無血清細胞凍存液與含血清細胞凍存液對比:傳統(tǒng)的細胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合,其中DMSO的含量是10%,血清的含量是10%,統(tǒng)稱為含血清細胞凍存液。含血清細胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法,如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,然后移至-20℃冰箱30分鐘,再移至-80℃冰箱保存16-18個小時(或隔夜),較后才移至液氮罐中進行長期的儲存??梢?,含血清細胞凍存液凍存細胞時遇到的問題:1.凍存細胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液,此步可省略)。2.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步驟繁瑣,耗時耗力。3.含血清,細胞污染(病毒、霉菌和支原體等)的風(fēng)險更高。4.血清批次、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異。5.需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存。無血清細胞凍存液產(chǎn)品特色:不含動物源成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低。蘇州無血清細胞凍存液平均價格
細胞凍存:細胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準備工作方面都需大量的耗費,而且細胞一旦離開活的開始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要。細胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細胞儲存在液氮中,溫度達-196℃,理論上儲存時間是無限的。原理:細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以較大限度的保存細胞活力。如今細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復(fù)蘇細胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。正規(guī)無血清細胞凍存液生產(chǎn)廠家無血清細胞凍存液的優(yōu)勢:無需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡單。
凍存細胞注意事項:冷凍保護劑可降低培養(yǎng)基的冰點,并可減緩冷卻速度,較大降低冰晶形成的危險(冰晶可損傷細胞,導(dǎo)致細胞死亡)。注:DMSO可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。建議可使用廠商生產(chǎn)的無血清細胞凍存液,使用方便,復(fù)蘇率高。注意冷凍保護劑DMSO的品質(zhì):DMSO應(yīng)為試劑級等級,無菌且無色,以5-10ml小體積分裝,4℃避光保存,勿作多次解凍
細胞凍存液的原理及配制方法:細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以較大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復(fù)蘇細胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。當(dāng)溫度達-25℃以下時,可增至-5 ℃~-10℃/min。之前。
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。為什么要進行細胞凍存?連續(xù)培養(yǎng)的細胞系容易發(fā)生遺傳漂變,有限細胞系較終會發(fā)生衰老,所有培養(yǎng)的細胞都易受到微生物污染,即使運轉(zhuǎn)情況較好的實驗室也會遇到設(shè)備故障的問題。由于已建立的細胞系是一種寶貴資源,更換細胞系成本高昂,而且耗費時間,因此,十分有必要將細胞冷凍起來長期保存。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進行細胞培養(yǎng)。鄭州正規(guī)無血清細胞凍存液單價
無血清細胞凍存液存儲條件:儲存于4℃以下,質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期兩年。蘇州無血清細胞凍存液平均價格
細胞凍存液的原理及配制方法:細胞凍存是細胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術(shù)手段。在細胞建株和建系中,及時凍存原始細胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中,雜交瘤細胞、每次克隆化得到的亞克隆細胞的凍存保種常常是必不可少的實驗操作。因為在沒有建立一個穩(wěn)定的細胞系或穩(wěn)定分泌抗體的細胞系的時候,細胞的培養(yǎng)過程中隨時可能因細胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等等導(dǎo)致實驗失敗,如果沒有原始細胞的凍存,則因為上述的意外而前功盡棄。蘇州無血清細胞凍存液平均價格