糖原染色是病理學中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強氧化劑,它能氧化糖類及有關物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時應注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關鍵的步驟。PAS技術是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。應該盡可能割取生活著的組織塊,并隨即投入固定液。浙江哪家提供糖原染色試劑盒
糖原染色試劑盒(1)急性淋巴細胞白血病、淋巴組織惡性增生性疾病、紅白血病、戈謝病的原始細胞呈強陽性反應或陽性反應;缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙、骨髓增生異常綜合征亦可呈陽性反應;急性粒細胞白血病、急性單核細胞白血病、良性淋巴細胞增多癥、尼曼-皮克細胞呈陰性反應或弱陽性反應。巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血等,幼紅細胞為陰性反應。偶有個別幼紅細胞呈陽性反應。(2)幫助鑒別不典型巨核細胞和霍奇金細胞,巨核細胞呈強陽性反應;霍奇金細胞呈弱陽性或陰性反應。(3)幫助鑒別白血病細胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細胞,腺細胞呈陽性反應。福建品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。
糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應稱為碘酸-雪夫(PAS)反應。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時過濾,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,無色即可放冰箱中保存,呈微紅色,則加活性炭1~2g,吸附過濾使成無色液體,放冰箱中保存。若溶液變紅,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。
糖原染色用于鑒別淋巴系統(tǒng)細胞增生的性質(zhì)鑒別紅細胞系統(tǒng)增生的性質(zhì)[英文縮寫]PAS[參考值]正常人淋巴細胞PAS反應積分正常人幼紅細胞PAS反應積分[臨床意義]惡性淋巴瘤、急慢性淋巴細胞白血病時PAS積分升高巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、再障貧血時幼紅細胞PAS反應多為陰性紅血病、紅白血病、骨髓增生異常綜合征時幼紅細胞PAS反應積分可40甚至高達100--200以上用于不典型巨核細胞與李-斯細胞的鑒別前者PAS反應為強陽性后者為陰性或弱陽性;用于高雪細胞和尼曼一匹克細胞的鑒別前者PAS反應為強陽性而后者反應為陰性或弱性可以觀察腎小球基底膜、結腸杯狀細胞中性黏液物質(zhì)、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色。
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘。或1%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結晶應重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結果:糖原呈紅色,細胞核呈藍色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差擁有針對不同組織的特殊固定液。山東品牌糖原染色試劑盒報價
切片脫蠟應盡量干凈,否則影響染色效果。浙江哪家提供糖原染色試劑盒
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:Schiff氏染液的配制是關鍵,尤其是偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量,打開應是粉劑,且?guī)в辛虻臍馕叮舫蓤F或沒有氣味,則不能用,配制時使用的容器、藥勺、稱藥天平與稱藥紙等必須潔凈、無污染。新配制好的Schiff劑為無色透明液體[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用時取一份恢復到室溫即可。沈洪武等通過對比染色發(fā)現(xiàn),冷凍保存1年的Schiff液的染色結果與新鮮配制的染色結果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之間),環(huán)境溫度以不高于20℃為宜,室溫高時氧化時間適當縮短;如果染色時環(huán)境溫度較高且高碘酸作用時間長,可使某些物質(zhì)成分發(fā)生非特異反應,使染色結果出現(xiàn)假陽性。因此,室溫較高時可適當縮短反應時間。浙江哪家提供糖原染色試劑盒
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