支持IND(InvestigationalNewDrug,新藥臨床試驗申請)的GMP蛋白生產(chǎn)技術(shù)服務在臨床前研究中扮演著至關重要的角色。GMP,即GoodManufacturingPractice(良好生產(chǎn)規(guī)范),是一套適用于制藥等行業(yè)的強制性標準,確保產(chǎn)品質(zhì)...
Fc融合蛋白技術(shù)通過將Fc片段(免疫球蛋白G的恒定區(qū))融合到目標蛋白上,可以帶來以下提高蛋白穩(wěn)定性的優(yōu)勢:1.**提高溶解度**:Fc片段通常具有較高的溶解性,能夠減少目標蛋白的聚集,從而提高其在細胞內(nèi)的溶解度。2.**延長半衰期**:Fc片段具有較長的體內(nèi)半...
PNGaseF(肽-N-糖苷酶F,Peptide-N-glycosidaseF),也稱為N-糖酰胺酶F,是一種用于糖蛋白研究的酶,它可以從糖蛋白的N-連接糖鏈上去除糖基。以下是PNGaseF的一些關鍵特性和應用:1.**作用機制**:PNGaseF能夠特異性地...
使用PreScissionProtease進行蛋白質(zhì)切割后,可以采用以下方法來提高產(chǎn)品的純度:1.**親和層析**:利用GST標簽或His標簽等進行一步或多步親和層析,以高純度分離目的蛋白。2.**離子交換層析**:根據(jù)蛋白質(zhì)的電荷特性,使用陽離子或陰離子交換...
通過SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)和Westernblot(西方印跡)可以有效地檢測帶有His標簽的泛素蛋白的純度和完整性。以下是進行這些檢測的步驟:###SDS-PAGE步驟:1.**樣品準備**:-將重組泛素蛋白溶解在適當?shù)木彌_液中,通常含有還原劑...
漢遜酵母表達系統(tǒng)是一種新型的酵母菌表達平臺,它具有高密度培養(yǎng)和高效表達外源蛋白的能力。在臨床前研究中,漢遜酵母被用于表達瘤病毒(HPV)病毒樣顆粒(VLPs),這為開發(fā)HPV疫苗提供了一種有希望的策略。HPVB19是一種高度傳染性的病毒,對免疫功能低下者和胎兒...
熒光光譜分析是一種強大的技術(shù),可以用來優(yōu)化重組EGFP(增強型綠色熒光蛋白)的熒光特性。以下是通過熒光光譜分析來優(yōu)化EGFP熒光特性的步驟:1.**確定激發(fā)和發(fā)射波長**:-使用熒光光譜儀測量EGFP的激發(fā)和發(fā)射光譜,以確定其比較大激發(fā)波長和比較大發(fā)射波長。-...
通過SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)和Westernblot(西方印跡)可以有效地檢測帶有His標簽的泛素蛋白的純度和完整性。以下是進行這些檢測的步驟:###SDS-PAGE步驟:1.**樣品準備**:-將重組泛素蛋白溶解在適當?shù)木彌_液中,通常含有還原劑...
SpCas9蛋白(來自化膿性鏈球菌的Cas9蛋白)在基因編輯中的主要作用是作為核酸酶,能夠精確地切割目標DNA序列。以下是SpCas9在基因編輯中的幾個關鍵步驟和作用:1.**識別和結(jié)合**:SpCas9蛋白與一個單導向RNA(sgRNA)結(jié)合,形成RNP復合...
EndoS酶在抗體藥物偶聯(lián)物(ADCs)研究中的具體應用主要體現(xiàn)在糖鏈定點偶聯(lián)技術(shù)方面。根據(jù)上海藥物研究所的研究進展,EndoS酶被用于實現(xiàn)定點ADC化合物的“一步”制備,這是一種新穎的糖鏈定點ADC制備策略。該策略利用了新穎截短型糖結(jié)構(gòu)的藥物-連接子和野生型...
EndoS糖苷內(nèi)切酶S在抗體藥物偶聯(lián)物(ADCs)研究中的應用主要體現(xiàn)在糖鏈定點偶聯(lián)技術(shù)上。通過上海藥物所的研究,開發(fā)了一種新穎的糖鏈定點ADC制備策略,利用EndoS2這種糖苷內(nèi)切酶,可以將小分子細胞毒藥物“一步”定點連接到抗體的糖基化位點,實現(xiàn)了糖鏈定點A...
PNGaseF(肽-N-糖苷酶F)是一種普遍使用的酶,它可以從N-連接糖蛋白中去除幾乎所有類型的N-連接糖鏈。其活性和穩(wěn)定性可能會在不同的pH條件下發(fā)生變化。根據(jù)NEB(NewEnglandBiolabs)提供的PNGaseF產(chǎn)品信息,PNGaseF的好的活性...
SpCas9蛋白(來自化膿性鏈球菌的Cas9蛋白)在基因編輯中的主要作用是作為核酸酶,能夠精確地切割目標DNA序列。以下是SpCas9在基因編輯中的幾個關鍵步驟和作用:1.**識別和結(jié)合**:SpCas9蛋白與一個單導向RNA(sgRNA)結(jié)合,形成RNP復合...
PNGaseF(肽-N-糖苷酶F)是一種普遍使用的酶,它可以從N-連接糖蛋白中去除幾乎所有類型的N-連接糖鏈。其活性和穩(wěn)定性可能會在不同的pH條件下發(fā)生變化。根據(jù)NEB(NewEnglandBiolabs)提供的PNGaseF產(chǎn)品信息,PNGaseF的好的活性...
熒光光譜分析是一種強大的技術(shù),可以用來優(yōu)化重組EGFP(增強型綠色熒光蛋白)的熒光特性。以下是通過熒光光譜分析來優(yōu)化EGFP熒光特性的步驟:1.**確定激發(fā)和發(fā)射波長**:-使用熒光光譜儀測量EGFP的激發(fā)和發(fā)射光譜,以確定其比較大激發(fā)波長和比較大發(fā)射波長。-...
EndoS,即糖苷內(nèi)切酶S(Endo-S),是一種具有高度特異性的酶,它在生物化學研究中有著重要應用,尤其是在糖蛋白和抗體藥物偶聯(lián)物(ADCs)的研究中。以下是EndoS的一些關鍵特點:1.**特異性**:EndoS能夠特異性地識別并切割N-連接糖鏈的殼二糖結(jié)...
EndoS糖苷內(nèi)切酶在抗體藥物偶聯(lián)物(ADCs)的制備中發(fā)揮著至關重要的作用。EndoS是一種特異性的內(nèi)切糖苷酶,它能夠從IgG重鏈的N-糖基中切割N-連接的糖鏈。這種特異性使得EndoS在改造抗體的糖鏈結(jié)構(gòu)時非常有用,尤其是在開發(fā)定點ADCs時。在ADCs的...
NLS-Cas9-EGFPNuclease是一種融合蛋白,由Cas9核酸酶、核定位信號(NLS)和EGFP(綠色熒光蛋白)組成。這種融合蛋白的特點和科研應用如下:**特點:**1.**無DNA污染**:系統(tǒng)不添加外部DNA,降低了外源DNA污染的風險。2.**...
使用PreScissionProtease進行蛋白質(zhì)切割后,可以采用以下方法來提高產(chǎn)品的純度:1.**親和層析**:利用GST標簽或His標簽等進行一步或多步親和層析,以高純度分離目的蛋白。2.**離子交換層析**:根據(jù)蛋白質(zhì)的電荷特性,使用陽離子或陰離子交換...
在進行IdeSProtease的分子改造時,平衡酶的活性和穩(wěn)定性是一個關鍵的挑戰(zhàn)。以下是一些策略,這些策略可以幫助研究者在提高酶穩(wěn)定性的同時保持或甚至提高其催化活性:1.**定向進化**:使用定向進化技術(shù)進行多輪的突變和篩選,以獲得在所需條件下具有改進穩(wěn)定性的...
酵母重組表達的N-糖苷酶F(PNGaseF)在實際應用中具有以下優(yōu)勢:1.**高比活性**:具有高達750,000U/mL的比活性,這表明該酶在催化反應中具有很高的效率。2.**快速反應**:新型的FastPNGaseF能在數(shù)分鐘內(nèi)完成徹底且無偏好性的去糖基化...
在進行IdeSProtease的分子改造時,平衡酶的活性和穩(wěn)定性是一個關鍵的挑戰(zhàn)。以下是一些策略,這些策略可以幫助研究者在提高酶穩(wěn)定性的同時保持或甚至提高其催化活性:1.**定向進化**:使用定向進化技術(shù)進行多輪的突變和篩選,以獲得在所需條件下具有改進穩(wěn)定性的...
大腸桿菌表達的重組抑肽酶(Aprotinin)是一種通過基因工程技術(shù)在大腸桿菌中生產(chǎn)的蛋白酶抑制劑,具有以下特性和應用:1.**來源**:重組抑肽酶是通過大腸桿菌(E.coli)表達系統(tǒng)生產(chǎn)的,確保了無動物源性成分,減少了病毒污染的風險。2.**結(jié)構(gòu)**:它是...
酵母重組表達的N-糖苷酶F(PNGaseF)是一種酰胺水解酶,具有以下特點:1.**高效性**:PNGaseF是去除幾乎所有N-連接寡糖從糖蛋白中有效的酶法方法。它能夠在幾分鐘內(nèi)快速且無偏倚地釋放所有的N-糖鏈,適合后續(xù)的色譜或質(zhì)譜分析。2.**重組酶**:該...
IdeSProtease是一種免疫球蛋白G(IgG)特異性降解酶,它能夠在IgG的鉸鏈區(qū)下方的一個特定位點進行切割,產(chǎn)生F(ab')2和Fc片段。這種酶是通過大腸桿菌(E.coli)表達系統(tǒng)重組表達生產(chǎn)的,并且經(jīng)過分子改造,使其具有更高的酶活和更廣的底物特異性...
重組Exendin-4是一種基于Exendin-4的重組蛋白,Exendin-4是一種從墨西哥蜥蜴(Gilamonster)的毒液中分離出來的39個氨基酸的多肽。它與胰高的血糖素樣肽-1(GLP-1)具有53%的序列同源性,并與相同的膜受體相互作用。重組Exe...
NLS-Cas9-EGFPNuclease是一種融合蛋白,由Cas9核酸酶、核定位信號(NLS)和EGFP(綠色熒光蛋白)組成。這種融合蛋白的特點和科研應用如下:**特點:**1.**無DNA污染**:系統(tǒng)不添加外部DNA,降低了外源DNA污染的風險。2.**...
EndoH糖苷內(nèi)切酶H(EndoH)在實驗中通常用于分析以下類型的糖鏈:1.**高甘露糖型糖鏈**:EndoH能夠特異性地識別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈,這些糖鏈通常存在于未成熟的糖蛋白中。2.**某些雜合型糖鏈**:EndoH也能對某些雜合型寡聚糖的殼二糖...
IdeSProtease是一種免疫球蛋白G(IgG)特異性降解酶,它能夠在IgG的鉸鏈區(qū)下方的一個特定位點進行切割,產(chǎn)生F(ab')2和Fc片段。這種酶是通過大腸桿菌(E.coli)表達系統(tǒng)重組表達生產(chǎn)的,并且經(jīng)過分子改造,使其具有更高的酶活和更廣的底物特異性...
EndoS糖苷內(nèi)切酶S(Endo-S)的特異性主要體現(xiàn)在其對糖蛋白的糖鏈結(jié)構(gòu)的識別和切割能力上。以下是Endo-S的一些關鍵特異性特點:1.**糖鏈識別**:Endo-S能夠特異性識別糖鏈結(jié)構(gòu)中的某些特定序列或結(jié)構(gòu),尤其是N-連接糖鏈的殼二糖重要結(jié)構(gòu)。2.**...