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PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,均來自我室實(shí)驗(yàn)材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動(dòng)約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時(shí),過濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動(dòng)容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h可以觀察腎小球基底膜、結(jié)腸杯狀細(xì)胞中性黏液物質(zhì)、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色。江西咨詢糖原染色試劑盒產(chǎn)品介紹
染色試劑盒:染色試劑盒,由蘇木精染色劑和EA/OG混合染色劑組成。該產(chǎn)品用于在非婦科樣本制備中,和PrepStain液基細(xì)胞自動(dòng)制片機(jī)配合使用,對(duì)臨床樣本進(jìn)行染色,以便樣本的進(jìn)一步篩查和檢測注冊(cè)號(hào)國食藥監(jiān)械1號(hào)生產(chǎn)廠商名稱(中文)產(chǎn)品性能結(jié)構(gòu)及組成試劑盒由蘇木精染色劑和EA/OG混合染色劑組成。產(chǎn)品有效期:在15-30°C的環(huán)境中保存,有效期12個(gè)月。附件:注冊(cè)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn),產(chǎn)品說明書產(chǎn)品適用范圍該產(chǎn)品用于在非婦科樣本制備中,和PrepStain液基細(xì)胞自動(dòng)制片機(jī)配合使用,對(duì)臨床樣本進(jìn)行染色,以便樣本的進(jìn)一步篩查和檢測。上海咨詢糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽性。
糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結(jié)合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng)。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時(shí)過濾,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,無色即可放冰箱中保存,呈微紅色,則加活性炭1~2g,吸附過濾使成無色液體,放冰箱中保存。若溶液變紅,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用,一般可用3個(gè)月,變黃則失效。
特染的應(yīng)用價(jià)值:現(xiàn)代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細(xì)胞及分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用日益普遍,但由于這些技術(shù)要求一定的實(shí)驗(yàn)條件以及所需的試劑價(jià)格較為昂貴,對(duì)于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學(xué)技術(shù)則具有無需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡單的優(yōu)勢,在臨床病理學(xué)診斷中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。比如,當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當(dāng)組織中出現(xiàn)均一化學(xué)物質(zhì)是否為淀粉樣變性等,用組織化學(xué)技術(shù)區(qū)別起來很簡單,所以組織化學(xué)技術(shù),雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個(gè)很有實(shí)用價(jià)值的技術(shù)~切取材料時(shí)刀要銳利,避免因擠壓細(xì)胞使其受到損傷。
注意事項(xiàng):染色時(shí):①染色時(shí)必須嚴(yán)格按照染色操作說明書進(jìn)行染色。②在染色過程中,前一個(gè)染液浸染完成后,在進(jìn)行下一個(gè)染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,使前一個(gè)染液沖洗干凈后再進(jìn)行下一步驟。③每次滴加染液前,務(wù)必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,造成染色不佳。④在滴加染液時(shí),務(wù)必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費(fèi)試劑。在染色時(shí),用有色鉛筆在組織周圍劃一個(gè)圈,這樣在滴加染液時(shí)就不會(huì)使染液溢出本試劑盒常用于常規(guī)組織切片染色,對(duì)于細(xì)胞、極其薄的切片。口碑好的糖原染色試劑盒直銷價(jià)
冷凍切片染色效果不佳,成熟時(shí)間2個(gè)月,染色時(shí)間一般15-20分鐘。江西咨詢糖原染色試劑盒產(chǎn)品介紹
染色的一般原則:因檢測細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補(bǔ)償也不同,因此建議每次檢測均需使用凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞做單陽對(duì)照,進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。標(biāo)記抗體常用熒光素FITC,EGFP激發(fā)光:488nm發(fā)射光:525nm;使用面較廣,價(jià)格便宜。PE激發(fā)光488nm發(fā)射光575nm,此熒光的激發(fā)效率較佳,故此熒光得到的信號(hào)較強(qiáng);檢測某些弱表達(dá)的抗原,推薦使用此熒光素。價(jià)格較FITC昂貴。APC激發(fā)光633nm,發(fā)射光660nm,在配有雙激光的流式細(xì)胞儀上,此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來避開自帶綠色熒光的樣本。流式細(xì)胞儀相關(guān)試劑盒。江西咨詢糖原染色試劑盒產(chǎn)品介紹