數(shù)字PCR基本原理是將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中,使每個(gè)微滴單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個(gè)單元都會(huì)對目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,然后再對每個(gè)單元進(jìn)行熒光信號的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中,這也是數(shù)字...
儀器特點(diǎn): MicroDrop-100A樣本制備儀 1、單張芯片一次可處理8個(gè)樣本; 2、20微升體系生成100,000微滴; 3、單次微滴生成*需2分鐘; 4、一鍵式自動(dòng)化操作。儀器參數(shù)樣本體積20μl容量1~8個(gè)樣本微滴總數(shù)100,000反應(yīng)時(shí)間2分鐘/芯片儀器尺寸(寬x深x高)300*400*145mm MD Detector 微滴檢測儀 1、全封閉體系,自動(dòng)化流程操作; 2、FAM、VIC雙通道熒光檢測; 3、檢測靈敏度高達(dá)萬分之一; 4、通量達(dá)96個(gè)樣品。儀器參數(shù)線性范圍6個(gè)數(shù)量級通量1~96個(gè)樣...
MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在2分鐘內(nèi)生成50萬微滴,單次運(yùn)行生成400萬微滴,微滴體積達(dá)皮升級,檢測線性范圍達(dá)到5個(gè)數(shù)量級,各項(xiàng)指標(biāo)均超越國內(nèi)外的主流產(chǎn)品。 MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動(dòng)的方法將樣本分割成50萬份,打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。 MiniDrop?研發(fā)團(tuán)隊(duì)由微流控、光學(xué)、機(jī)電學(xué)、化學(xué)、臨床...
定量PCR和數(shù)字PCR的特點(diǎn): 1. 在20多年的使用和發(fā)展中,定量PCR作為一種技術(shù)平臺,已經(jīng)產(chǎn)出海量的數(shù)據(jù),在工業(yè)界和分子檢測的某些應(yīng)用上,定量PCR已經(jīng)成為“金標(biāo)準(zhǔn)”?;A(chǔ)研究方面,則形成了被稱為MIQE的“定量PCR標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)指南”。 2. 在定量PCR的各種應(yīng)用中,基因表達(dá)分析(gene expression analysis)的應(yīng)用比重約占七成,綜合各種因素來看,眼下定量PCR還是進(jìn)行基因表達(dá)研究的理想手段。 3. 上述的“各種因素”具體展開,主要包括:通量、自動(dòng)化程度、各種檢測探針與染料、檢測通道、成本和可參考...
要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制,務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過程中發(fā)生了什么?;?PCR 運(yùn)行可以分為三個(gè)階段: 指數(shù)期 每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定 ** 反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。 線性期(高變異性) 隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。 平臺期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測) 反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長,PCR 產(chǎn)物將...
數(shù)字PCR可以直接計(jì)算目標(biāo)序列的拷貝數(shù),因此無需依賴于對照樣品和標(biāo)準(zhǔn)曲線就可以進(jìn)行精確的***定量檢測;此外,由于數(shù)字PCR在進(jìn)行結(jié)果判讀時(shí)*判斷有/無兩種擴(kuò)增狀態(tài),因此也不需要檢測熒光信號與設(shè)定閾值線的交點(diǎn),完全不依賴于Ct值的鑒定,因此數(shù)字PCR的反應(yīng)受擴(kuò)增效率的影響**降低,對PCR反應(yīng)***物的耐受能力**提高;數(shù)字PCR實(shí)驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系分配的過程可以極大程度上降低與目標(biāo)序列有競爭性作用的背景序列濃度,因此數(shù)字PCR技術(shù)也特別適合在復(fù)雜背景中檢測稀有突變。支持多重?cái)?shù)字PCR,可選全中文分析軟件。寧波廣州永諾數(shù)字PCR哪家好 數(shù)字PCR(Digtal PC...
研究方向 病原微生物的檢測(***、細(xì)菌等) 疾病預(yù)防控制中心、出入境檢驗(yàn)檢疫局系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室目前主要采用基于TaqMan探針法的定量PCR體系對病原微生物進(jìn)行核酸水平的檢測,而這些目前正在使用著的檢測體系可以無縫地轉(zhuǎn)移到QX200上,從而滿足該類實(shí)驗(yàn)室對于檢測結(jié)果的要求:靈敏度更高、重復(fù)性更好、無需依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線的***定量結(jié)果,同時(shí)操作簡便。 對于其他類型的研究實(shí)驗(yàn)室,也可以利用ddPCR靈敏度高的特點(diǎn),對各種樣品中的病原微生物展開***的研究。如HIV抗逆轉(zhuǎn)錄***治療過程中***殘留量的監(jiān)控;HBV耐藥突變...
定量PCR和數(shù)字PCR的特點(diǎn): 5. 目前定量PCR已經(jīng)能實(shí)現(xiàn)高通量樣品條件下的自動(dòng)化操作。 6. 數(shù)字PCR在單分子層面上的***定量,可以徹底擺脫對標(biāo)準(zhǔn)曲線的依賴而直接給出靶序列的拷貝數(shù),提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果在批內(nèi)和批間的穩(wěn)定性,甚至能用來對標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行定標(biāo)。 7. 基于***定量的方式,數(shù)字PCR結(jié)果的高重復(fù)性和高精度可實(shí)現(xiàn)微小差異的基因表達(dá)分析,如等位基因的不平衡表達(dá)、單細(xì)胞基因表達(dá)分析、microRNA表達(dá)分析等等。所謂“微小差異”的標(biāo)準(zhǔn)一般而言是指表達(dá)水平的差異在2倍以內(nèi)。 ...
數(shù)字PCR也叫Digital PCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說,數(shù)字PCR對結(jié)果的判定不依賴于擴(kuò)增曲線循環(huán)Ct值,不受擴(kuò)增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個(gè)數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。 數(shù)字PCR基本原理是將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中,使每個(gè)微滴單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個(gè)單元都會(huì)對目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,然后再對每個(gè)單元進(jìn)行熒光信號的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中,這也是數(shù)字...
要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制,務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過程中發(fā)生了什么。基本 PCR 運(yùn)行可以分為三個(gè)階段: 指數(shù)期 每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定 ** 反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。 線性期(高變異性) 隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。 平臺期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測) 反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長,PCR 產(chǎn)物將...
數(shù)字PCR(d PCR)是近年來引起重視并迅速發(fā)展起來的一種突破性的核酸定量分析技術(shù)。該技術(shù)先將核酸模板進(jìn)行稀釋,分配到大量**的反應(yīng)單元中,使每個(gè)反應(yīng)單元中只有單個(gè)模板分子,然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng),擴(kuò)增結(jié)束后對每個(gè)反應(yīng)室的熒光信號進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,來定量DNA拷貝數(shù)。數(shù)字PCR采用先擴(kuò)增后定量,因此不依賴擴(kuò)增曲線的循環(huán)閾值(Ct),也無需采用內(nèi)參基因和標(biāo)準(zhǔn)曲線,準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好,可以實(shí)現(xiàn)***定量分析。由于其獨(dú)特的技術(shù)優(yōu)勢,已經(jīng)在臨床診斷、轉(zhuǎn)基因成分定量、單細(xì)胞基因表達(dá)分析、環(huán)境微生物檢測和下一代測序等研究領(lǐng)域顯示出巨大的優(yōu)勢和應(yīng)用前景。高靈敏度——數(shù)字PCR的靈敏度與同體積反...
數(shù)字PCR也叫Digital PCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說,數(shù)字PCR對結(jié)果的判定不依賴于擴(kuò)增曲線循環(huán)Ct值,不受擴(kuò)增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個(gè)數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。 數(shù)字PCR基本原理是將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中,使每個(gè)微滴單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個(gè)單元都會(huì)對目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,然后再對每個(gè)單元進(jìn)行熒光信號的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中,這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別...
微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)在傳統(tǒng)的PCR擴(kuò)增前對樣品進(jìn)行微滴化處理,即將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成成千上萬個(gè)納升級的微滴,其中每個(gè)微滴或不含待檢核酸靶分子,或者含有一個(gè)至數(shù)個(gè)待檢核酸靶分子。經(jīng)PCR擴(kuò)增后,逐個(gè)對每個(gè)微滴進(jìn)行檢測,有熒光信號的微滴判讀為1,沒有熒光信號的微滴判讀為0,根據(jù)泊松分布原理及陽性微滴的個(gè)數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度。 與傳統(tǒng)PCR相比所具有的優(yōu)勢 不依賴Ct值或內(nèi)參基因,即可確定低至單拷貝的待檢靶分子的***數(shù)目。微滴技術(shù)讓數(shù)字PCR更低成本,且更實(shí)用。 雙通道熒光檢測,支持Ev...
微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,單個(gè)樣本在微米級流道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在3分鐘內(nèi)生成10萬微滴,單次運(yùn)行生成80萬微滴,微滴體積達(dá)皮升級,檢測線性范圍達(dá)到6個(gè)數(shù)量級,各項(xiàng)指標(biāo)均超越國內(nèi)外主流產(chǎn)品。 在液滴生成數(shù)上,MicroDrop?能達(dá)到國外同級別產(chǎn)品的5倍。與此同時(shí),設(shè)備制作成本只有國外同類產(chǎn)品的一半。這減低了精細(xì)醫(yī)療的成本,打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。這意味著在未來,采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進(jìn)行低成本、高靈敏、快速的無創(chuàng)檢測成為可能。 采用主流可靠的解決方案,由微滴生成儀、微滴檢測儀...
數(shù)字PCR的應(yīng)用 檢驗(yàn)檢疫 食品安全 ?轉(zhuǎn)基因食品檢測(國標(biāo)) ?病原菌鑒定 ?動(dòng)物源性檢測分析 科研 ?基因表達(dá)差異監(jiān)測 ?CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗(yàn)證 ?甲基化含量鑒定 ?單細(xì)胞研究:測序、PCR 臨床 ?**液體活檢:早篩、用藥、監(jiān)測、復(fù)發(fā) ?無創(chuàng)產(chǎn)前篩查:低成本、快速 ?***性疾病:HBV、HIV定量 據(jù)悉,MiniDrop?**團(tuán)隊(duì)由微流控、光學(xué)、機(jī)電學(xué)、化學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)等多學(xué)科交叉領(lǐng)域的**組成,依托精密儀器研發(fā)、生物...
研究方向基因表達(dá)差異研究 檢測時(shí)完全不依賴傳統(tǒng)的Ct值即可實(shí)現(xiàn)真正意義上的***定量,從而提供了比實(shí)時(shí)熒光定量PCR更精確的基因差異表達(dá)研究,尤其對于那些靶基因表達(dá)差異微小的情況:microRNA、lncRNAs等的表達(dá)分析、等位基因的不平衡表達(dá)、單細(xì)胞基因表達(dá)分析、Exosome內(nèi)核酸分子定量分析等。 拷貝數(shù)變異(CNV)研究 微滴化的樣品處理及檢測,這種擺脫Ct值的計(jì)算方法而直接獲取目標(biāo)基因的***拷貝數(shù),為拷貝數(shù)變異的研究提供了***的檢測精度。是其他諸如二代測序、芯片雜交等平臺無法達(dá)到的,因此采用數(shù)字PCR能夠有效對NGS、aCGH的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)...
MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在2分鐘內(nèi)生成50萬微滴,單次運(yùn)行生成400萬微滴,微滴體積達(dá)皮升級,檢測線性范圍達(dá)到5個(gè)數(shù)量級,各項(xiàng)指標(biāo)均超越國內(nèi)外的主流產(chǎn)品。 MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動(dòng)的方法將樣本分割成50萬份,打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。 檢測靈敏度高達(dá)萬分之一。杭州永諾數(shù)字PCR價(jià)格 二代測序輔...