在腺病毒載體或脂質(zhì)體的全身遞送后,轉(zhuǎn)基因表達(dá)相對(duì)短暫。靜脈注射脂叢的肺表達(dá)比給藥后第1天和第2天觀察到的比較大表達(dá)量每周減少約1log。造成這種現(xiàn)象的機(jī)制可能有以下幾種:(a)產(chǎn)生針對(duì)外源基因產(chǎn)物的新***抗體,(b)細(xì)胞因子介導(dǎo)的啟動(dòng)子關(guān)閉,(c)通過(guò)凋亡、...
質(zhì)子泵抑制劑可以通過(guò)基于從一個(gè)供體蛋白到受體蛋白的能量轉(zhuǎn)移的物理測(cè)量來(lái)評(píng)估,也可以通過(guò)化學(xué)測(cè)量來(lái)評(píng)估,在化學(xué)測(cè)量中,表達(dá)的蛋白質(zhì)與另一種蛋白質(zhì)之間的相互作用活性可以在刺激時(shí)通過(guò)適當(dāng)?shù)膱?bào)告系統(tǒng)來(lái)檢測(cè)。后一種基于熒光素酶的方法被稱為生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(BRET)...
隨著寡核苷酸生物合成產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,不同類型的修飾寡核苷酸也被引入市場(chǎng),以提高小RNA寡核苷酸轉(zhuǎn)染的效率。其中一種是通過(guò)化學(xué)修飾來(lái)提高其與靶標(biāo)和阻斷外切酶活性的結(jié)合親和力的agomirs和antagomirs。agomir是一種人工修飾的雙鏈miRNA模擬物,旨在...
超聲照射聯(lián)合納米微泡的生物學(xué)效應(yīng)。超聲給藥技術(shù)是基于細(xì)胞穿孔的生物物理過(guò)程,超聲結(jié)合納米微泡和這個(gè)過(guò)程被稱為超聲穿孔。與其他納米粒子相比,納米微泡在超聲能量照射下具有“塌縮”的特殊性質(zhì),導(dǎo)致納米微泡內(nèi)爆,改變細(xì)胞膜的通透性。當(dāng)超聲能量充分增加時(shí),就會(huì)發(fā)生“超聲...
超聲聯(lián)合納米微泡進(jìn)行核酸輸送超聲聯(lián)合納米微泡進(jìn)行DNA傳遞。不考慮超聲穿孔現(xiàn)象,建議采用US與帶核酸的微泡相互作用來(lái)提高傳輸效率。這種策略也可能有助于遺傳物質(zhì)的位點(diǎn)特異性釋放,從而減少非共振組織轉(zhuǎn)染。通過(guò)納米微泡轉(zhuǎn)移基因已經(jīng)采用了幾種技術(shù),從基因的并發(fā)管理到納...
轉(zhuǎn)染是將外來(lái)核酸傳遞到真核細(xì)胞中以修飾宿主細(xì)胞的遺傳組成的過(guò)程。在過(guò)去的30年里,轉(zhuǎn)染因其廣泛應(yīng)用于研究疾病的細(xì)胞過(guò)程和分子機(jī)制而越來(lái)越受歡迎。了解疾病的分子途徑,可以發(fā)現(xiàn)可能用于疾病診斷和預(yù)后的特定生物標(biāo)志物。此外,轉(zhuǎn)染可以作為基因***中的策略之一,用于*...
除了mRNA疫苗,DNA疫苗也是不錯(cuò)的選擇。在聚葡萄糖、精胺(PG)偶聯(lián)物和第四代聚酰胺樹(shù)狀大分子(PAMAM G4)的幫助下,研究人員集中研究了將合成t細(xì)胞免疫原作為DNA疫苗使用的方法。他們改進(jìn)了PG和PAMAM G4復(fù)合物的大小、運(yùn)動(dòng)性和表面電荷,然后在...
內(nèi)皮素(CD105)是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子的受體,是一種增殖相關(guān)的低氧誘導(dǎo)蛋白,在血管生成內(nèi)皮細(xì)胞上高度表達(dá)。使用99mTc-labeled單克隆抗體靶向內(nèi)啡肽的免疫掃描顯示,**中大量攝取內(nèi)啡肽。**近,已經(jīng)描述了一種將內(nèi)啡肽特異性單克隆抗體偶聯(lián)到微泡的新方法。通過(guò)...
熒光染料:能發(fā)出熒光的染料。在吸收紫外線或可見(jiàn)光后,能把短波長(zhǎng)的光轉(zhuǎn)變?yōu)椴ㄩL(zhǎng)較長(zhǎng)的可見(jiàn)光波而反射出來(lái),呈閃亮的鮮艷色彩。例如,酸性曙紅、熒光黃、紅汞以及某些分散染料等。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料可以單獨(dú)使用,也可以組合成復(fù)合熒光染...
SuperFluor活化酯(與Invitrogen的AlexaFluor活化酯完全相同)SuperFlour系列熒光探針,具有更強(qiáng)的熒光強(qiáng)度,更廣的pH應(yīng)用范圍(pH4~10),更好的抗淬滅性。在生物熒光領(lǐng)域已逐漸替代FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy...
載藥超聲微泡造影劑另一種選擇是通過(guò)賦予超聲微泡生物啟發(fā)策略,其中天然細(xì)胞膜可以用作構(gòu)建超聲微泡的材料。天然細(xì)胞膜具有固有的合適特性,如生物相容性、免疫逃逸、自我識(shí)別和主動(dòng)靶向特性。已有研究表明,血小板生物納米微泡對(duì)血管損傷具有優(yōu)越的靶向能力,可用于超聲造影成像...
通過(guò)超聲微泡誘導(dǎo)空化可以改變**血管和細(xì)胞膜的通透性。穩(wěn)定空化(SC)和慣性空化(IC)都可以對(duì)*組織的血管壁和細(xì)胞膜造成機(jī)械干擾,從而提高EPR在**中的作用。超聲作用于含有超聲微泡的血管,可改變血管壁的通透性,導(dǎo)致藥物外滲至間隙。***通透性的...
一、體外生物發(fā)光試驗(yàn)熒光素試劑的制備:D-熒光素,鉀鹽,無(wú)菌純水,完全培養(yǎng)基(自行配置)1、用無(wú)菌水制備100X熒光素原液(15mg/ml),輕輕顛倒搖動(dòng)至熒光素完全溶解?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2、將D-luciferin,potassiumsa...
南京星葉生物科技有限公司各類熒光染料 多肽、蛋白、抗體標(biāo)記:5(6)-FAM5(6)-FAM5-FAM6-FAM5(6)-FAM,SE5-FAM,SE6-FAM,SE5(6)-TAMRA5-TAMRA6-TAMRA5(6)-TAMRA,SE5-TAM...
通過(guò)超聲微泡誘導(dǎo)空化可以改變**血管和細(xì)胞膜的通透性。穩(wěn)定空化(SC)和慣性空化(IC)都可以對(duì)*組織的血管壁和細(xì)胞膜造成機(jī)械干擾,從而提高EPR在**中的作用。超聲作用于含有超聲微泡的血管,可改變血管壁的通透性,導(dǎo)致藥物外滲至間隙。***通透性的...
過(guò)標(biāo)記——計(jì)算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標(biāo)記的熒光團(tuán)大于10mol。雖然過(guò)標(biāo)記的蛋白也可以使用,但可能會(huì)引起蛋白的聚集、降低抗體結(jié)合抗原的特異性,這些都會(huì)造成非特異性結(jié)合。過(guò)標(biāo)記還會(huì)引起熒光淬滅??梢栽黾拥鞍谆驕p少反應(yīng)時(shí)間。3.未結(jié)合染料難以去除—...
將配體附著在微泡表面的基本方法有兩種:要么通過(guò)直接共價(jià)鍵,要么通過(guò)生物素-親和素連接。生物素-親和素連接是一種直接的技術(shù),其中生物素化的配體通過(guò)親和素橋連接到生物素化的微泡上。盡管生物素-親和素連鎖在概念驗(yàn)證和臨床前靶向研究中很有用,但免疫原性使其無(wú)法轉(zhuǎn)化為人...
熒光染料,由于靈敏度高,操作方便,逐漸取代了放射性同位素作為檢測(cè)標(biāo)記,其廣泛應(yīng)用于熒光免疫,熒光探針,細(xì)胞染色等。包括特異性的DNA染色,用于染色體分析、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡等相關(guān)研究。另有很多核酸染料在多色染色系統(tǒng)中是非常有用的復(fù)染劑,可作為背景對(duì)照,標(biāo)記細(xì)胞...
一種發(fā)光雜環(huán)化合物,存在于生物發(fā)光的生物體中,如螢火蟲(chóng)。在含有三磷酸腺苷的情況下,通過(guò)熒光素酶氧化脫羧產(chǎn)生光??捎糜跓晒馑孛干锇l(fā)光成像和細(xì)胞高通量篩選應(yīng)用。D-熒光素(D-Luciferin)是螢火熒光素酶底物,其量子效率為0.88,是Luminol的20倍...
***的診斷是在選擇合適的***方法之前確定和分析疾病部位的初始階段以及區(qū)分各種類型的病理病變,特別是***性疾病。診斷通常在成像技術(shù)的幫助下實(shí)現(xiàn),成像技術(shù)使研究人員能夠更好地了解和可視化***斑塊及其進(jìn)展。然而,成像方法有時(shí)無(wú)法準(zhǔn)確分析易損斑塊,因此研究人員...
細(xì)胞培養(yǎng)后,需要對(duì)其生長(zhǎng)情況、形態(tài)甚至生物學(xué)性狀進(jìn)行觀察。由于細(xì)胞小而復(fù)雜,若不借助適當(dāng)?shù)氖侄危y以觀察其形態(tài)、結(jié)構(gòu),更難發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)各種組分的分子組成及功能。目前,已有多種研究細(xì)胞的技術(shù),從光學(xué)顯微鏡到電子顯微鏡,從一般細(xì)胞化學(xué)法到免疫化學(xué)法。細(xì)胞染色是研...
微泡表面的電荷和配體可以用來(lái)增加靶向的特異性。Lindner等人發(fā)現(xiàn),由于與先天免疫系統(tǒng)的相互作用,陽(yáng)離子微泡在經(jīng)歷缺血/再灌注和炎癥的組織的微循環(huán)中持續(xù)存在。然而,考慮到生物環(huán)境的復(fù)雜性,靜電相互作用通常沒(méi)有足夠的特異性。另一方面,配體-受體相互作用在生物介...
三、流式細(xì)胞儀分析1、取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,接種到孔板,過(guò)夜培養(yǎng)。2、如果要進(jìn)行藥物刺激,在細(xì)胞中加入感興趣的藥物進(jìn)行干預(yù),繼續(xù)培養(yǎng)一定時(shí)間后,收集細(xì)胞,PBS清洗2次。3、加入Rhodamine123工作液重懸細(xì)胞,37℃避光孵育15min或更長(zhǎng)時(shí)間?!咀?..
內(nèi)皮素(CD105)是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子的受體,是一種增殖相關(guān)的低氧誘導(dǎo)蛋白,在血管生成內(nèi)皮細(xì)胞上高度表達(dá)。使用99mTc-labeled單克隆抗體靶向內(nèi)啡肽的免疫掃描顯示,**中大量攝取內(nèi)啡肽。**近,已經(jīng)描述了一種將內(nèi)啡肽特異性單克隆抗體偶聯(lián)到微泡的新方法。通過(guò)...
微泡表面選擇合適的偶聯(lián)化學(xué)和修飾順序取決于配體的類型。一個(gè)重要的考慮因素是配體的大小及其對(duì)生物利用度的影響。小的親水分子,如代謝物和肽,可以直接偶聯(lián)到聚合物間隔物上,而不會(huì)***影響聚合物動(dòng)力學(xué)。相比之下,大的蛋白質(zhì)配體,如抗體,由于剪切應(yīng)力和涉及微泡分散的有...
微泡的制造通常通過(guò)兩種通用技術(shù)來(lái)進(jìn)行:分散氣體顆粒的自組裝穩(wěn)定,以及芯萃取的雙乳液制備。第一種技術(shù)用于脂質(zhì)或蛋白質(zhì)基氣泡。氣體(溶解度低的空氣或氟化氣體)分散在含有脂質(zhì)或表面活性劑膠束混合物或經(jīng)超聲變性的蛋白質(zhì)的水介質(zhì)中。這些成分沉積在氣液界面上,使其穩(wěn)定下來(lái)...
Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖?。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右,它的熒光肉眼觀察很明亮,并且對(duì)pH不敏感,在共聚焦顯微鏡中可以用532nm(肩峰)或者556nm(頂峰)的激光束激發(fā),在普通熒光...
超聲微泡造影劑的微小氣泡能夠增強(qiáng)超聲信號(hào),提高圖像的對(duì)比度和分辨率,從而更準(zhǔn)確地診斷疾病。此外,超聲微泡造影劑具有多種臨床應(yīng)用。它可以用于心臟、肝臟、腎臟等***的血流動(dòng)力學(xué)檢查,幫助醫(yī)生評(píng)估***功能和病變情況。在**診斷和***中,超聲微泡造影劑可以用于觀...
與化學(xué)增敏劑共同遞送為了增強(qiáng)***活性,研究人員研究了將***siRNA和化學(xué)藥物共同裝載到陽(yáng)離子脂質(zhì)體中的共遞送方法。例如,將絲裂原活化的蛋白激酶抑制劑PD0325901包封在由N、N-二油基谷酰胺陽(yáng)離子脂質(zhì)、DOPE和膽固醇組成的陽(yáng)離子脂質(zhì)體中,通過(guò)靜電相...
一種發(fā)光雜環(huán)化合物,存在于生物發(fā)光的生物體中,如螢火蟲(chóng)。在含有三磷酸腺苷的情況下,通過(guò)熒光素酶氧化脫羧產(chǎn)生光。可用于熒光素酶生物發(fā)光成像和細(xì)胞高通量篩選應(yīng)用。D-熒光素(D-Luciferin)是螢火熒光素酶底物,其量子效率為0.88,是Luminol的20倍...