膠原蛋白的提取方法:酶法提取:酶法提取是利用蛋白酶使膠原溶解,水解條件溫和,反應速率快,提取的膠原蛋白仍有完整的三股螺旋結構,蛋白純度高,理化性質穩(wěn)定,且無環(huán)境污染。酶法提取常用的蛋白酶有:胃蛋白酶、胰蛋白酶或者復合酶。工藝可選擇一步法,即利用酶液直接提?。欢?..
糖原染色是病理學中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質、基底膜等。過碘酸(又稱高...
總RNA的定義:總RNA=mRNA+tRNA+rRNA,即:總RNA就是指mRNA、tRNA、rRNA的總和。這是在還沒有發(fā)現(xiàn)lncRNA等microRNA的時候的概念。但是卻被各大公司默認的概念,一直延續(xù)至今。所以各位可以去各大公司的網(wǎng)站,看一看總RNA提取...
細胞轉染的原理、操作步驟以及小技巧:脂質體轉染操作步驟:(1)細胞培養(yǎng):取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液,37℃CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉染后不利篩選細胞。(2)轉染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔...
特殊染色化學試劑的選擇:化學試劑的選擇主要針對自配試劑而言,對于商品化試劑盒則在于染液質量。1、一般要求選用很好品牌的化學試劑,特別是一些染色中關鍵的試劑。很好的化學試劑(如Sigma、國藥、阿拉丁、西隴等)是保證高質量染液的前提和關鍵,特別對于染液中的關鍵試...
糖原及粘液染色法注意事項:1、糖原的固定要及時,而且標本要新鮮。2、如用無水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病,因無水酒精滲透較慢,而且容易產生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml4...
細胞轉染為什么不能加血清:傳統(tǒng)的轉染試劑一般會增加細胞的通透性,這樣會把血清中的成分帶入細胞,造成細胞毒性。陽離子脂質體,轉染的過程是帶正電的脂質體與核酸帶負電的磷酸基團形成復合物被細胞內吞。血清中含有大量的蛋白質,在轉染過程中,帶負電的蛋白質可能干擾陽離子脂...
含血清細胞凍存液凍存細胞時遇到的問題:1.凍存細胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液,此步可省略)。2.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步驟繁瑣,耗時耗力。3.含血清,細胞污染(細菌、霉菌和支原體等)的風險更高。4.血清批次、品...
染色試劑盒:染色試劑盒,由蘇木精染色劑和EA/OG混合染色劑組成。該產品用于在非婦科樣本制備中,和PrepStain液基細胞自動制片機配合使用,對臨床樣本進行染色,以便樣本的進一步篩查和檢測注冊號國食藥監(jiān)械1號生產廠商名稱(中文)產品性能結構及組成試劑盒由蘇木...
永生化的細胞系往往相當健壯,因此,使用實驗室自制的凍存培養(yǎng)基,效果也不錯。典型的配方是在生長培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清,或只是在血清中加入10%的DMSO。DMSO的作用是取代細胞中的一些水,以防止冰晶形成,刺穿細胞。據(jù)賽默飛世爾科...
含血清細胞凍存液凍存細胞時遇到的問題:1.凍存細胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液,此步可省略)。2.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步驟繁瑣,耗時耗力。3.含血清,細胞污染(細菌、霉菌和支原體等)的風險更高。4.血清批次、品...
總RNA的定義:總RNA=mRNA+tRNA+rRNA,即:總RNA就是指mRNA、tRNA、rRNA的總和。這是在還沒有發(fā)現(xiàn)lncRNA等microRNA的時候的概念。但是卻被各大公司默認的概念,一直延續(xù)至今。所以各位可以去各大公司的網(wǎng)站,看一看總RNA提取...
影響轉染試驗的因素:細胞狀態(tài)變化:(1)轉染試劑與細胞不匹配細胞轉染較適合的不是原代細胞,也不是傳代很多次的細胞。這是因為細胞培養(yǎng)在實驗室中保存數(shù)月和數(shù)年后會經歷突變,總染色體重組或基因調控變化等而演化。這會導致和轉染相關的細胞行為的變化。較適合轉染的細胞是經...
糖原染色生物技術優(yōu)勢:(1)擁有針對不同組織的特殊固定液;(2)擁有日本進口的各種染料,保證切片染色效果;(3)擁有千錘百煉的專業(yè)人才隊伍,保證實驗快速、有效的完成。實驗樣本要求:(1)植物材料在選擇時須盡可能不損傷植物體或所需要的部分;(2)動物材料取用時需...
細胞轉染那些事兒:1.選擇傳代次數(shù)較低并處于對數(shù)生長期的細胞進行轉染。對大多數(shù)細胞而言,均需要在轉染當天或前現(xiàn)在鋪板,第二天上午進行轉染,48h后收集細胞進行功能檢測。對于原代細胞,可用促有絲分裂刺激物進行細胞活化。2.對于貼壁細胞,一般要求在轉染前一日,用胰...
細胞轉染實驗的方法有哪些:1..電穿孔法。通過短暫的高電場電脈沖處理細胞,沿細胞膜的電壓差異會導致細胞膜的暫時穿孔。DNA被認為是穿過孔擴散到細胞內的。電脈沖和場強的優(yōu)化對于成功的轉染非常重要,因為過高的場強和過長的電脈沖時間會不可逆地傷害細胞膜而裂解細胞。理...
無血清凍存液注意事項:1、請選擇對數(shù)生長期細胞進行凍存。2、凍存液加入細胞后,請盡快放入-80C冰箱凍存。3、本產品凍存細胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。4、若需長期凍存細胞,請轉移至液氮罐中貯存。5、凍存液中含DMSO成分,為了您的安全和健康,請穿實驗服...
細胞凍存的注意事項:1.為保持細胞較大存活率,一般都采用慢凍存融的方法。2.凍存物距液氮面越近溫度越低。標準的低凍速度為-1℃~12℃/分鐘,當溫度下降達-25℃時,下降速度可增至-5~-10℃/分鐘,到-100℃時則可迅速凍入液氮中。因此要適當掌握凍存物下降...
特染的應用價值:現(xiàn)代病理學中免疫組織化學技術、電子顯微鏡技術以及其它細胞及分子生物學技術應用日益普遍,但由于這些技術要求一定的實驗條件以及所需的試劑價格較為昂貴,對于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學技術則具有無需復雜的實驗條件以及較為昂...
石蠟包埋組織RNA快速提取試劑盒(離心柱型):原理簡介:改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除,較后低鹽的RNasefr...
在細胞中,根據(jù)結構功能的不同,RNA主要分三類,即tRNA(轉運RNA),rRNA(核糖體RNA),mRNA(信使RNA)。mRNA是合成蛋白質的模板,內容按照細胞核中的DNA所轉錄;tRNA是mRNA上堿基序列(即遺傳密碼子)的識別者和氨基酸的轉運者;rRN...
人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體,包括內皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時,外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節(jié)受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜...
細胞電轉染實驗的幾點建議:1.電場強度要合適合適的電場強度對于電轉染實驗非常重要,電場強度不能過高,過高會增加細胞的死亡率;也不能過低,過低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同細胞系具有不同的較佳場強值,實驗前應測定所轉染細胞系的較佳電場強度。2.細胞狀態(tài)...
永生化的細胞系往往相當健壯,因此,使用實驗室自制的凍存培養(yǎng)基,效果也不錯。典型的配方是在生長培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清,或只是在血清中加入10%的DMSO。DMSO的作用是取代細胞中的一些水,以防止冰晶形成,刺穿細胞。據(jù)賽默飛世爾科...
動物細胞RNA提?。?、懸浮細胞:可直接離心后棄掉培養(yǎng)基,用無菌PBS清洗1~2遍后,再用適量PBS懸浮起來,然后再加入裂解液進行裂解。千萬不要完全棄掉液體后,往沉淀細胞里直接加入裂解液,這樣會使外表層的細胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細胞外側,從而限制沉...
PAS染色的臨床意義①幫助鑒別不典型巨核細胞和霍奇金細胞或Reed-Sternberg細胞,前者呈強陽性反應,后者呈弱陽性或陰性反應。②幫助鑒別戈謝細胞和尼曼-匹克細胞,前者呈強陽性反應,后者呈弱陽性反應,且空泡中心為陰性反應。③幫助鑒別白血病細胞和腺骨髓轉移...
無血清快速細胞凍存液,通用于各種動物細胞株。特別配方具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。不含動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細胞的凍存,也適用于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞的凍存。產品特色:1.高安全性,...
當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時,外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節(jié)受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合,進而啟動靶細胞細胞內的信號通路。二是在細胞外基質中,外泌體膜蛋白可以被蛋...
細胞凍存:細胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準備工作方面都需大量的耗費,而且細胞一旦離開活的開始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要。細胞冷凍儲存...
可以通過pas染色計算糖原含量嗎:PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用來顯示糖元和其它多糖物質.具體現(xiàn)象例舉:陽性反應,胞漿呈紅色,陰性反應,胞漿呈無色;在正常血片中RBC不染色;PLT染成深紅色;中性粒細胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細胞有陽性顆粒;...