使用方法：1、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被：以包被濃度為2μg/cm2為例，用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中，確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面。開蓋在超凈臺(tái)上過夜晾干，也可以在室溫放置1小時(shí)后，用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個(gè)月以上的時(shí)間。2、三維膠原凝膠的制備：A、無細(xì)胞三維膠原凝膠的制備（以配制1mg/mL三維膠1mL為例）將200μL本品加到置于冰浴的離心管中，加入690μL雙蒸水，然后加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH不能迅...

實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式，為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片，以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞，培養(yǎng)7天時(shí)進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)，應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動(dòng)頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻，平均厚度約為1mm；HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開；掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形，纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接；同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動(dòng)頻率是相同的；同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的...

鼠尾膠原蛋白的提取方法，采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝，保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境，利用同樣濃度的鹽溶液進(jìn)行兩次鹽析與離心，簡化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液，并采用檸檬酸替代醋酸進(jìn)行提純。從提取原料到樣品生成過程中，進(jìn)行多次真空冷凍干燥，并經(jīng)進(jìn)一步處理獲得含水率在3％以下的膠原蛋白微粉；較后由滅菌、無菌包裝，成品膠原蛋白粉末的純度在98％以上。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性，提高了產(chǎn)率和生物相容性，降低了成本，適用于生物醫(yī)用材料，所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結(jié)構(gòu)。整個(gè)操作請(qǐng)于冰上進(jìn)行，因室溫下鼠尾膠原I可迅速成膠。合肥長沙鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜...

鼠尾膠原制備詳細(xì)步驟： 1、取大鼠尾巴洗凈，75%酒精浸泡 5 分鐘； 2.將尾巴剪開、去掉皮毛，并剪成小段，抽出銀色的尾鍵 3、將尾腱剪斷置于平皿中，PBS 浸泡； 4、將所有的尾鍵放于 Tris-HCl 中，4 度過夜。 0.05mol/L Tris-bas 的 Tris-HCl 的配制方法。 稱量 6gTris 置于 1L 燒杯中，加入約 800ml 去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙?，濃鹽酸調(diào)節(jié) PH，高壓滅菌。 5、吸去 Tris-HCl，將尾腱稱重（0.5-1 克）； 6、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎，轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中； 7、按每克尾腱 50ml 的比例，加入 0.1%醋酸溶液； 8、搖晃，使尾腱分散...

三維膠原的制備：鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上，pH 7左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06X 體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。需要的溶液 ( 均需要 無菌 、 預(yù)冷 ):10xPBS( 可含10 mg/L的酚紅用于 pH 指示 )或 10x 培養(yǎng)液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 雙蒸水A．不含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入690ul...

鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑，可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被，特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)；也可用于制備三維膠原凝膠，使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長。制備鼠尾膠原方法：1、取大鼠尾巴洗凈，75%酒精浸泡5分鐘；2、手持尾巴，用止血鉗夾住鼠尾的較高，折斷尾骨后拉出尾腱；3、將尾腱剪斷置于平皿中，生理鹽水浸泡；4、重復(fù)步驟2、3，直至尾腱量夠用；5、吸去生理鹽水，將尾腱稱重（0.5-1克）；6、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎，轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中；7、按每克尾腱50ml的比例，加入0.1%醋酸溶液；8、搖晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期；9、離心，4000轉(zhuǎn)/分，10-15分鐘；10...

膠原蛋白的功效：1.膠原蛋白可以作為一種補(bǔ)鈣食品，膠原蛋白的特征氨基酸羥基脯氨酸是血漿中運(yùn)輸鈣到骨細(xì)胞的運(yùn)載工具，骨細(xì)胞中的骨膠原是羥基磷灰石的粘合劑，它與羥基磷灰石共同構(gòu)成了骨骼的主體。因此，只要攝入足夠的膠原蛋白，就能保證正常機(jī)體鈣質(zhì)的攝入量，膠原蛋白可制成補(bǔ)鈣的保健食品。2.膠原蛋白在人體運(yùn)動(dòng)鍛煉的過程中，可以促使身體消耗大量脂肪達(dá)到的效果。但需要注意的是膠原蛋白本身是沒有作用的，它只能在運(yùn)動(dòng)呢鍛煉是增加脂肪的消耗量。3.膠原蛋白是身體免疫作用中負(fù)責(zé)重要功能的阿米巴細(xì)胞清掃異物的感知器，因此對(duì)預(yù)防疾病很有幫助。可提高免疫機(jī)能、克制細(xì)胞、活化細(xì)胞機(jī)能、活化筋骨、治好關(guān)節(jié)炎及酸痛。取大鼠尾巴...

鼠尾膠原蛋白的獲取也相當(dāng)“講究”，首先要以無毒方法捕到家鼠。取尾長20cm以上者，齊尾根部切下尾巴，洗凈后浸于75%酒精中。在無菌操作下剝?nèi)ナ笪财つw，即可見附于鼠尾骨上的4束韌帶。每束韌帶中，位于外面及近骨一面的為白色纖維，較光潔，微發(fā)亮。纖維之間為易碎裂的間質(zhì)。而剝?nèi)ハ聛淼摹袄w維”，就放置在嘉興眼庫中，以供需要時(shí)及時(shí)提取。讓小小的老鼠尾巴發(fā)揮其神奇的作用，以醫(yī)學(xué)人嚴(yán)謹(jǐn)、踏實(shí)、不斷進(jìn)取的醫(yī)學(xué)態(tài)度，讓鼠尾膠原蛋白幫助更多的人，恢復(fù)角膜的光明，重現(xiàn)光明的世界。稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中。蘇州正規(guī)鼠尾膠原單價(jià)膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。在人的身體中這是皮膚、筋、軟骨、骨骼及...

膠原蛋白的應(yīng)用：1.膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu)，使膠原材料顯示出很強(qiáng)的韌性和強(qiáng)度，適用于薄膜材料的制備；2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料．其獨(dú)特之處是：在熱處理過程中．隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化．膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì)；3.由于膠原分子鏈上含有大量的親水基團(tuán)． 所以與水結(jié)合的能力很強(qiáng)． 這一性質(zhì)使膠原在食品中可以用作填充劑和凝膠；4.膠原在酸性和堿性介質(zhì)中膨脹，這一性質(zhì)也應(yīng)用于制備膠原基材料的處理工藝中。制備鼠尾膠原（兩個(gè)同學(xué)一組操作）。重慶正規(guī)鼠尾膠原直銷廠家三維膠原的制備：鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上，pH 7左右時(shí)可形成具...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：三維膠原的制備 鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上， pH 左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度 1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中，在成膠過程中需要加入 0.06體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。 需要的溶液 （均需要無菌、 預(yù)冷） 10mg/L 酚紅用于pH 指示） 0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一 般不用)，雙蒸水 200ul鼠尾膠原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到膠...

膠原蛋白的功效與作用：1、可以作為一種補(bǔ)鈣食品。膠原蛋白的特征氨基酸羥基脯氨酸是血漿中運(yùn)輸鈣到骨細(xì)胞的運(yùn)載工具，骨細(xì)胞中的骨膠原是羥基磷灰石的黏合劑，它與羥摹磷灰石共同構(gòu)成了骨骼的主體。因此，只要攝入足夠的膠原蛋白，就能保證正常機(jī)體鈣質(zhì)的攝入量，膠原蛋白可成制成補(bǔ)鈣的保健食品。2、可以為特殊人群使用。婦科疾病的根源來自于內(nèi)分泌失調(diào)，膠原蛋白能夠改善婦科疾病的困擾，而更年期的婦女更需要膠原蛋白供給身體所需，使得更年期婦女能夠更輕松面對(duì)各種不適。鼠尾膠原蛋白的用途很普遍，可用于化妝品，工業(yè)和食品生產(chǎn)等領(lǐng)域。溫州北京鼠尾膠原一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法：一般的生物體中提取的膠...

利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料。 方法 通過醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白，并重構(gòu)成膠原纖維。然后，將重構(gòu)后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2～6 d，通過透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化。 結(jié)果 酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構(gòu)成膠原纖維，并且具有特征性的D-Band結(jié)構(gòu)。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示：礦化2 d后，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維，膠原纖維部分礦化；礦化6 d后，膠原纖維內(nèi)部完全礦化，形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料。 結(jié)論 利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構(gòu)成膠原纖維，經(jīng)礦化可形成與人類自體骨組織化學(xué)成分和分...

三維膠原的制備：鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上，pH 7左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06X 體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。需要的溶液 ( 均需要 無菌 、 預(yù)冷 ):10xPBS( 可含10 mg/L的酚紅用于 pH 指示 )或 10x 培養(yǎng)液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 雙蒸水A．不含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入690ul...

膠原蛋白分離提純實(shí)驗(yàn)方案：提取鼠尾膠原蛋白的實(shí)驗(yàn)步驟： 1、使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液對(duì)初步處理的鼠尾腱進(jìn)行 酶解， 持續(xù)一段時(shí)間待混合物變成無色、 透明、 粘稠液體后即可在 4℃， 5000g 的離心力下離心 20min， 收集上清即為粗制鼠尾膠原蛋白原液。 2、將一定濃度的氯化鈉溶液加入其中，持續(xù)攪拌直至白色絮狀沉淀 從溶液中析出，繼續(xù)加入氯化銨直至沉淀不在析出為止，4℃，5000g 的離心力下離心 20min 后獲得白色沉淀。 沉淀物加入一定濃度的醋酸 溶液中溶解。 3、將溶解后的鼠尾膠原蛋白溶液繼續(xù)反復(fù)進(jìn)行鹽析處理，重復(fù)步驟 2 的過程 2~4 次。 _x000c_鼠尾膠原蛋白...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：將培養(yǎng)器皿在室溫(25 度左右)下 放置 20 分鐘待膠凝固后，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是 10PBS， 使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。 B．含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制 200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH 加到膠原溶液中，會(huì)由于 NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即 混勻。再加入 23ul 10PBS 10培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH 左右，如果 PBS 或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時(shí)需要用 pH 試紙測試)。加入 760ul 的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中...

鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.將黏稠的膠體溶液進(jìn)行高速冷凍離心處理，收集上清液；在冰水浴中，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時(shí)，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，調(diào)節(jié)pH = 6.5，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時(shí)，去除上清液，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個(gè)月以上的時(shí)間。北京正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)...

一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法，采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝，保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境，利用同樣濃度的鹽溶液進(jìn)行兩次鹽析與離心，簡化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液，并采用檸檬酸替代醋酸進(jìn)行提純。從提取原料到樣品生成過程中，進(jìn)行多次真空冷凍干燥，并經(jīng)進(jìn)一步處理獲得含水率在3％以下的膠原蛋白微粉；較后由滅菌、無菌包裝，成品膠原蛋白粉末的純度在98％以上。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性，提高了產(chǎn)率和生物相容性，降低了成本，適用于生物醫(yī)用材料。在操作過程中要盡量保持低溫。保存條件4℃保存，切勿凍存，有效期一年。廈門鼠尾膠原哪里買膠原蛋白的功效與作用：1、膠原蛋白中含有大量甘氨酸，在人體內(nèi)不僅...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：將培養(yǎng)器皿在室溫(25 度左右)下 放置 20 分鐘待膠凝固后，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是 10PBS， 使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。 B．含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制 200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH 加到膠原溶液中，會(huì)由于 NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即 混勻。再加入 23ul 10PBS 10培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH 左右，如果 PBS 或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時(shí)需要用 pH 試紙測試)。加入 760ul 的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中...

鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑，可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被，特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)；也可用于制備三維膠原凝膠，使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長。制備鼠尾膠原方法：1、取大鼠尾巴洗凈，75%酒精浸泡5分鐘；2、手持尾巴，用止血鉗夾住鼠尾的較高，折斷尾骨后拉出尾腱；3、將尾腱剪斷置于平皿中，生理鹽水浸泡；4、重復(fù)步驟2、3，直至尾腱量夠用；5、吸去生理鹽水，將尾腱稱重（0.5-1克）；6、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎，轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中；7、按每克尾腱50ml的比例，加入0.1%醋酸溶液；8、搖晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期；9、離心，4000轉(zhuǎn)/分，10-15分鐘；10...

實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式，為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片，以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞，培養(yǎng)7天時(shí)進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)，應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動(dòng)頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻，平均厚度約為1mm；HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開；掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形，纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接；同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動(dòng)頻率是相同的；同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的...

一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法，其特征在于，包括以下步驟: 1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，調(diào)節(jié)pH = 6.5，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時(shí)，去除上清液，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀； 2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液，冰水浴中，調(diào)節(jié)PH = 6.5 ;溶液依次通過陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂進(jìn)行脫鹽處理；3.將脫鹽后的膠原蛋白溶液，-40至-20°C預(yù)凍2?4小時(shí)，然后真空冷凍干燥，...

鼠尾Ⅰ型膠原：材料與方法：1. 主要材料、試劑和儀器鼠尾、鹽酸、等滲氯化鈉溶液、鈣液、磷液均購自上海晶純生化科技股份有限公司。日立高新TEM HT770(日本日立公司)；多功能粉末X射線衍射儀。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈，用75%的乙醇浸泡5 min。將尾巴剪開，去掉皮毛，并剪成小段，抽出銀色的肌腱。將肌鍵剪斷置于平皿中，用無菌等滲氯化鈉溶液浸泡。吸去等滲氯化鈉溶液，將肌鍵置于平皿中剪碎，按每克肌鍵50 mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。搖晃，將肌鍵分散于醋酸溶液中，4 ℃放置一周，然后以2186×g離心20 min。在醋酸溶液的酸解下，肌腱水解成膠凍狀凝膠，置于冰箱4 ℃保存...

一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法：膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。在人的身體中這是皮膚、筋、軟骨、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì)。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一， 不論來源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸，有脯氨酸和羥脯氨酸。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別，膠原蛋白分為20 幾個(gè)亞型。但較為常見的為Ι、Π、ΙΙΙ型膠原蛋白，即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良。I型膠原蛋白分布非常普遍，是主纖維束的主要成分，給結(jié)締組織以強(qiáng)度；是較豐富的膠原蛋白類型，尤其是在皮膚真皮、骨、筋和腱中。取大鼠尾巴洗凈，...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：將培養(yǎng)器皿在室溫(25 度左右)下 放置 20 分鐘待膠凝固后，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是 10PBS， 使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。 B．含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制 200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH 加到膠原溶液中，會(huì)由于 NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即 混勻。再加入 23ul 10PBS 10培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH 左右，如果 PBS 或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時(shí)需要用 pH 試紙測試)。加入 760ul 的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等 步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿，培養(yǎng)一些在普通細(xì)胞 培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細(xì)胞。也可用于制備三維膠，模擬真實(shí)的生長環(huán)境， 使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長。 1，在使用鼠膠原蛋白 型包被的細(xì)胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12 細(xì)胞的 貼壁和生長。 1mg/ml濃度以上，pH 左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度的三維膠，檢查到 NIH-3T3 細(xì)胞在三維膠內(nèi)正常生長、PC-12 細(xì)胞在三維膠表面 正常生長。 使用方法： 1、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被 推薦濃度： 1-5ug/cm 0.012mg/ml。按以下表格體積加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿...

鼠尾膠原，是一種天然培養(yǎng)基，它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞)貼壁的作用，同時(shí)也是一種天然的黏附劑，當(dāng)我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片，制備細(xì)胞爬片時(shí)，可在瓶底涂一層膠原，再放上小玻片，自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中。有點(diǎn)學(xué)術(shù)了，聽不懂···貼壁，有什么意義？分散的單一細(xì)胞培養(yǎng)能夠比較理想地反映細(xì)胞的具體生物特性。選擇合適的培養(yǎng)基，可以解決培養(yǎng)中細(xì)胞脫落和細(xì)胞重聚的現(xiàn)象。鼠尾膠原，是一種細(xì)胞支持物，它是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成份，可直接或間接參與細(xì)胞的附著。鼠尾I型膠原蛋白系采用方法在無菌下制備，純度達(dá)到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被，特別適合普...

一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)將無組織纖維、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱，真空冷凍干燥備用；(2)凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至200?400目； (3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹，鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL，期間不斷攪拌，防止凍結(jié)成塊，得到膠原溶脹液； (4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中，鼠尾腱與蛋白酶質(zhì)量比為50: I?100: 1，在4°C，48?74小時(shí)酶解，期間間歇性攪拌； (5)將黏稠的膠體溶液進(jìn)行高速冷凍離心處理，收集上清液；在冰水浴中，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：將培養(yǎng)器皿在室溫(25 度左右)下 放置 20 分鐘待膠凝固后，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是 10PBS， 使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。 B．含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制 200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH 加到膠原溶液中，會(huì)由于 NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即 混勻。再加入 23ul 10PBS 10培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH 左右，如果 PBS 或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時(shí)需要用 pH 試紙測試)。加入 760ul 的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中...

含細(xì)胞三維膠原凝膠的制備（以配制1mg/mL三維膠1mL為例）準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞，并放置于冰浴中。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中（混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時(shí)需要測定pH值）。加入760μL的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。本品在室溫下pH中性時(shí)可迅速成...

鼠尾Ⅰ型膠原：選擇適當(dāng)?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié)。目前，臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植。其中，人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無機(jī)礦物材料[1-2]，由于不含自體骨組織中的有機(jī)大分子Ⅰ型膠原蛋白，其臨床療效遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于自體骨組織。但是，自體骨移植和同種異體骨移植均來源于人類自身骨組織，數(shù)量有限，難以滿足臨床需要。因此，研發(fā)與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料，成為全世界骨組織工程學(xué)者孜孜以求的目標(biāo)。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產(chǎn)物，在分子結(jié)構(gòu)上，羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板，呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙，...