DMEM 培養(yǎng)基(高糖

胎牛血清使用中的常見問題：血清中包含絮狀沉淀，它們是什么，怎么處理?沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀，離心血清(400g，1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以，使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃，沉淀會自然消失。實驗室如何選擇適合的血清?國內(nèi)一致認為HYCLONE的血清是更好的，但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷，國外一般認為GIBCO比HYCLONE好，所以并不是價格決定質(zhì)量，但是總的來說這兩種價格普遍偏貴，一般不是太嬌氣的細胞，國產(chǎn)的就夠用了。此外，由于國內(nèi)HYCLONE，GIBCO并沒有生產(chǎn)線，我們只能從代理商那里買，而代理商又魚龍混雜，所以買到假貨的可能性也很大。胎牛血清可以提供細胞生長所需的天然元素或天然的生長因子。DMEM 培養(yǎng)基(高糖,無酚紅）價位

如今已經(jīng)成為各大實驗室“常客”的胎牛血清，是一種采集自新鮮的牛血液的優(yōu)良血清。胎牛血清主要的作用就是提供基本的營養(yǎng)物質(zhì)以及提供接觸和伸展因子，有效避免細胞貼壁受到機械的損傷。如此看來胎牛血清確實發(fā)揮出非常大的作用，那么為了讓其充分發(fā)揮更大的價值該注意哪些事項呢？注意避免沉淀加入培養(yǎng)液，添加胎牛血清的時候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液，因為如果培養(yǎng)液有沉淀的存在，會使得其中培養(yǎng)的細胞產(chǎn)生大量的黑點，除此之外，細胞的表面還很可能會覆蓋一層油狀物質(zhì)，總之出現(xiàn)這樣的情況會極其不利于細胞的正常生長。那么為了更大程度減少血清的損失，可以把所有有沉淀的血清進行收集并做離心處理，之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。江山哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養(yǎng)基胎牛血清是細胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成分。

胎牛血清都有哪些重要的指標：總蛋白含量，胎牛血清的總蛋白含量一般范圍是30-40mg/ml，數(shù)值偏高，說明采集血液的牛齡偏大，不是胎牛；數(shù)值偏低，表明血清可能摻水了。pH值，根據(jù)藥典，胎牛血清的pH值在7.0-8.0之間，并沒有什么具體依據(jù)把進口血清和國產(chǎn)血清用7.5這個分界線界定。滲透壓，胎牛血清滲透壓的檢測一般采用冰點法，滲透壓摩爾濃度（mOsmol/kg）：280-360之間。微生物，包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體等。隨著各個品牌血清生產(chǎn)條件的改善提高，細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制。支原體通過0.1um3次無菌過濾去除。關(guān)于噬菌體主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入，又無法過濾，很難徹底清理，但對血清質(zhì)量影響不大，不過對于工業(yè)生產(chǎn)的客戶來說，往往會采用γ照射的胎牛血清來避免噬菌體。

胎牛血清的保存方法：熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已完全解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分滅活。除非必須，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物明顯增多，而且還會影響血清的質(zhì)量。補體參與反應有:細胞毒作用，平滑肌細胞收縮，肥大細胞和血小板釋放組胺，增強吞噬作用，促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。血清中的沉淀物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成，這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量。可用離心3000rpm，5分鐘去除，也可不用處理。顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清，沉淀物的形成會明顯增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點"，常誤認為血清受污染。一般情況下，此小黑點不會影響細胞生長，但如果懷疑血清質(zhì)量，則應立即停止使用，更換另一批號的血清。胎牛血清蛋白和脂類含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡。

為什么血清具有批次間可變性？血清是從生物來源提取的，其成分會存在批次之間的差異。為了盡可能減少應用變化，我們對每個批次均執(zhí)行嚴格的質(zhì)量檢測，使用高質(zhì)量標準，盡可能確保批間一致性。胎牛血清的顏色和我之前使用的批次不同，會影響血清使用效果嗎？血清的顏色取決于血紅蛋白濃度，而該參數(shù)的差異不會影響血清的性能。為什么血清的來源很重要？血清的來源(或原產(chǎn)地)是指收集未加工血液的國家。不要與血清分離、過濾或其他加工處理所在國家混淆，二者可能是不同的。血清供應商的CoA文件應該明確寫明血清原產(chǎn)地和加工信息。胎牛血清起酸堿度緩沖液作用。DMEM/F12供應公司

胎牛血清分裝凍存時，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均。DMEM 培養(yǎng)基(高糖,無酚紅）價位

血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成分雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、元素、無機物等，這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。牛血清是細胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成分，常用于動物細胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數(shù)生長的元素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他元素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到消毒作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。DMEM 培養(yǎng)基(高糖,無酚紅）價位

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