鼠尾膠原包被培養(yǎng)板:胎干細胞在體外可誘導(dǎo)分化為血管內(nèi)皮細胞,進而形成血管,因而成為血管組織工程理想的種子細胞來源之一。目的:探討建立定向誘導(dǎo)人胚胎干細胞向血管內(nèi)皮細胞分化的方法。方法:在小鼠胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)人胚胎干細胞H1,將H1細胞團塊轉(zhuǎn)移到鼠尾膠原包被的培養(yǎng)板,貼壁24-48h后,培養(yǎng)基換為含不同輔助因子和內(nèi)皮細胞生長添加劑的EGM-2內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基。結(jié)果與結(jié)論:①在EGM-2內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基誘導(dǎo)下,細胞逐步表達內(nèi)皮細胞特異性標(biāo)記基因VEGFR-2、PECAM1、vWF、CD34、VE-cadherin、GATA-2。②分化細胞表達內(nèi)皮細胞特異性標(biāo)記VE-cadherin、CD31。③分化細胞具有吞噬低密度脂蛋白功能。說明將人胚胎干細胞接種在鼠尾膠原包被培養(yǎng)板上,通過EGM-2內(nèi)皮培養(yǎng)體系誘導(dǎo),可直接分化為功能性血管內(nèi)皮細胞。為研究胞外基質(zhì)對誘導(dǎo)胚胎干細胞血管內(nèi)皮細胞分化的作用以及相關(guān)信號分子機制打下了基礎(chǔ)。成纖維細胞膠原凝膠復(fù)合物有著良好的生物學(xué)特性。珠海鼠尾膠原進貨價
含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞,并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。再加入23ul10xPBS或10x培養(yǎng)液,混勻(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,加入適當(dāng)體積的細胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。廈門正規(guī)鼠尾膠原直銷廠家鼠尾膠原醋酸溶解:將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中。
膠原蛋白的應(yīng)用:1.膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu),使膠原材料顯示出很強的韌性和強度,適用于薄膜材料的制備;2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨特之處是:在熱處理過程中.隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì);3.由于膠原分子鏈上含有大量的親水基團.所以與水結(jié)合的能力很強.這一性質(zhì)使膠原在食品中可以用作填充劑和凝膠;4.膠原在酸性和堿性介質(zhì)中膨脹,這一性質(zhì)也應(yīng)用于制備膠原基材料的處理工藝中。
膠原蛋白是脊椎動物和無脊椎動物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。在人的身體中這是皮膚、筋、軟骨、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì)。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,不論來源于哪一種動物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸,有脯氨酸和羥脯氨酸。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,膠原蛋白分為20幾個亞型。但較為常見的為Ι、Π、ΙΙΙ型膠原蛋白,即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良。制備鼠尾膠原:搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期。
服用膠原蛋白的注意事項:1、大分子膠原蛋白進入人體后需要降解為小分子肽、氨基酸才能被人體吸收,真正有效吸收的成分并不多。2、這些食物多半脂肪含量較高,不適合經(jīng)常食用。高熱量、高脂肪,尤其是油炸食物都容易產(chǎn)生自由基,加速老化。如果能少吃這一類食物,就等于減少了身體被自由基傷害的機會及皮膚出現(xiàn)黑斑、皺紋等的風(fēng)險。3、孕婦是不能服用膠原蛋白產(chǎn)品,因膠原蛋白是19種氨基酸組成的,其中有幾種是不能被胎兒吸收的,容易引起第二特征過早的發(fā)育和成熟,不利于出生后的嬰兒成長和發(fā)育。酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿。珠海鼠尾膠原進貨價
鼠尾膠原醋酸溶解:在2-8度中放置過夜。珠海鼠尾膠原進貨價
一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,調(diào)節(jié)pH=6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時,去除上清液,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀;2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,冰水浴中,調(diào)節(jié)PH=6.5;溶液依次通過陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂進行脫鹽處理;(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液,-40至-20°C預(yù)凍2?4小時,然后真空冷凍干燥,凍干產(chǎn)品經(jīng)進一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,滅菌、包裝,得到成品膠原蛋白粉末。珠海鼠尾膠原進貨價