糖原D-PAS染色液注意事項:1、切片脫蠟應盡量干冷,否則影響染色效果。需使用一張陽性對照片驗證酶的活性。2、過碘酸氧化時間不宜過久,氧化時溫度以18~22℃較佳。3、試劑(A)、試劑(B)、試劑(C)、應置于4℃密閉保存,使用時避免接觸過多的陽光和空氣,使用前較好提前取出恢復到在室溫后,避光暗處使用。4、酸性乙醇分化液應經(jīng)常更換新液,其分化時間應該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和酸性乙醇分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時間應該足夠。5、在過碘酸溶液和SchiffReagent中作用時間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、組織類別等決定。6、況冶切片染色時間盡量要短。待冷卻至50℃過濾,加入當量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。江蘇如何使用糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實驗材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標本各30例,均來自我室實驗材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時,過濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h。浙江咨詢糖原染色試劑盒廠家直銷主要用來顯示糖原和其他多糖物質(zhì),因此也稱作糖原染色。
PAS染色的臨床意義①幫助鑒別不典型巨核細胞和霍奇金細胞或Reed-Sternberg細胞,前者呈強陽性反應,后者呈弱陽性或陰性反應。②幫助鑒別戈謝細胞和尼曼-匹克細胞,前者呈強陽性反應,后者呈弱陽性反應,且空泡中心為陰性反應。③幫助鑒別白血病細胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細胞,后者呈強陽性反應,陽性反應物質(zhì)為紅色細顆粒狀或粗顆粒狀,有時呈紅色塊狀。白細胞系統(tǒng):急性淋巴細胞白血病時白血病性原始淋巴細胞的陽性反應物質(zhì)為紅色粗顆粒狀或紅色塊狀,底色不紅;急性粒細胞白血病時,白血病性原始粒細胞的陽性反應物質(zhì)呈均勻分布的紅色細顆粒狀或呈均勻紅色;急性單核細胞白血病時,白血病性原始單核細胞的陽性反應物質(zhì)呈紅色細顆粒狀,彌散分布,有時在胞漿的邊緣處顆粒較粗大。
粘液染色法:粘液一般有以下幾點特性:(1)對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍色。(2)對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍有異染性。(3)遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外。(4)溶于弱堿溶液。常用的粘液染色有以下幾種:1、P.A.S染色法:操作方法同前,結(jié)果;中性粘液性物質(zhì),某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,核呈藍色。2、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點是能同時顯示出酸性和中性粘液物質(zhì)。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水。(2)3%醋酸液洗2分鐘,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘。(3)蒸餾水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,水洗。(6)常規(guī)脫水、封片。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。
糖原染色――檢查項目的注意細節(jié):其判斷標準隨細胞不同而異,一般分為5級,即0~4級。糖原染色――檢查項目的一般步驟:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復染20min,水洗,晾干。糖原染色――檢查項目結(jié)果解讀:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復染20min,水洗,晾干。細胞核、染色體以及基因表達的研究。浙江咨詢糖原染色試劑盒廠家直銷
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PAS染色的臨床意義:1.紅細胞系統(tǒng):①紅血病或紅白血病時幼紅細胞可呈陽性反應,有時陽性反應幼紅細胞的百分比增高,陽性反應的程度也很強。有時紅細胞也呈陽性反應。②缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征時幼紅細胞可呈陽性反應,有時陽性反應幼紅細胞的百分比也較高。有時紅細胞也可呈陽性反應。③巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血和白血病等疾病時,幼紅細胞為陰性反應,有時個別幼紅細胞呈陽性反應江蘇如何使用糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價