LAMP法，即環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)（Loop-mediated isothermal amplification），是一種在恒定溫度下進行的核酸擴增方法。它由日本學(xué)者Notomi于2000年開發(fā)。LAMP法檢測有以下特性： 快速高效：LAMP技術(shù)可以在1小時內(nèi)把幾拷貝的目的序列迅速擴增到10^9^～10^10^拷貝，擴增效率高。 簡便性：LAMP技術(shù)不需要進行模板的預(yù)變性，減少了PCR技術(shù)升降溫帶來的影響以及對昂貴、精密實驗儀器的要求，同時擴增效率高，可以在較短時間內(nèi)完成檢測。 LAMP法因其快速、高效、特異、靈敏和經(jīng)濟等優(yōu)點，已經(jīng)應(yīng)用于病原菌、寄生蟲、病毒、疾病和轉(zhuǎn)基因產(chǎn)...

細胞培養(yǎng)中支原體檢測出現(xiàn)假陽性結(jié)果可能由以下原因引起： 1. 擴增產(chǎn)物污染：PCR擴增產(chǎn)生的大量DNA拷貝若未妥善處理，極微量的污染就可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果。 2. 引物設(shè)計不當(dāng)：引物設(shè)計不夠特異性，可能會與非目標(biāo)序列發(fā)生反應(yīng)，導(dǎo)致非特異性擴增。 3. 試劑質(zhì)量問題：使用的dNTPs、引物、DNA聚合酶等試劑質(zhì)量不佳，可能引起非特異性擴增或假陽性結(jié)果。 4. 操作技術(shù)問題：實驗操作不規(guī)范，如混合樣本、標(biāo)簽錯誤或樣本標(biāo)識不清等，可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果。 5. PCR反應(yīng)條件設(shè)置不當(dāng)：不恰當(dāng)?shù)腜CR反應(yīng)條件，如溫度和時間選擇不當(dāng)，可能導(dǎo)致非特異性擴增。 6. DNA...

細胞培養(yǎng)過程中如果發(fā)現(xiàn)支原體污染，可以采取以下一些方法嘗試去除污染： 1. 抗*素治*：使用針對支原體有效的抗*素，如四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、氟喹諾酮類等。根據(jù)搜索結(jié)果，可以加入高濃度抗*素進行沖擊治*，例如慶大霉素 200ug/ml，四環(huán)素10ug/ml，卡那霉素50ug/ml，并維持24-48小時后再換入常規(guī)培養(yǎng)液。 2. 加溫處理：支原體不耐熱，可以將細胞置于41°C中處理5-10小時以殺滅支原體。但需注意，高溫也可能對細胞造成傷害，因此需要預(yù)先確定對細胞影響較小的處理時間。 3. 使用支原體清除劑：市場上有專門的支原體清除劑，按照產(chǎn)品說明使用。 ...

支原體去除試劑在清*支原體的過程中可能會對細胞的生長狀態(tài)產(chǎn)生一定的影響。支原體去除試劑是一種非抗*素類試劑，它通過與支原體膜特異性結(jié)合，改變支原體膜的通透性，從而導(dǎo)致支原體破裂死亡。盡管該產(chǎn)品在作用期間可能會對細胞的活力和形態(tài)有一定的影響，但由于它不能穿過真核細胞的細胞膜，因此不會改變細胞的任何特性。支原體被清*后，細胞在后續(xù)的傳代過程中能快速恢復(fù)其正常的生長和增殖狀態(tài)，細胞后續(xù)的生長增殖幾乎無影響。 此外，該產(chǎn)品不含抗*素，不會使支原體發(fā)生耐藥反應(yīng)，細胞毒性小。然而，需要注意的是，不同細胞對支原體去除試劑的耐受程度有所差異，可以根據(jù)實驗結(jié)果適當(dāng)調(diào)整細胞量和處理條件。在某些情況下，...

細胞培養(yǎng)中支原體難以徹底消滅的原因主要包括以下幾點： 1. 無細胞壁結(jié)構(gòu)：支原體是沒有細胞壁的微生物，這使得許多作用于細胞壁的抗*素對支原體無效。 2. 微小體積：支原體體積小，能夠穿過常規(guī)的除菌濾膜，例如0.20微米甚至0.10微米的濾膜。 3. 隱匿性：支原體污染初期很難被察覺，它們在普通光學(xué)顯微鏡下幾乎不可見，因此細胞被支原體污染后，前期很難被發(fā)現(xiàn)。 4. 傳播途徑多樣：支原體可以通過細胞培養(yǎng)物、細胞懸液、細胞培養(yǎng)用具等途徑迅速傳播。 5. 污染源 ：支原體污染源包括細胞間的交叉污染、操作人員的口腔、皮膚，以及細胞培養(yǎng)用的組分如血清、培養(yǎng)液等。...

需要定期檢測支原體污染的客戶主要包括以下幾類： 1. 生物醫(yī)藥企業(yè)：生產(chǎn)涉及細胞培養(yǎng)的生物制品的公司，包括疫苗、生物藥物、基因產(chǎn)品等。 2. 細胞公司：進行細胞產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn)的企業(yè)，需要確保所用細胞的安全性和有效性。 3. 科研機構(gòu)：從事細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、遺傳學(xué)等研究的學(xué)術(shù)機構(gòu)，需要保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。 4. 臨床單位：使用細胞技術(shù)進行的醫(yī)院或診所，需要確保用細胞的質(zhì)量。 5. 細胞庫：保存和供應(yīng)細胞株的細胞庫，需要對細胞資源進行定期檢測以保證其無污染。 6. 生物技術(shù)公司：提供生物技術(shù)服務(wù)的公司，如細胞培養(yǎng)、基因編輯等，需要確保服...

細胞培養(yǎng)中支原體檢測出現(xiàn)假陰性結(jié)果可能由以下原因引起： 1. 樣本質(zhì)量問題：如果采集的樣本中含有抑制劑或者樣本在處理、存儲過程中出現(xiàn)問題，可能會影響PCR反應(yīng)，導(dǎo)致假陰性。 2. 技術(shù)或操作問題：實驗操作中的誤差，如樣本處理不當(dāng)、試劑配制錯誤、儀器設(shè)備問題等，都可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果。 3. 檢測方法的局限性：某些檢測方法可能存在靈敏度或特異性不足的問題，導(dǎo)致無法準(zhǔn)確檢測到病原體。 4. 培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的影響：培養(yǎng)法的靈敏度容易受到培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的影響，如果培養(yǎng)條件不適宜，可能導(dǎo)致支原體無法生長或生長緩慢，從而檢測不到。 5. 支原體種類問題：不是所有的支原體...

支原體去除后對細胞檢測的影響主要取決于去除方法和去除后的處理。以下是一些可能的影響： 1. 去除方法的影響：不同的支原體去除方法可能對細胞檢測產(chǎn)生不同的影響。例如，一些去除方法可能會對細胞的代謝和增殖產(chǎn)生暫時性的影響，這可能會影響某些類型的細胞檢測。 2. 去除后的處理：去除支原體后，細胞可能需要一段時間來恢復(fù)其正常的生理狀態(tài)。在這段時間內(nèi)，細胞的某些特性可能與去除前不同，這可能會影響細胞檢測的結(jié)果。 3. 細胞恢復(fù)情況：如果細胞在去除支原體后能夠成功恢復(fù)，那么它們在檢測中的表現(xiàn)可能會與未受污染的細胞相似。然而，如果細胞恢復(fù)不完全，可能會影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。 4....

細胞庫支原體檢測的必要性主要體現(xiàn)在以下幾個方面： 1. 確保細胞庫的質(zhì)量與安全性：細胞庫的建立需要為生物制品的生產(chǎn)提供檢定合格、質(zhì)量相同、能持續(xù)穩(wěn)定傳代的細胞。支原體檢測是確保細胞庫中細胞質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。 2. 符合監(jiān)管要求：支原體檢測是生物制品安全性監(jiān)管的一部分，全球范圍內(nèi)的藥典、法規(guī)和指導(dǎo)文件中都有支原體檢測的相關(guān)說明。 3. 避免對生物制品的影響：支原體污染可能會影響生物制品的安全性和有效性，因此需要通過檢測來避免這種風(fēng)險。 4. 維護細胞培養(yǎng)的穩(wěn)定性：支原體是真核細胞和干細胞培養(yǎng)中最常見的問題之一，它們可以改變細胞的代謝、減緩增殖速度，甚至引起染色體畸變。 ...

細胞被支原體污染后可能會出現(xiàn)以下幾種情況： 1. 生長速度變慢：支原體污染的細胞生長速度可能會減慢，甚至停止生長。 2. 形態(tài)改變：部分細胞可能會變圓，從培養(yǎng)瓶壁脫落。有些細胞在支原體污染后，形態(tài)變化可能不明顯，但有些細胞可能會出現(xiàn)體積增大、細胞碎片增多等現(xiàn)象。 3. 培養(yǎng)液pH變化：支原體污染的細胞可能導(dǎo)致培養(yǎng)液pH值變化明顯，更換培養(yǎng)液后幾小時內(nèi)變酸（顏色變黃）。 4. 細胞間隙出現(xiàn)膜狀沉積：在某些情況下，細胞與細胞間隙可能出現(xiàn)膜狀沉積，影響細胞的正常生長和傳代。 5. 細胞功能受損：支原體污染可能會影響細胞的代謝和功能，如影響細胞蛋白質(zhì)、DNA、RNA的...

支原體去除試劑在清*支原體的過程中可能會對細胞的生長狀態(tài)產(chǎn)生一定的影響。支原體去除試劑是一種非抗*素類試劑，它通過與支原體膜特異性結(jié)合，改變支原體膜的通透性，從而導(dǎo)致支原體破裂死亡。盡管該產(chǎn)品在作用期間可能會對細胞的活力和形態(tài)有一定的影響，但由于它不能穿過真核細胞的細胞膜，因此不會改變細胞的任何特性。支原體被清*后，細胞在后續(xù)的傳代過程中能快速恢復(fù)其正常的生長和增殖狀態(tài)，細胞后續(xù)的生長增殖幾乎無影響。 此外，該產(chǎn)品不含抗*素，不會使支原體發(fā)生耐藥反應(yīng)，細胞毒性小。然而，需要注意的是，不同細胞對支原體去除試劑的耐受程度有所差異，可以根據(jù)實驗結(jié)果適當(dāng)調(diào)整細胞量和處理條件。在某些情況下，...

細胞培養(yǎng)中支原體污染會對實驗結(jié)果產(chǎn)生多方面的影響，具體包括： 1. 細胞生長受影響：支原體污染可能導(dǎo)致細胞生長速度減慢，甚至停滯。 2. 細胞形態(tài)改變：支原體感*的細胞可能會出現(xiàn)形態(tài)的改變，如細胞體積增大、形態(tài)不規(guī)則等。 3. 細胞功能改變：支原體污染會影響細胞的代謝、增殖、分化等生理功能。 4. 細胞產(chǎn)物改變：支原體感*可能影響細胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)、細胞因子等生物活性物質(zhì)的表達和分泌。 5. 實驗結(jié)果不準(zhǔn)確：支原體污染會干擾實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，導(dǎo)致實驗數(shù)據(jù)不可靠。 6. 實驗重復(fù)性差：支原體污染的細胞培養(yǎng)批次間差異大，影響實驗的重復(fù)性。 ...

細胞培養(yǎng)中建議使用支原體檢測的原因主要有以下幾點： 1. 支原體污染率高：常規(guī)細胞培養(yǎng)中支原體污染率保守估計在15-35%之間。 2. 影響實驗結(jié)果：支原體污染會嚴重干擾實驗結(jié)果的可信度，影響培養(yǎng)細胞的形態(tài)和生理特征。 3. 難以用光學(xué)顯微鏡檢測：支原體是極小的細菌，其細胞膜周圍沒有細胞壁，無法用光學(xué)顯微鏡檢測到。 4. 難以消滅：支原體能夠迅速滲透整個實驗室，一旦污染很難徹底消滅。 5. 影響產(chǎn)品質(zhì)量：支原體污染會影響細胞培養(yǎng)產(chǎn)物的質(zhì)量，監(jiān)管機構(gòu)推薦檢測所有細胞培養(yǎng)產(chǎn)物中是否存在支原體。 6. 保證實驗準(zhǔn)確性：定期進行支原體檢測和去除，確保無支原體存在...

細胞培養(yǎng)中支原體污染會對實驗結(jié)果產(chǎn)生多方面的影響，具體包括： 1. 細胞生長受影響：支原體污染可能導(dǎo)致細胞生長速度減慢，甚至停滯。 2. 細胞形態(tài)改變：支原體感*的細胞可能會出現(xiàn)形態(tài)的改變，如細胞體積增大、形態(tài)不規(guī)則等。 3. 細胞功能改變：支原體污染會影響細胞的代謝、增殖、分化等生理功能。 4. 細胞產(chǎn)物改變：支原體感*可能影響細胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)、細胞因子等生物活性物質(zhì)的表達和分泌。 5. 實驗結(jié)果不準(zhǔn)確：支原體污染會干擾實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，導(dǎo)致實驗數(shù)據(jù)不可靠。 6. 實驗重復(fù)性差：支原體污染的細胞培養(yǎng)批次間差異大，影響實驗的重復(fù)性。 ...

支原體檢測的樣本既可以是細胞，也可以是培養(yǎng)基。在細胞培養(yǎng)中，支原體污染是常見的問題，因此需要對細胞和培養(yǎng)基進行檢測。細胞庫、病毒種子批、對照細胞以及臨床用細胞等都需要進行支原體檢查，這通常包括培養(yǎng)法和指示細胞培養(yǎng)法（DNA染色法）。同時，病毒類疫苗的病毒收獲液、原液也采用培養(yǎng)法檢查支原體，必要時，也可以采用指示細胞培養(yǎng)法篩選培養(yǎng)基。 此外，支原體檢測的培養(yǎng)基推薦使用支原體肉湯培養(yǎng)基和精氨酸支原體肉湯培養(yǎng)基等，這些培養(yǎng)基可用于檢測藥品和生物制品中的支原體。在進行支原體檢測時，需要取培養(yǎng)物樣品接種到適宜支原體生長的微生物培養(yǎng)基或瓊脂平板上。 因此，支原體檢測的樣本既可以是細胞，...

細胞培養(yǎng)中，需要去除支原體的污染：支原體污染是細胞培養(yǎng)中 普遍的問題之一，細胞庫中或正在使用的細胞中，支原體的污染率約為15%-35%。并對培養(yǎng)細胞的生理和代謝造成諸多影響： 01/ 爭奪營養(yǎng) – 阻礙細胞生長和增殖 02/ 改變蛋白質(zhì)、RNA 或 DNA 合成的水平 03/ 改變基因表達、細胞信號傳導(dǎo)和形態(tài) 04/ 損害膜和細胞器 05/ 導(dǎo)致突變和染色體變化 06/ 時間、金錢和有價值的細胞丟失，耽誤研究時間 07/ 實驗結(jié)果的不可靠性，實驗結(jié)果的重復(fù)性 降低 08/ 生物安全問題 支原體檢測的樣本用什么合適？...

方法 靈敏度 優(yōu)勢 劣勢 培養(yǎng)法 ☆☆☆ ü 便捷 ü 便宜 ü 金標(biāo)準(zhǔn) ü 費勞力 ü 耗時長 ...

根據(jù)提供的信息，支原體去除試劑是一種混合制劑，通過抑制DNA和支原體生長所必須的相關(guān)蛋白合成來取得良好的支原體清*效果，同時對細胞無傷害。它被設(shè)計為對細胞毒性小，不影響后續(xù)的細胞實驗，包括細胞活力檢測和細胞轉(zhuǎn)染等。這表明使用支原體去除試劑去除支原體后，理論上不應(yīng)該對細胞的轉(zhuǎn)染效率產(chǎn)生負面影響。 此外，支原體污染本身會對細胞的轉(zhuǎn)染效率產(chǎn)生負面影響。研究表明，與未污染的細胞相比，支原體污染的細胞轉(zhuǎn)染后具有較低的基因表達水平。因此，去除支原體后，可以預(yù)期細胞的轉(zhuǎn)染效率會得到改善，因為移除了影響細胞正常功能的污染物。 支原體去除的原理是什么？北京支原體預(yù)防現(xiàn)貨 細胞庫支原體檢測的必要性...

對于同一個樣品，如果一步法恒溫試劑盒檢測結(jié)果為陽性，而PCR檢測為陰性，可能的原因包括： 1. 檢測的支原體種類不同：一步法恒溫試劑盒可能檢測的支原體種類更多，例如可以涵蓋27種支原體，而PCR檢測可能只針對常見的12種支原體進行檢測。因此，如果樣品中污染的支原體種類不在PCR檢測的范圍內(nèi)，就可能出現(xiàn)一步法檢測為陽性而PCR檢測為陰性的情況。 2. 靈敏度的差異：PCR方法的靈敏度可能高于一步法恒溫檢測法。PCR可以檢測到低至單個拷貝的支原體，而一步法恒溫檢測可能需要更高的支原體拷貝數(shù)，例如10^3^個拷貝。如果樣品中支原體的數(shù)量低于一步法檢測的靈敏度閾值，PCR檢測可能無法檢...

支原體預(yù)防的實驗步驟主要包括以下幾個方面： 1. 無菌操作技術(shù)：在細胞培養(yǎng)過程中，嚴格遵守?zé)o菌操作規(guī)程，包括穿戴適當(dāng)?shù)膶嶒灧?、手套，使用無菌工具和耗材。 2. 環(huán)境控制：保持實驗室環(huán)境清潔，定期消毒工作臺和實驗室表面，使用層流罩或生物安全柜進行細胞操作。 3. 細胞培養(yǎng)基和試劑的無菌過濾：所有加入到細胞培養(yǎng)基中的試劑和補充物，如血清、抗*素等，都應(yīng)通過無菌過濾以去除支原體。 4. 細胞培養(yǎng)基和試劑的檢測：在添加到細胞培養(yǎng)物之前，對新的細胞培養(yǎng)基和試劑進行支原體檢測，以確保它們沒有被污染。 5. 定期檢測：即使采取了預(yù)防措施，也應(yīng)定期對細胞培養(yǎng)物進行支...

細胞被支原體污染后可能會出現(xiàn)以下幾種情況： 1. 生長速度變慢：支原體污染的細胞生長速度可能會減慢，甚至停止生長。 2. 形態(tài)改變：部分細胞可能會變圓，從培養(yǎng)瓶壁脫落。有些細胞在支原體污染后，形態(tài)變化可能不明顯，但有些細胞可能會出現(xiàn)體積增大、細胞碎片增多等現(xiàn)象。 3. 培養(yǎng)液pH變化：支原體污染的細胞可能導(dǎo)致培養(yǎng)液pH值變化明顯，更換培養(yǎng)液后幾小時內(nèi)變酸（顏色變黃）。 4. 細胞間隙出現(xiàn)膜狀沉積：在某些情況下，細胞與細胞間隙可能出現(xiàn)膜狀沉積，影響細胞的正常生長和傳代。 5. 細胞功能受損：支原體污染可能會影響細胞的代謝和功能，如影響細胞蛋白質(zhì)、DNA、RNA的...

支原體去除試劑在清*支原體的過程中可能會對細胞的生長狀態(tài)產(chǎn)生一定的影響。支原體去除試劑是一種非抗*素類試劑，它通過與支原體膜特異性結(jié)合，改變支原體膜的通透性，從而導(dǎo)致支原體破裂死亡。盡管該產(chǎn)品在作用期間可能會對細胞的活力和形態(tài)有一定的影響，但由于它不能穿過真核細胞的細胞膜，因此不會改變細胞的任何特性。支原體被清*后，細胞在后續(xù)的傳代過程中能快速恢復(fù)其正常的生長和增殖狀態(tài)，細胞后續(xù)的生長增殖幾乎無影響。 此外，該產(chǎn)品不含抗*素，不會使支原體發(fā)生耐藥反應(yīng)，細胞毒性小。然而，需要注意的是，不同細胞對支原體去除試劑的耐受程度有所差異，可以根據(jù)實驗結(jié)果適當(dāng)調(diào)整細胞量和處理條件。在某些情況下，...

支原體檢測的應(yīng)用場景非常廣*，以下是一些主要的應(yīng)用領(lǐng)域： 1. 細胞培養(yǎng)：在實驗室和生物制品工廠中，細胞培養(yǎng)過程容易受到支原體污染。支原體污染可能導(dǎo)致細胞功能改變，影響實驗結(jié)果和生物制品的質(zhì)量。因此，支原體檢測在細胞培養(yǎng)的質(zhì)量控制中至關(guān)重要?？蒲兄谐Ｓ玫葴財U增的方法簡單便捷。 2. 生物制品生產(chǎn)：在生物制品的生產(chǎn)過程中，如疫苗、生物藥物等，需要確保產(chǎn)品無支原體污染，以保證其安全性和有效性。監(jiān)管機構(gòu)要求在生產(chǎn)的關(guān)鍵階段進行支原體檢測。通常采用qPCR的方式進行。 細胞培養(yǎng)中污染了支原體會怎么樣？細胞支原體檢測要多久 預(yù)防細胞培養(yǎng)過程中的支原體污染至關(guān)重要，因為一旦發(fā)生污染，可...

檢測新鮮培養(yǎng)基是否有支原體污染，可以采用以下五種方案： 1. 培養(yǎng)法：這是一種傳統(tǒng)且可靠的方法，通過將培養(yǎng)基接種到適宜支原體生長的微生物培養(yǎng)基或瓊脂平板上，觀察是否有支原體生長。這種方法較為耗時，但成本較低。 2. 熒光染色法：使用特定的熒光染料（如Hoechst 33258）對細胞進行染色，然后在熒光顯微鏡下觀察。如果存在支原體污染，可以看到細胞表面或細胞間隙中支原體DNA的熒光染色。 3. PCR法：通過設(shè)計針對支原體特定序列的引物，利用PCR技術(shù)特異性擴增目標(biāo)DNA。PCR產(chǎn)物通過瓊脂糖凝膠電泳進行檢測，如果出現(xiàn)條帶則表明存在支原體污染。 4. 電鏡觀察法：使...

支原體檢測的樣本既可以是細胞，也可以是培養(yǎng)基。在細胞培養(yǎng)中，支原體污染是常見的問題，因此需要對細胞和培養(yǎng)基進行檢測。細胞庫、病毒種子批、對照細胞以及臨床用細胞等都需要進行支原體檢查，這通常包括培養(yǎng)法和指示細胞培養(yǎng)法（DNA染色法）。同時，病毒類疫苗的病毒收獲液、原液也采用培養(yǎng)法檢查支原體，必要時，也可以采用指示細胞培養(yǎng)法篩選培養(yǎng)基。 此外，支原體檢測的培養(yǎng)基推薦使用支原體肉湯培養(yǎng)基和精氨酸支原體肉湯培養(yǎng)基等，這些培養(yǎng)基可用于檢測藥品和生物制品中的支原體。在進行支原體檢測時，需要取培養(yǎng)物樣品接種到適宜支原體生長的微生物培養(yǎng)基或瓊脂平板上。 因此，支原體檢測的樣本既可以是細胞，...

支原體是一類細菌，由于缺乏細胞壁，具有靈活的膜結(jié)構(gòu)。這使得支原體的形態(tài)多變，很難在高倍顯微鏡下識別。并且能夠抵抗壓力、溫度、滲透壓和脫水，對許多針對細胞壁合成的常見抗*素具有抗性。它們的體積非常小，直徑通常在0.15~0.3μm，因此能夠輕易地穿過過濾系統(tǒng)。支原體能在哺乳動物細胞培養(yǎng)中可以高濃度生長，而不引起明顯的混濁或其他可見的污染跡象。 支原體通過特殊的前端細胞器與宿主細胞結(jié)合。支原體前端細胞器富含粘附素，可以附著在真核細胞上并穿透宿主細胞。支原體缺乏剛性細胞壁，可能有助于其與宿主細胞膜融合，并交換其膜和細胞質(zhì)成分。支原體的對細胞的毒性包括支原體侵襲性、分泌的致病酶和一些膜成分...

LAMP法，即環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)（Loop-mediated isothermal amplification），是一種在恒定溫度下進行的核酸擴增方法。它由日本學(xué)者Notomi于2000年開發(fā)。LAMP法檢測有以下特性： 快速高效：LAMP技術(shù)可以在1小時內(nèi)把幾拷貝的目的序列迅速擴增到10^9^～10^10^拷貝，擴增效率高。 簡便性：LAMP技術(shù)不需要進行模板的預(yù)變性，減少了PCR技術(shù)升降溫帶來的影響以及對昂貴、精密實驗儀器的要求，同時擴增效率高，可以在較短時間內(nèi)完成檢測。 LAMP法因其快速、高效、特異、靈敏和經(jīng)濟等優(yōu)點，已經(jīng)應(yīng)用于病原菌、寄生蟲、病毒、疾病和轉(zhuǎn)基因產(chǎn)...

在科研中，支原體檢測是確保細胞培養(yǎng)純凈性的重要環(huán)節(jié)。以下是一些在科研中常見的支原體檢測方法： 1. 支原體培養(yǎng)法：這是一種傳統(tǒng)的檢測方法，通過將細胞培養(yǎng)物接種到特定的培養(yǎng)基中，觀察是否有支原體生長。這是直接的檢測方法，但耗時較長，通常需要數(shù)周時間。 2. DNA染色法：使用熒光染料（如Hoechst或DAPI）染色細胞核，然后通過熒光顯微鏡觀察。這種方法操作簡便，可以快速得到結(jié)果，但特異性不高，可能會有假陽性。 3. 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）法：這是一種分子生物學(xué)技術(shù)，通過設(shè)計特異性的引物，擴增支原體DNA，從而檢測支原體的存在。PCR法具有高靈敏度和特異性，已成為日常...

支原體的預(yù)防可通過以下方式： 1. 控制污染源：通過定期檢測和去除細胞培養(yǎng)中的支原體污染，確保細胞培養(yǎng)體系內(nèi)無支原體存在，從而獲得準(zhǔn)確有效的實驗數(shù)據(jù)。 2. 改善無菌操作技術(shù)：通過提高實驗人員的操作技術(shù)和意識，避免在細胞培養(yǎng)過程中引入支原體污染。 3. 使用無菌設(shè)備和耗材：使用無菌的細胞培養(yǎng)設(shè)備和耗材，如無菌培養(yǎng)基、血清等，減少支原體污染的風(fēng)險。 4. 定期消毒和清潔：對實驗室環(huán)境進行定期的消毒和清潔，包括工作臺、培養(yǎng)箱等，以減少支原體的潛在污染。 5. 使用預(yù)防性試劑：使用專門針對支原體的預(yù)防性試劑，如加入細胞培養(yǎng)基中的預(yù)防劑、超凈臺噴霧、水浴鍋預(yù)防和細胞培...

細胞庫支原體檢測的必要性主要體現(xiàn)在以下幾個方面： 1. 確保細胞庫的質(zhì)量與安全性：細胞庫的建立需要為生物制品的生產(chǎn)提供檢定合格、質(zhì)量相同、能持續(xù)穩(wěn)定傳代的細胞。支原體檢測是確保細胞庫中細胞質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。 2. 符合監(jiān)管要求：支原體檢測是生物制品安全性監(jiān)管的一部分，全球范圍內(nèi)的藥典、法規(guī)和指導(dǎo)文件中都有支原體檢測的相關(guān)說明。 3. 避免對生物制品的影響：支原體污染可能會影響生物制品的安全性和有效性，因此需要通過檢測來避免這種風(fēng)險。 4. 維護細胞培養(yǎng)的穩(wěn)定性：支原體是真核細胞和干細胞培養(yǎng)中最常見的問題之一，它們可以改變細胞的代謝、減緩增殖速度，甚至引起染色體畸變。 ...