北京如何使用糖原染色試劑盒平均價格

糖原染色的原理與操作方法是什么：（1）原理：過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化，生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合，形成紫色化合物，定位于細(xì)胞質(zhì)中。（2）操作方法：干燥涂片，滴加甲醛固定液固定10分鐘，流水沖洗，晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘，流水沖洗，晾干。滴加雪夫液作用60分鐘，流水沖洗，晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘，流水沖洗，晾干鏡檢。細(xì)胞的組織化學(xué)方法，是研究細(xì)胞成分常用的方法之一。它是利用化學(xué)試劑與細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，從而在細(xì)胞局部形成有色沉淀物，再通過顯微鏡對組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位、定量研究。冷凍切片染色效果不佳,成熟時間2個月,染色時間一般15-20分鐘。北京如何使用糖原染色試劑盒平均價格

糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一，McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白，該法常用來顯示糖原和其他多糖，該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑，它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1，2-乙二醇基，使之變?yōu)槎?，醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物，產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)，使用時應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間，使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化，這是很關(guān)鍵的步驟。PAS技術(shù)是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法，但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原)，需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解，形成水溶性的雙糖-麥芽糖，在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段，但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮，不主張應(yīng)用唾液福建哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒平均價格糖原在肝臟及心肌疾患及某些的病變中分布和量都有一定改變。

注意事項：染色時：①染色時必須嚴(yán)格按照染色操作說明書進(jìn)行染色。②在染色過程中，前一個染液浸染完成后，在進(jìn)行下一個染液的步驟之前，必須徹底充分水洗，使前一個染液沖洗干凈后再進(jìn)行下一步驟。③每次滴加染液前，務(wù)必吸干組織上多余的水分，避免多余的水把染液稀釋了，造成染色不佳。④在滴加染液時，務(wù)必使染液完全覆蓋組織，但不能溢出圈外，避免浪費試劑。在染色時，用有色鉛筆在組織周圍劃一個圈，這樣在滴加染液時就不會使染液溢出。

糖原染色用于鑒別淋巴系統(tǒng)細(xì)胞增生的性質(zhì)鑒別紅細(xì)胞系統(tǒng)增生的性質(zhì)[英文縮寫]PAS[參考值]正常人淋巴細(xì)胞PAS反應(yīng)積分正常人幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)積分[臨床意義]惡性淋巴瘤、急慢性淋巴細(xì)胞白血病時PAS積分升高巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再障貧血時幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)多為陰性紅血病、紅白血病、骨髓增生異常綜合征時幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)積分可40甚至高達(dá)100--200以上用于不典型巨核細(xì)胞與李-斯細(xì)胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽性后者為陰性或弱陽性；用于高雪細(xì)胞和尼曼一匹克細(xì)胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽性而后者反應(yīng)為陰性或弱性。冷凍切片染色時間盡量要短。

PAS染色試劑配制及染色方法：1.材料與方1.1實驗材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例，均來自我室實驗材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液，其配方：無水乙醇80mL，冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL，冰醋酸100mL，95％酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸（HIO）溶于100mL蒸餾水或者70％酒精溶液中，或者按如下配方配制：過碘酸0.8g，95％乙醇70mL，醋酸鈉0.27g，水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液（Schiff氏液）在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL，煮沸后，在保持微沸的情況下，加入堿性品紅2.5g，并不斷搖動約5min（勿使之沸騰），使堿性品紅徹底溶解（溶解液為深紅色）。冷卻到50℃時，過濾，加入1N鹽酸50mL，再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g，塞住瓶口，搖動容器以充分混合（此時顏色明顯變淡），然后避光放置或冰箱內(nèi)24h過碘酸氧化時間不宜過久，氧化時的溫度以18～22℃佳。浙江如何使用糖原染色試劑盒哪里買

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染色的一般原則：因檢測細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測儀器不同，因而流式檢測的熒光補(bǔ)償也不同，因此建議每次檢測均需使用凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞做單陽對照，進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。標(biāo)記抗體常用熒光素FITC，EGFP激發(fā)光：488nm發(fā)射光：525nm;使用面較廣，價格便宜。PE激發(fā)光488nm發(fā)射光575nm，此熒光的激發(fā)效率較佳，故此熒光得到的信號較強(qiáng)；檢測某些弱表達(dá)的抗原，推薦使用此熒光素。價格較FITC昂貴。APC激發(fā)光633nm，發(fā)射光660nm，在配有雙激光的流式細(xì)胞儀上，此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來避開自帶綠色熒光的樣本。流式細(xì)胞儀相關(guān)試劑盒。北京如何使用糖原染色試劑盒平均價格