胎牛血清都有哪些重要的指標(biāo):總蛋白含量,胎牛血清的總蛋白含量一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說明采集血液的牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。pH值,根據(jù)藥典,胎牛血清的pH值在7.0-8.0之間,并沒有什么具體依據(jù)把進(jìn)口血清和國產(chǎn)血清用7.5這個(gè)分界線界定。滲透壓,胎牛血清滲透壓的檢測(cè)一般采用冰點(diǎn)法,滲透壓摩爾濃度(mOsmol/kg):280-360之間。微生物,包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體等。隨著各個(gè)品牌血清生產(chǎn)條件的改善提高,細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制。支原體通過0.1um3次無菌過濾去除。如CellMax胎牛血清,3次0.1um無菌過濾以后,又通過培養(yǎng)法和DNA染色法進(jìn)行支原體檢測(cè),結(jié)果均呈現(xiàn)陰性才會(huì)放行銷售。關(guān)于噬菌體主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入,又無法過濾,很難徹底清理,但對(duì)血清質(zhì)量影響不大,不過對(duì)于工業(yè)生產(chǎn)的客戶來說,往往會(huì)采用γ照射的胎牛血清來避免噬菌體。胎牛血清可以提供細(xì)胞生長所需的天然元素或天然的生長因子。RPMI 1640培養(yǎng)基(無硝酸鈣)銷售
胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)更高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分更少。胎牛血清各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)符合2005版《中華人民共和國藥典》第三部附錄的要求。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量3.5%~5.0%(w/v)3、血紅蛋白含量≤0.02%(w/v)4、無菌檢驗(yàn):陰性。5、支原體檢驗(yàn):陰性。6、細(xì)菌內(nèi)有害元素≤5(EU/ml)7、牛腹瀉病毒,陰性,8、大腸桿菌噬菌體,陰性,9、支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)更大增殖濃度≥2.5×106個(gè)/ml,細(xì)胞倍增時(shí)間≤15h,克隆率≥85%。天狼星紅染色試劑盒哪里有賣胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量很大的天然培養(yǎng)基。
如何解凍血清?血清應(yīng)該在2-8°C過夜解凍以避免降解,或者在室溫條件下,定期輕輕搖動(dòng)使組分重懸。解凍的血清在加入細(xì)胞培養(yǎng)基前應(yīng)該混合均勻。由于反復(fù)凍存會(huì)嚴(yán)重影響血清品質(zhì),建議將解凍的血清分裝成單次使用量,并凍存于-20°C。如果儲(chǔ)存于2-8°C,應(yīng)該在2-4周使用。溫度超過37°C時(shí)會(huì)降解營養(yǎng)成分,破壞血清功能。如果血清收到時(shí)存在部分解凍,還能繼續(xù)使用嗎?血清是干冰包裝運(yùn)輸,到達(dá)時(shí)應(yīng)該是冷凍狀態(tài)。但是,如果由于運(yùn)輸時(shí)間超期導(dǎo)致部分解凍,依然可以繼續(xù)使用。完全解凍后分裝成單次用量進(jìn)行凍存。血清產(chǎn)品的保質(zhì)期是多久?大部分血清產(chǎn)品,在未開封凍存的情況下生產(chǎn)之日起5年,具體可參考瓶身或CoA上的信息。
細(xì)胞培養(yǎng)中胎牛血清的重要作用:許多臨床和做科研的小伙伴們都要涉及到細(xì)胞培養(yǎng),在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,血清無疑成為影響實(shí)驗(yàn)成功與否的重要因素,而在眾多血清之中,牛血清是更為常用的。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,其中含有豐富的細(xì)胞生長所必須的營養(yǎng)成分,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。牛血清是一種成分復(fù)雜的混合物,而且血清的組成及含量通常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而存在差異。牛血清主要成分有蛋白質(zhì),多肽類,元素類,其他成分如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。有些胎牛血清沒有預(yù)老化,儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。
胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、元素、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。功能:牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長的元素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他元素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到消毒作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。胎牛血清嚴(yán)格QC標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行微生物、有害元素、血紅蛋白、IgG含量等多項(xiàng)檢測(cè)。RPMI 1640培養(yǎng)基(無硝酸鈣)銷售
胎牛血清提供維持細(xì)胞指數(shù)生長的激元素、基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物。RPMI 1640培養(yǎng)基(無硝酸鈣)銷售
胎牛血清與新生牛血清的區(qū)別?胎牛血清是實(shí)驗(yàn)室里細(xì)胞培養(yǎng)中用量很大的天然培養(yǎng)基,因?yàn)樘ヅ奈唇佑|過外界,這使得其血清中所含的抗體和補(bǔ)體極少,幾乎沒有對(duì)細(xì)胞有害的成分。并且高質(zhì)量的胎牛血清含有的營養(yǎng)豐富,可滿足細(xì)胞生長的需求,在哺乳動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)中發(fā)揮著重要作用。那么為什么人們一定要用胎牛血清而不用新生牛血清呢?想知道兩者之間都有哪些區(qū)別?不妨看看以下小編歸納的幾點(diǎn)內(nèi)容:胎牛血清與新生牛血清的區(qū)別:來源不同,胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛(通常5-8個(gè)月胎齡),之后對(duì)未發(fā)育完全的胎牛的心臟穿刺取血,完成采集血液的工作以后便再通過一系列的工藝處理獲得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集已出生10天內(nèi)的小牛,而且它們的發(fā)育相對(duì)于胎牛而言更加完全。RPMI 1640培養(yǎng)基(無硝酸鈣)銷售
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