細胞凍存注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致炸列。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO)對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。無需程序降溫,細胞復蘇率90%以上。深圳無血清細胞凍存液廠家現(xiàn)貨
產品簡介我們經過長期的實驗研究與反復驗證,研發(fā)出一系列新型細胞凍存產品,能有效地提高常規(guī)細胞、原代細胞與干細胞的復蘇后存活率與活力。產品質量穩(wěn)定可靠,使用方便,助力科研工作者擺脫程序繁瑣、操作復雜、容易污染的傳統(tǒng)凍存方法,專注于后續(xù)實驗研究。LiveCyteTM(LC-1601)是即用型細胞凍存液,所含化學成分明確,無動物源性成分,可一步實現(xiàn)細胞凍存并長期在-80℃冰箱保存,保護細胞免受冰晶和溶質損傷,適用于大多數(shù)常規(guī)細胞。LiveCyteTM(LC-1602)是原代細胞及干細胞**凍存液,可進一步提高原代細胞和干細胞凍存效率。蘇州正規(guī)無血清細胞凍存液哪里買使細胞產生內源性的機械損傷,引起細胞內環(huán)境滲透壓。
對于很多科研汪來說,細胞是脆弱又重要的寶貝之一,承擔著重要的實驗數(shù)據(jù)希望。尤其是在凍存復蘇的時候,經常會因為一些小細節(jié)導致問題。比如:沒有控制好細胞的生長密度細胞的密度對細胞的生存質量有著重要的影響,畢竟它們是一群又不能擠著了也不能孤獨的嬌貴寶寶。密度過高會讓細胞沒有足夠的生存空間,密度過低會讓細胞無法互相連接健康生長。建議大家在細胞接種前,一定要調整好適合細胞生長的濃度,提高細胞的存活率。溫度控制不達標慢凍快融是細胞凍存復蘇的*關鍵詞之一
無血清細胞凍存液與傳統(tǒng)細胞凍存液比較及優(yōu)勢:1.傳統(tǒng)細胞凍存液只適用于含血清細胞的凍存,但并不適用于無血清培養(yǎng)的細胞,例如一些CIK細胞等,而無血清細胞凍存液即適用于含血清細胞的凍存,又適用于無血清細胞的凍存,是一種通用型細胞凍存液,通用于各種動物細胞株;2.傳統(tǒng)細胞凍存液含10%胎牛血清,因血清是動物源性成份,因此病毒、霉菌和支原體等污染的風險很高,而無血清細胞凍存液因不含血清,只含DMSO、葡萄糖等營養(yǎng)成份,較大降低了動物血清來源病毒、霉菌和支原體等污染的風險,確保凍存細胞的安全;3.傳統(tǒng)細胞凍存液含血清,但動物血清成分復雜,個體差異大,且生產來源不穩(wěn)定,因此批次間質量常常不穩(wěn)定,這導致培養(yǎng)細胞的狀態(tài)也會受到影響,而無血清細胞凍存液成分和配比明確,批次間差異很小,能夠保證生長細胞狀態(tài)的穩(wěn)定性,細胞存活率高。無血清細胞凍存液產品特色:各批產品之間有更高的產品質量一致性。
細胞凍存液的操作步驟:1.配置含10%DMSO或凡士林、10~20%小牛血清的凍存細胞培養(yǎng)液;2.取對數(shù)成長期的體細胞,除去舊細胞培養(yǎng)液,用PBS清理。3.除去PBS,添加適量蛋白酶(遮蓋細胞培養(yǎng)皿表層)把單面生長發(fā)育的體細胞消化吸收出來;4.抽濾1000rpm,5min;5.除去蛋白酶,添加適量配置好的凍存細胞培養(yǎng)液,用塑料吸管輕輕地吹打使體細胞勻稱,記數(shù),調整凍存液中體細胞的較后相對密度為5牙周106/ml~1牙周107/ml;6.將體細胞分裝進凍存管中,每管1~1.5ml;7.在凍存管上標出體細胞的名字,凍存時間及作業(yè)者;8.凍存:標準的凍存程序流程為減溫速度-1~-2℃/min;當溫度達-25℃下列時,可升至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可快速滲入液態(tài)氮中。也可將配有體細胞的凍存管放進-20℃電冰箱2h,隨后放進-70℃電冰箱中留宿,取下凍存管,移進液氮容器內。無血清細胞凍存液的優(yōu)勢:可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細胞凍存時可節(jié)省篩選過程。蘇州正規(guī)無血清細胞凍存液哪里買
無血清細胞凍存液的優(yōu)勢:通用型,適用于凍存各種細胞系、原代細胞。深圳無血清細胞凍存液廠家現(xiàn)貨
細胞凍存:取出凍存管,注明細胞名稱,代數(shù),日期。離心后,以無菌吸管吸棄上清,不要吸到底部的細胞沉淀。將細胞沉淀與凍存液充分混勻,根據(jù)計數(shù)結果,將細胞總數(shù)調節(jié)成細胞數(shù)量為5-10*105/ml為宜。將細胞凍存懸液分裝進細胞凍存管中,一般2ml的凍存管中裝入1-1.5ml凍存液為宜。嚴密封口后,使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1℃?;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入異丙的醇凍存盒中,然后將凍存盒置于–80℃條件下過夜。若無凍存盒及其他凍存裝置,可以先將凍存管置于4℃30min,再-20℃凍存1h直至完全冷凍,再轉移至-80℃冰箱過夜。第二天將已經冷凍的細胞轉移到液氮容器中,置于液氮上方的氣相空間中儲存深圳無血清細胞凍存液廠家現(xiàn)貨