深圳鼠尾膠原

利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料。方法通過(guò)醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白，并重構(gòu)成膠原纖維。然后，將重構(gòu)后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2～6d，通過(guò)透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化。結(jié)果酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構(gòu)成膠原纖維，并且具有特征性的D-Band結(jié)構(gòu)。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示：礦化2d后，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維，膠原纖維部分礦化；礦化6d后，膠原纖維內(nèi)部完全礦化，形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料。結(jié)論利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構(gòu)成膠原纖維，經(jīng)礦化可形成與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)一致的仿生骨材料。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄，并且制作簡(jiǎn)便，成本低廉。將尾腱剪斷置于平皿中，生理鹽水浸泡。深圳鼠尾膠原

生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法，采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝，保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境，利用同樣濃度的鹽溶液進(jìn)行兩次鹽析與離心，簡(jiǎn)化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液，并采用檸檬酸替代醋酸進(jìn)行提純。從提取原料到樣品生成過(guò)程中，進(jìn)行多次真空冷凍干燥，并經(jīng)進(jìn)一步處理獲得含水率在3％以下的膠原蛋白微粉；較后由滅菌、無(wú)菌包裝，成品膠原蛋白粉末的純度在98％以上。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性，提高了產(chǎn)率和生物相容性，降低了成本，適用于生物醫(yī)用材料，所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結(jié)構(gòu)。深圳鼠尾膠原在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。

鼠尾膠原蛋白的用途是什么：將尾巴從動(dòng)物身體切除后，會(huì)冷凍起來(lái)，并提取尾巴里的筋腱。然后，將筋腱切成小塊，并在離心處理之前添加到由醋酸和水勾兌而成的混合物中。用這種方法，能將膠原蛋白從動(dòng)物材料中分離出來(lái)。在食品加工領(lǐng)域，鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁和棉花糖中。它還可以當(dāng)作酸奶，冰淇淋，果醬和奶油芝士等食品的增稠劑使用。在一些低脂肪食品中，它用于模仿全脂食品的感覺(jué)和質(zhì)地。它還用于生產(chǎn)膳食保健品，據(jù)說(shuō)能讓手指甲和皮膚看起來(lái)更好。此外，還有基于膠原蛋白的保健品，可用于促進(jìn)關(guān)節(jié)健康。

膠原蛋白的功效與作用：一提起膠原蛋白，女性朋友們眼睛都放光了，因?yàn)槲覀兌贾滥z原蛋白被稱為我們皮膚的“軟黃金”，層中70%都是膠原蛋白，膠原蛋白含量的多少?zèng)Q定克皮膚的年輕程度！是讓我們皮膚變得有彈性的東西。大部分只知道需要補(bǔ)充膠原蛋白，但是卻不知道什么時(shí)候需要補(bǔ)充膠原蛋白，總認(rèn)為自己還年輕不需要補(bǔ)充，其實(shí)這是錯(cuò)誤的觀念，膠原蛋白在女性20歲的時(shí)候就已經(jīng)開(kāi)始流失了，含量逐漸下降，25歲后進(jìn)入流失的高峰期，40歲時(shí)的含量不到80歲的一半，所以我們應(yīng)該20歲就開(kāi)始補(bǔ)充膠原蛋白，以保持皮膚的年輕狀態(tài)。鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)長(zhǎng)時(shí)程的記錄。

一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，調(diào)節(jié)pH=6.5，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時(shí)，去除上清液，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀；2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液，冰水浴中，調(diào)節(jié)PH=6.5;溶液依次通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂、陰離子交換樹(shù)脂進(jìn)行脫鹽處理；(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液，-40至-20°C預(yù)凍2?4小時(shí)，然后真空冷凍干燥，凍干產(chǎn)品經(jīng)進(jìn)一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉，滅菌、包裝，得到成品膠原蛋白粉末。成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法，并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉。深圳鼠尾膠原

鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠。深圳鼠尾膠原

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說(shuō)明：含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞，并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過(guò)來(lái)把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻。再加入23ul10×PBS或10×培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅，初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄，并且制作簡(jiǎn)便，成本低廉。深圳鼠尾膠原