細胞凍存和復蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑，會導致細胞內冰晶的產生，從而使細胞產生內源性的機械損傷，引起細胞內環(huán)境滲透壓，PH，電解質等的改變，進而促使細胞死亡。在過去的幾十年中，科研工作者將培養(yǎng)基、血清和DMSO按...

PAS染色試劑配制及染色方法：1.材料與方1.1實驗材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標本各30例，均來自我室實驗材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液，其配方：無水乙醇80mL，冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液...

轉染的注意事項：有血清時的轉染血清一度曾被認為會降低轉染效率，但只要在DNA-陽離子脂質體復合物形成時不含血清，在轉染過程中是可以使用血清的。轉染過程在兩步中需要使用培養(yǎng)基做為稀釋液：在DNA-陽離子脂質體復合物準備過程以及復合物同細胞接觸過程。在開始準備DN...

糖原染色用于鑒別淋巴系統(tǒng)細胞增生的性質鑒別紅細胞系統(tǒng)增生的性質[英文縮寫]PAS[參考值]正常人淋巴細胞PAS反應積分正常人幼紅細胞PAS反應積分[臨床意義]惡性淋巴瘤、急慢性淋巴細胞白血病時PAS積分升高巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、再障貧血時幼紅細胞PAS反...

糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化，產生醛基，與雪夫（Schiff）試劑中無色品紅結合，形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應稱為碘酸-雪夫（PAS）反應。（1）雪夫液配制：堿性品紅1g溶于200ml沸水中，冷卻60℃時過濾，加1mmol/L鹽...

如何高效率實現(xiàn)細胞轉染：DNA轉染導入細胞胞漿內的DNA不能穿過細胞核的核膜（"核屏障"）。在細胞有絲分裂過程中核膜溶解，DNA進入細胞核才有可能。為此，細胞處于分裂期對DNA轉染是至關重要的，并且處于分裂期的細胞比例必須盡可能大才能實現(xiàn)高效轉染。DNA轉染機...

臨床意義：1.急性白血病類型的鑒別紅白血病的幼紅細胞PAS染色多呈陽性反應，陽性率高，反應強；成熟紅細胞有時亦可為陽性；急性淋巴細胞白血病的原、幼淋巴細胞PAS染色多為紅色顆粒或塊狀陽性反應；急性粒細胞白血病的原粒細胞呈陰性或胞質呈彌漫淡色陽性反應；急性早幼粒...

粘液染色法：粘液一般有以下幾點特性：（1）對鹽基性染料有親合力，因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍色。（2）對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍有異染性。（3）遇醋酸發(fā)生沉淀，胃粘蛋白則除外。（4）溶于弱堿溶液。常用的粘液染色有以下幾種：1、P．A．S...

細胞轉染為什么不能加血清：不同的細胞及轉染試劑要求轉染的條件是不同的。較好是在靠前次實驗前做一個預實驗，比如：HeLa，293，CHO，COS7，MCF－7，HepG2等細胞，是否加血清，對不同的細胞是有不同的影響的，有些細胞是可以有血清的，有些加血清就會受影...

外泌體可通過流式、WB（檢測指標有CD9,CD63,CD81）、電鏡觀察、NTA粒徑追蹤等手段檢測，普遍應用于藥物載體、疾病診斷marker、精細醫(yī)療、一些病癥治病等方面研究。由于外泌體直徑小，樣本含量低，提取十分困難。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心、超濾...

多糖多酚植物RNA提取試劑盒專門針對多糖，多酚等難提的植物RNA樣本提取設計，至今為止未發(fā)現(xiàn)不能攻克的樣本（棉花，番茄，板栗，龍眼，荔枝，葡萄，針葉植物，百合，獼猴桃，香蕉，甘蔗，海棠，蘋果，銀杏，小麥，水稻，玉米等農作物，果實，花卉，蔬菜等多糖多酚，色素等次...

干細胞無血清凍存液操作事項：使用說明：1.細胞消化和計數(shù)，用胰酶對待凍存的細胞進行消化，并對細胞進行計數(shù)。2.1000轉/min離心5分鐘（4℃），去掉上清。3.根據(jù)細胞計數(shù)的情況，加入適量的干細胞無血清凍存液，使細胞密度在1×106左右（或根據(jù)自己希望達到的...

細胞轉染效率低下的幾個大坑：1.準備不足做脂質體轉染的時候，在開展正式實驗前要多做預試驗，優(yōu)化轉染條件。優(yōu)化轉染條件包括：脂質體的用量、DNA密度、細胞密度、脂質體和DNA混合孵育時間等等。2.電壓過大做電轉的時候，如果電壓太大，往往會發(fā)生細胞大量死亡的情況。...

石蠟包埋組織RNA快速提取試劑盒（離心柱型）：原理簡介：改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶，然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟，漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除，較后低鹽的RNasefr...

細胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清，可以現(xiàn)用現(xiàn)配。除了這個方式，還可選擇20%的DMSO機上80%的小牛血清，配成兩倍的儲存液，在使用時細胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用，特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環(huán)境中保存。使用...

外泌體鑒定：外泌體分離之后，需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標志物，多角度進行鑒定。l透射電鏡鑒定法：簡稱TEM，適合外泌體雙層囊膜超微結構觀察，即通常為茶托型或一側凹陷的半球形。l納米顆粒追蹤分析法：簡稱NTA，該方法能...

外泌體鑒定：外泌體分離之后，需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標志物，多角度進行鑒定。l透射電鏡鑒定法：簡稱TEM，適合外泌體雙層囊膜超微結構觀察，即通常為茶托型或一側凹陷的半球形。l納米顆粒追蹤分析法：簡稱NTA，該方法能...

要折騰嬌貴的細胞寶寶，必須要在無菌超凈環(huán)境下才行。超凈工作臺，所有的儀器用品提前滅菌，培養(yǎng)箱什么的定期用酒精擦干凈。微生物污染對細胞的影響經(jīng)常是開始的時候沒發(fā)現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)的時候已經(jīng)結束了，所以千萬要小心。除了操作中的各種小細節(jié)，還有一個實驗雷區(qū)，就是配制細胞凍存液...

植物RNA快速提取試劑盒：是一種單相RNA快速提取試劑盒，可高效裂解堅固的植物細胞并強烈壓制RNA酶活性。細胞破碎之后，植物多糖立即被PlantRNAtrip獨特的成分結合。離心抽提步驟將RNA與滅活的RNA酶、蛋白、基因組DNA污染分離，并清理植物多糖多酚以...

染色試劑盒：染色試劑盒，由蘇木精染色劑和EA/OG混合染色劑組成。該產品用于在非婦科樣本制備中，和PrepStain液基細胞自動制片機配合使用，對臨床樣本進行染色，以便樣本的進一步篩查和檢測注冊號國食藥監(jiān)械1號生產廠商名稱（中文)產品性能結構及組成試劑盒由蘇木...

具體步驟是:以下所有步驟都在4℃下進行，1、300×g10min，棄沉淀，去除細胞2、2000×g20min，棄沉淀，去除死細胞3、10,000×g30min，棄沉淀，去除細胞碎片等亞細胞成分4、10,000×g70min，棄上清，沉淀即為外泌體5、PBS（每...

外泌體與免疫系統(tǒng)：不同的細胞來源的外泌體，包括免疫細胞(B細胞和樹突狀細胞)、病細胞、上皮細胞和間充質細胞，釋放出帶有載體的外泌體，可影響先天免疫系統(tǒng)和適應性免疫系統(tǒng)中受體細胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細胞可直接或間接地受到外泌體的影響，刺激或壓...

昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法：將一半的溶液轉移到離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。將剩下的一半溶液轉移到同一離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液，室溫12000rmp離心半分鐘，棄穿透液。加0...

細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了...

新型土壤總RNA快速提取試劑盒：獨特裂解劑/裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞內核酸酶，然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶，然后將粗純化的玻璃奶轉移到離心柱，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟,漂洗液將腐植酸、細胞代謝物、蛋白等雜質去除，較后低鹽的洗脫緩沖...

細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。細胞凍存的原理：細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以較大限度的保存細胞活力。...

RNA提取試劑的選擇：對于富含多糖多酚的植物類組織提取是個難點，Takara精心研發(fā)的柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以輕松解決這個問題。TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit...

聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質分子結合共沉淀，早先應用于從血清等樣本中收集細菌，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競爭性結合游離水分子有關。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性），顆粒大小不均一，產生難以去除的聚合...

外泌體：該研究主要是做了牡蠣基因組測序，并揭示其應激適應和殼結構的復雜性。其中涉及，所鑒定的259種殼蛋白中的84％不是經(jīng)典分泌蛋白；它們可能是細胞的一部分或被外泌體沉積而來。259個殼蛋白中的61個與外泌體數(shù)據(jù)庫中的蛋白質匹配，支持了外泌體的存在。在礦化前緣...

RNA提取試劑的選擇：對于富含多糖多酚的植物類組織提取是個難點，Takara精心研發(fā)的柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以輕松解決這個問題。TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit...