合肥長(zhǎng)沙無(wú)血清細(xì)胞凍存液

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-06-05

細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長(zhǎng)期保存的常用方法,其中細(xì)胞凍存液,作為細(xì)胞凍存時(shí)必須使用的一種溶液,不光光是說(shuō)只是用來(lái)進(jìn)行細(xì)胞的保存,在細(xì)胞的購(gòu)買(mǎi)、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送過(guò)程中也起著關(guān)鍵作用,因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要。如果不加任何條件直接凍存細(xì)胞,細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會(huì)形成冰晶,能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、pH值改變、蛋白變性等,從而引起細(xì)胞死亡。而細(xì)胞凍存液就相當(dāng)于細(xì)胞的保護(hù)劑,在凍存細(xì)胞時(shí)將細(xì)胞懸浮于凍存液中,可使冰點(diǎn)降低,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,在緩慢的凍結(jié)條件下,能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞,可以防止或減少冷凍冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷作用。這樣就使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái),在需要時(shí)直接復(fù)蘇就可恢復(fù)細(xì)胞活性。不同的凍存方法替代了不同的凍存體系。合肥長(zhǎng)沙無(wú)血清細(xì)胞凍存液

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細(xì)胞凍存,我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng):1、有文獻(xiàn)表明,細(xì)胞以l℃/min的速度冷凍存活率較髙,因?yàn)檫@一速度可以很好的控制細(xì)胞內(nèi)部晶體的產(chǎn)生。我們實(shí)際操作不可能將速度控制的這么精確,目前慣用的就是4℃30min、-20℃1h30min、-80℃2h后轉(zhuǎn)入液氮中。2、正常情況下,經(jīng)過(guò)-20℃1h30min這一步后,凍存管內(nèi)的細(xì)胞已經(jīng)處于凝固狀態(tài),如果此時(shí)凍存管內(nèi)還是液體,很可能是DMSO或冰箱冷凍功能出現(xiàn)了問(wèn)題。如若遇到這種情況,不能因?yàn)闀r(shí)間到了,就把把液體狀態(tài)的凍存管放置到液氮中,可以適當(dāng)延長(zhǎng)在-20℃環(huán)境下的冷凍時(shí)間30-60分鐘,直至凍存液凝固后再放到液氮中。武漢正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液進(jìn)貨價(jià)從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。

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無(wú)血清細(xì)胞凍存液對(duì)比含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì):傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合,其中DMSO的含量是10%,血清的含量是10%,統(tǒng)稱(chēng)為含血清細(xì)胞凍存液。含血清細(xì)胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法,如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,然后移至-20℃冰箱30分鐘,再移至-80℃冰箱保存16-18個(gè)小時(shí)(或隔夜),較后才移至液氮罐中進(jìn)行長(zhǎng)期的儲(chǔ)存。(其中需要注意的是-20℃條件下不可超過(guò)1個(gè)小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量的死亡。)

產(chǎn)品特性:a.可直接放置于-80℃冰箱,無(wú)需降溫,節(jié)省時(shí)間和精力;b.即用型,無(wú)需現(xiàn)配,操作方便,可減少實(shí)驗(yàn)中因操作引起的污染;c.在多種哺乳細(xì)胞系中經(jīng)過(guò)性能驗(yàn)證,其復(fù)蘇率和活率達(dá)90%以上;d.可長(zhǎng)期存儲(chǔ)于-80℃冰箱(5年以上),取用方便;e.采用成分明確的無(wú)血清配方,價(jià)格比常規(guī)自配細(xì)胞凍存液更為低廉;保存溫度:2~8℃具體操作步驟:1、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中細(xì)胞按常規(guī)方法消化,或分離獲得原代細(xì)胞后,收集于離心管中。2、使用離心機(jī)離心,去除上清,收集細(xì)胞沉淀。3、根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)密度加入適量的細(xì)胞凍存液進(jìn)行重懸,充分混勻(推薦凍存密度為1-2×106/ml)。4、將細(xì)胞懸液分裝至凍存管中,直接放置于-80℃冰箱保存。24小時(shí)后可移入液氮長(zhǎng)期保存(可選)。無(wú)血清細(xì)胞凍存液用于其他類(lèi)型哺乳動(dòng)物細(xì)胞的儲(chǔ)存。

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凍存方式:按照凍存保護(hù)液在凍結(jié)后是否形成冰晶來(lái)劃分,凍存方法可分為非玻璃化和玻璃化凍存兩種。非玻璃化凍存是利用各種溫級(jí)的冰箱分階段降溫至-70℃~-80℃,然后直接投入液氮進(jìn)行保存;或者是利用電子計(jì)算機(jī)程控降溫儀以及利用液氮的氣、液,按一定的降溫速率從室溫降至-100℃以下,再直接投入液氮保存的方法。以該種方法凍結(jié)的細(xì)胞懸液或多或少都有冰晶的形成。玻璃化凍存則是指利用多種高濃度的冷凍保護(hù)劑聯(lián)合形成的玻璃化冷凍保護(hù)液保護(hù)懸浮細(xì)胞,直接投入液氮進(jìn)行凍存的方法。以該中方法凍結(jié)的細(xì)胞懸液沒(méi)有冰晶的形成。但目前細(xì)胞凍存較常用的仍是前一種方法。無(wú)血清凍存液特性:適合無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞與含血清培養(yǎng)細(xì)胞。長(zhǎng)沙無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠(chǎng)家批發(fā)價(jià)

無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:既適用于一般培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,也適用于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存。合肥長(zhǎng)沙無(wú)血清細(xì)胞凍存液

無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株。特別配方具有有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力。不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白,能減少各類(lèi)病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,也適用于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存。產(chǎn)品特色:高安全性,完全使用醫(yī)藥品等級(jí)原料進(jìn)行生產(chǎn),不含動(dòng)物成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低,各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。細(xì)胞存活率高,無(wú)批次差異。完全凍存液配方,可直接使用,方便簡(jiǎn)捷,可直接存放于-70℃冰箱凍存,無(wú)需經(jīng)過(guò)費(fèi)時(shí)的程序降溫過(guò)程(省時(shí)、省力、省錢(qián))。合肥長(zhǎng)沙無(wú)血清細(xì)胞凍存液