珠海RNA提取試劑產(chǎn)品介紹

酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型)：一、原理簡介。改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶，然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。二、試劑盒特點(diǎn)：1、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復(fù)性好?？朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。2、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好，純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點(diǎn)，不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程，RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨(dú)有的RL裂解液配方，可以有效的消除基因組污染。4、多次漂洗去蛋白過程，提取RNA純度更高。5、有效的去除了無用的5S在總RNA中含量，提高了純度~若比值較低，說明有殘余蛋白質(zhì)存在；比值太高，則提示RNA有降解。珠海RNA提取試劑產(chǎn)品介紹

酵母RNA的提取方法：濃鹽法。酵母菌外層是厚達(dá)1.2μm的細(xì)胞壁，其化學(xué)成分是葡聚糖（30-40%）和甘露聚糖（30%），此外，脂類8.5-13.5%，蛋白質(zhì)6-8%，還含有幾丁質(zhì)，酵母菌的葡聚糖，分子是為240000道爾頓，是一種分枝聚合物，葡聚糖與甘露糖之間由蛋白質(zhì)維系起來。近10%的甘露聚糖的側(cè)鏈通過磷酸二酯鍵與磷酸邊接，所有這些連接方式都使得酵母提取物首要的也是關(guān)鍵的是如何破壞細(xì)胞壁。破壁方法有自溶破壁、酶法破壁等多種方法，而用高濃度鹽溶液處理，同時(shí)加熱，以改變細(xì)胞的通透性，就可以使核酸從細(xì)胞內(nèi)釋放出來。由于RNA鈉鹽易溶于水,在含鹽的菌體溶液中,RNA有較高的溶解度,這樣,通過控制溫度使蛋白質(zhì)變性沉淀,通過離心將RNA及蛋白質(zhì)和脫核酵母菌體分離,從而達(dá)到提取之目的。其中食鹽起到自溶促進(jìn)劑，以及防腐與脫臭的作用。昆明正規(guī)RNA提取試劑直銷廠家RNA定量方法與DNA定量相似。

RNA提取試劑的選擇：選擇合適的提取試劑是較重要的一步。好的提取試劑在確保成功的同時(shí)，操作方便且經(jīng)濟(jì)實(shí)用。對于動(dòng)物組織、簡單的植物材料、各種微生物、培養(yǎng)細(xì)胞的totalRNA提取，Takara公司的RNAisoPlus具有諸多的成功案例。隨著2013年7月柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市，進(jìn)一步豐富了TakaraRNA提取的產(chǎn)品線。該產(chǎn)品采用了獨(dú)特的細(xì)胞裂解系統(tǒng)，無需苯酚氯仿抽提等步驟，簡單快捷。組織或細(xì)胞裂解后，提取操作光需20分鐘便可完成。

植物RNA快速提取試劑盒：1.固體組織破碎設(shè)備。可用下列裝置之一：1)玻璃勻漿器。泡酸清潔，用高壓滅菌蒸餾水洗滌數(shù)次。2)研缽。適用于液氮凍存組織的研磨，清洗方法同玻璃勻漿器。3)高速機(jī)械勻漿器(Polytron，Tekmar或類似產(chǎn)品)，打開開關(guān)，在蒸餾水中清洗分散器頭數(shù)次。2.高壓蒸汽30分鐘消毒一次性吸頭離心管。RNA沉淀溶解之后，應(yīng)嚴(yán)格使用高壓消毒的一次性用品。然而PlantRNAtrip能在RNA酶污染環(huán)境下工作，在裂解步驟可使用未高壓但潔凈的一次性吸頭和離心管，但光推薦在緊急情況下這樣做。3.普通雙蒸水，高壓消毒20分鐘。用于沖洗器皿，配制瓊脂糖凝膠和電泳用緩沖液。DEPC處理的雙蒸水。加DEPC到水中至終濃度為0.01%v/v，室溫過夜，高壓消毒30分鐘。用于溶解RNA，配制TE緩沖液和75％乙醇。4.濕冰。在冰上進(jìn)行操作有助于減少RNA降解。5.其它用品。電泳槽，雙蒸水沖洗。離心機(jī)和加樣器，無需處理。6.戴手套。注意某些實(shí)驗(yàn)如提取質(zhì)粒DNA如使用極大量RNA酶，為防污染，須較全仔細(xì)清洗實(shí)驗(yàn)器具和實(shí)驗(yàn)區(qū)域。RNA提取試劑注意事項(xiàng)：所有離心管，泵頭及相關(guān)溶液都必須無RNA酶污染。

動(dòng)物細(xì)胞RNA提取：1、懸浮細(xì)胞：可直接離心后棄掉培養(yǎng)基，用無菌PBS清洗1~2遍后，再用適量PBS懸浮起來，然后再加入裂解液進(jìn)行裂解。千萬不要完全棄掉液體后，往沉淀細(xì)胞里直接加入裂解液，這樣會使外表層的細(xì)胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細(xì)胞外側(cè)，從而限制沉淀內(nèi)部的細(xì)胞與裂解液的接觸，從而導(dǎo)致細(xì)胞裂解不徹底，降低RNA得率。2、半貼壁或貼壁不緊的細(xì)胞：棄掉培養(yǎng)基后，用PBS洗1~2次，然后直接吸取適量PBS用吸管或者泵吹打培養(yǎng)皿，把細(xì)胞吹下來，轉(zhuǎn)移到無RNA酶的EP管中，加裂解液進(jìn)行提取。3、貼壁細(xì)胞：需要先用胰酶消化，然后收集到無RNA酶的EP管中，離心去其上清，用PBS洗1~2次，去除多余的胰酶，以適量PBS重懸后繼續(xù)進(jìn)行提取步驟。細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn)：方便快捷的離心柱操作方式。武漢正規(guī)RNA提取試劑廠家供應(yīng)

血漿/血清RNA提取試劑盒：對RNA尤其是smallRNA（<200nt）具有結(jié)合能力。珠海RNA提取試劑產(chǎn)品介紹

總RNA提取試劑是廣譜型總RNA提取試劑。實(shí)驗(yàn)操作快速方便，顏色鮮明，便于分層。本試劑適用范圍普遍，可以從動(dòng)物組織、植物材料、各種微生物及培養(yǎng)細(xì)胞等樣品中提取總RNA。該方法對少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(>107)均有較好的分離效果。樣品在總RNA提取試劑中被充分裂解的同時(shí)能夠較大限度地保證RNA的完整性。在加入氯仿離心后，溶液會分成三層：上層無色水相、中間層和下層紅色有機(jī)相，RNA分布在上清層中。收集上清層后，經(jīng)異丙醇沉淀便可以回收得到總RNA。提取的總RNA完整性好，無蛋白和DNA污染，可用于各種分子生物學(xué)常規(guī)實(shí)驗(yàn)，如RT-PCR、Real-timeRT-PCR、Northernblot、DotBlot、體外翻譯等。珠海RNA提取試劑產(chǎn)品介紹