外泌體研究的主要應(yīng)用:外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進(jìn)了一些病癥的生...
細(xì)胞外基質(zhì)生理學(xué)功能:剛度和彈性:從柔軟的腦組織到堅硬的骨組織,細(xì)胞外基質(zhì)可以以不同程度的剛度和彈性存在。細(xì)胞外基質(zhì)的彈性可以相差幾個數(shù)量級。這一特性主要取決于膠原蛋白和彈性蛋白的濃度,較近已證明細(xì)胞外基質(zhì)的剛度和彈性這個特性在調(diào)節(jié)許多細(xì)胞功能中發(fā)揮著重要作用...
細(xì)胞外基質(zhì)的生物學(xué)作用:1.影響細(xì)胞的存活、死亡:定著依賴性:如,上皮細(xì)胞一旦脫離了ECM則會發(fā)生anoikis。2.決定細(xì)胞的形狀:不同細(xì)胞具有不同的細(xì)胞外基質(zhì),介導(dǎo)的細(xì)胞骨架組裝的狀況不同,從而表現(xiàn)出不同的形狀。3.調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖;定著依賴性生長(anch...
具膜囊泡,當(dāng)我們使用常規(guī)方法分離這些結(jié)構(gòu)時不推薦使用其他的名稱來稱呼它們。外泌體(exosome)適用于通過特殊手段拿到的由胞內(nèi)體來源的釋放到細(xì)胞外的膜泡結(jié)構(gòu)。建議對細(xì)胞外囊泡進(jìn)行細(xì)分時使用物理上的界定如小細(xì)胞外囊泡(sEV)和中/大細(xì)胞外囊泡(m/lEV),...
研究中研究人員發(fā)現(xiàn),胃病細(xì)胞周圍富含TAM。TAM以M2極化表型為特征,并促進(jìn)胃病細(xì)胞在體外和體內(nèi)的遷移。此外,研究人員發(fā)現(xiàn)M2衍生的外泌體決定了TAMs介導(dǎo)的遷移活動。通過使用質(zhì)譜方法,研究人員確定載脂蛋白E(ApoE)是M2巨噬細(xì)胞衍生的外泌體中高度特異性...
外泌體的提取方法:1、色譜法。色譜法是利用根據(jù)凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對關(guān)系而對溶質(zhì)進(jìn)行分離的分析的方法。樣品中大分子不能進(jìn)入凝膠孔,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,首先被流動相洗脫出來;小分子可進(jìn)入凝膠中絕大部分孔洞,在柱中受到更強(qiáng)地滯留...
外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷:近年來,高通量質(zhì)譜分析被普遍地應(yīng)用于篩選NSCLC外泌體蛋白的研究,這為我們揭示了更多具有生物標(biāo)志物價值的分子。Birgitte等采用微陣列芯片技術(shù)研究了431例肺病患者和150例對照者血漿外泌體中的蛋白表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)CD151、...
骨膜來源的細(xì)胞外基質(zhì)水凝膠通過早期免疫調(diào)節(jié)及增強(qiáng)血管和骨生成促進(jìn)骨修復(fù):骨愈合包括早期炎癥免疫調(diào)節(jié)、血管生成、成骨分化和生物礦化等過程,干預(yù)其中的任一過程都可能阻礙骨修復(fù)。在復(fù)雜和嚴(yán)重的骨損傷部位,大量的促炎因子的存在會誘發(fā)促炎反應(yīng)。長期的促炎反應(yīng)會阻礙巨噬細(xì)...
胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計算所需凍存細(xì)胞數(shù)。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3.取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸...
無血清快速細(xì)胞凍存液細(xì)胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計算所需凍存細(xì)胞數(shù)。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3.取相...
外泌體的提取方法:1、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽...
細(xì)胞外基質(zhì)通過調(diào)節(jié)糖代謝影響癥轉(zhuǎn)移:考慮到葡萄糖代謝在細(xì)胞生長和遷移過程中的重要性,科學(xué)家們已經(jīng)對葡萄糖代謝如何受到內(nèi)部和外界刺激做出反應(yīng)進(jìn)行了深入的研究,但還是少有研究關(guān)注代謝和細(xì)胞外基質(zhì)中特殊成分改變的關(guān)系,而細(xì)胞外基質(zhì)成分的改變在正常發(fā)育和疾病進(jìn)展過程中...
胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計算所需凍存細(xì)胞數(shù)。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3.取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸...
無血清快速細(xì)胞凍存液細(xì)胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計算所需凍存細(xì)胞數(shù)。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3.取相...
外泌體在肺病進(jìn)程中的作用:肺病細(xì)胞來源外泌體(LCC-exosome)可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進(jìn)一些病癥的生長。據(jù)相關(guān)報道稱,LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,促進(jìn)一些病癥血管的生成;而LCC-e...
細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)和骨骼?。寒?dāng)肌肉組織受傷時,肌肉自然震顫功能受阻,淋巴管和血管無法把細(xì)胞外基質(zhì)中玻尿酸產(chǎn)生的酸性物質(zhì)帶走,引發(fā)代謝受阻的同時,細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)的PH值也會隨著酸堿失衡的環(huán)境逐漸變低,直接影響細(xì)胞產(chǎn)生ATP。隨著代謝受阻及細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)環(huán)境的變化,...
細(xì)胞外基質(zhì)的主要類型及功能:a.骨的胞外基質(zhì)表現(xiàn)為剛硬的特點(diǎn),以滿足支撐的作用b.軟骨是另一種結(jié)締組織,其胞外基質(zhì)具有一定的韌性c.眼角膜中胞外基質(zhì)是透明的保護(hù)層。如前所述,動物組織的構(gòu)建既是多細(xì)胞相互作用的結(jié)果,也是細(xì)胞與胞外基質(zhì)相互作用和接觸的結(jié)果。胞外基...
細(xì)胞凍存,我們應(yīng)該注意哪些事項:1、凍存細(xì)胞是為了留種,所以要選擇高濃度的細(xì)胞量進(jìn)行凍存。正常情況下,當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到1*105/ml時即可凍存,具體是多少量主要根據(jù)個人觀察。2、二甲基亞砜(DMSO)因?yàn)榇┩讣?xì)胞的能力較強(qiáng),因此作為常用的凍存劑,也可以叫做細(xì)胞...
細(xì)胞外基質(zhì)蛋白聚糖(proteoglycan):蛋白聚糖是氨基聚糖(除透明質(zhì)酸外)與*蛋白質(zhì)(coreprotein)的共價結(jié)合物。*蛋白質(zhì)的絲氨酸殘基(常有Ser-Gly-X-Gly序列)可在高爾基復(fù)合體中裝配上氨基聚糖(GAG)鏈。其糖基化過程為通過逐個轉(zhuǎn)...
細(xì)胞外基質(zhì)成分居然能調(diào)節(jié)葡萄糖代謝過程:確認(rèn)ECM組分透明質(zhì)酸與新陳代謝之間的機(jī)制聯(lián)系,用透明質(zhì)酸酶處理細(xì)胞和異種移植物引發(fā)糖酵解的強(qiáng)烈增加。這主要通過快速受體酪氨酸激酶介導(dǎo)的mRNA衰變因子ZFP36的誘導(dǎo)來實(shí)現(xiàn),其靶向TXNIP轉(zhuǎn)錄物以降解。因?yàn)門XNIP...
凍存細(xì)胞注意事項:冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn),并可減緩冷卻速度,較大降低冰晶形成的危險(冰晶可損傷細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。注:DMSO可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時,應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。...
細(xì)胞可以通過施力和測量產(chǎn)生的反作用力來感知環(huán)境的機(jī)械特性。這發(fā)揮著重要作用,因?yàn)樗兄谡{(diào)節(jié)許多重要的細(xì)胞過程,包括細(xì)胞收縮,細(xì)胞遷移,細(xì)胞增殖,分化[和細(xì)胞死亡(凋亡)??酥品羌∪饧∏虻鞍注⒆钄嗔舜蟛糠诌@些效應(yīng),表明它們確實(shí)與細(xì)胞外基質(zhì)的機(jī)械特性有關(guān),這在過...
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。細(xì)胞凍存液除去蛋白酶,添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液.細(xì)...
外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,組分經(jīng)過優(yōu)化處理,適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液及其他體液(腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取...
細(xì)胞凍存的注意事項:1、各種細(xì)胞對凍存速度的要求也不一樣;上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞耐受性可能大些,骨髓干細(xì)胞-2~-3℃/分鐘合適;胚胎細(xì)胞耐受性較小,不宜太快??傊谝婚_始時,下降速度不能超過-10℃/分鐘。2、用什么防護(hù)劑合適和用量多大,要依細(xì)胞而定,初代培養(yǎng)...
細(xì)胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清,可以現(xiàn)用現(xiàn)配。除了這個方式,還可選擇20%的DMSO機(jī)上80%的小牛血清,配成兩倍的儲存液,在使用時細(xì)胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用,特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環(huán)境中保存。使用...
目前的主流觀點(diǎn)認(rèn)為,外泌體的產(chǎn)生過程為:細(xì)胞膜內(nèi)陷,形成內(nèi)體(endosome),再形成多泡體(multivesicularbodies,MVB),較后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息。外泌體較早見于198...
植物細(xì)胞的細(xì)胞壁相當(dāng)于植物體中的細(xì)胞外基質(zhì)。細(xì)胞外基質(zhì)主要由5類物質(zhì)組成,即膠原蛋白、非膠原蛋白、彈性蛋白、蛋白聚糖與氨基聚糖,其在上皮或內(nèi)皮細(xì)胞的基底部者為基底膜,而在細(xì)胞間黏附結(jié)構(gòu)者為間質(zhì)結(jié)締組織。細(xì)胞外基質(zhì)的化學(xué)組成包括3類:氨基聚糖和蛋白聚糖、膠原和彈...
蛋白聚糖在細(xì)胞外基質(zhì)中的功能是什么:蛋白聚糖的這種性質(zhì),使細(xì)胞表面具有較大的可塑性,從而具有抗擠壓能力,對細(xì)胞起保護(hù)作用。由于透明質(zhì)酸以可溶的形式游離存在,所以在細(xì)胞外體液和滑液(synovialfluid)中透明質(zhì)酸的濃度很高,其結(jié)果提高了體液和滑液的粘度和...
凍存細(xì)胞注意事項:冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn),并可減緩冷卻速度,較大降低冰晶形成的危險(冰晶可損傷細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。注:DMSO可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時,應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。...