糖原及粘液染色法注意事項:1、糖原的固定要及時,而且標本要新鮮。2、如用無水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病,因無水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各種試劑必須化學(xué)純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏試劑,在經(jīng)過活性碳吸附漂白后不顯無色,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,使用時可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧?。其次考慮堿性品紅本身,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,但不同批號,其效果就可能不同,應(yīng)特別引起注意~遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外。山東正規(guī)糖原染色試劑盒產(chǎn)品介紹
糖原染色(PAS):(1)原理:過碘酸將血細胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽性程度和陽性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細胞白血病和急性非淋巴細胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷。山東正規(guī)糖原染色試劑盒產(chǎn)品介紹再糖原染色,可鑒別是糖原還是其他多糖類物質(zhì)。
PAS技術(shù)是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標冸唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置。
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,細胞核呈藍色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應(yīng)為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。糖原染色顯示在肝或心肌細胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診。
臨床意義:1.急性白血病類型的鑒別紅白血病的幼紅細胞PAS染色多呈陽性反應(yīng),陽性率高,反應(yīng)強;成熟紅細胞有時亦可為陽性;急性淋巴細胞白血病的原、幼淋巴細胞PAS染色多為紅色顆?;驂K狀陽性反應(yīng);急性粒細胞白血病的原粒細胞呈陰性或胞質(zhì)呈彌漫淡色陽性反應(yīng);急性早幼粒細胞白血病異常早幼粒細胞的PAS染色為陽性反應(yīng);急性單核細胞白血病原、幼單核細胞PAS染色陽性反應(yīng)呈彌漫分布的紅色細顆粒,巨核細胞白血病原巨核細胞PAS染色呈陽性或強陽性反應(yīng),表現(xiàn)為紅色顆?;驂K狀。2.各類貧血的鑒別MDS、缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(曾稱地中海貧血)的幼紅細胞PAS染色多為陰性反應(yīng),有時可出現(xiàn)陽性反應(yīng);巨幼紅細胞貧血、溶血性貧血、再障的幼紅細胞PAS染色為陰性。特殊染色是為了顯示與確定組織或細胞中的正常結(jié)構(gòu)或病理過程中出現(xiàn)的異常物質(zhì)。山東正規(guī)糖原染色試劑盒產(chǎn)品介紹
擁有針對不同組織的特殊固定液。山東正規(guī)糖原染色試劑盒產(chǎn)品介紹
PAS染色的臨床意義:1.紅細胞系統(tǒng):①紅血病或紅白血病時幼紅細胞可呈陽性反應(yīng),有時陽性反應(yīng)幼紅細胞的百分比增高,陽性反應(yīng)的程度也很強。有時紅細胞也呈陽性反應(yīng)。②缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征時幼紅細胞可呈陽性反應(yīng),有時陽性反應(yīng)幼紅細胞的百分比也較高。有時紅細胞也可呈陽性反應(yīng)。③巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血和白血病等疾病時,幼紅細胞為陰性反應(yīng),有時個別幼紅細胞呈陽性反應(yīng)山東正規(guī)糖原染色試劑盒產(chǎn)品介紹