天津正規(guī)鼠尾膠原直銷廠家

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-19

膠原蛋白的提取方法:酸法提取:酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,而引起纖維膨脹、溶解。作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結(jié)構(gòu)。此法處理快速,所得產(chǎn)品的分子量是連續(xù)的,適用于醫(yī)用生物材料及原料的制備,但產(chǎn)品得率低,設(shè)備腐蝕嚴(yán)重,污染重。趙蒼碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下從牛腱中提取膠原蛋白,得到高純度的膠原蛋白溶液。鼠尾膠原醋酸溶解:將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中。天津正規(guī)鼠尾膠原直銷廠家

天津正規(guī)鼠尾膠原直銷廠家,鼠尾膠原

膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。在人的身體中這是皮膚、筋、軟骨、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì)。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,不論來(lái)源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸,有脯氨酸和羥脯氨酸。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,膠原蛋白分為20幾個(gè)亞型。但較為常見的為Ι、Π、ΙΙΙ型膠原蛋白,即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良。武漢鼠尾膠原生產(chǎn)廠家涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉。

天津正規(guī)鼠尾膠原直銷廠家,鼠尾膠原

鼠尾膠原蛋白耗子尾汁還能變得更加,一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來(lái)自大鼠的尾巴,制作過(guò)程需要經(jīng)歷醋酸抽提、氯化鈉沉淀和磷酸氫二鈉沉淀等步驟,才能從鼠尾中獲得珍貴的膠原蛋白。這種膠原蛋白在37℃的條件下會(huì)形成3股螺旋結(jié)構(gòu),可以用來(lái)當(dāng)作細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞需要貼附在培養(yǎng)皿表面(懸浮培養(yǎng)細(xì)胞除外)才能完成生長(zhǎng)過(guò)程,而有一些細(xì)胞卻總是不太給力,自己完成不了貼壁過(guò)程或者貼壁困難,這個(gè)時(shí)候鼠尾膠原蛋白就能承擔(dān)起讓細(xì)胞更容易貼壁的作用。這一步也被稱作涂層(coating),給培養(yǎng)皿涂上了一層膠原蛋白后,細(xì)胞就能更好地貼附上去,除了培養(yǎng)皿,一些需要使用海藻碳酸鈣微球培養(yǎng)得細(xì)胞,同樣也可以用鼠尾膠原蛋白協(xié)助細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)。

詳細(xì)步驟如下:1.75%酒精浸泡大鼠尾巴30min;2.將尾巴剪開、去掉皮毛,并剪成小段(3cm左右),抽出銀色的尾鍵;3.把剪碎的尾鍵置于150ml,0.1%消過(guò)毒的醋酸中,4℃放置,并不時(shí)振蕩;4.48h后取上清,4000轉(zhuǎn)離心30min后,取上清;5.分裝上清(鼠尾膠)4度(或-20度)保存。有時(shí)可繼續(xù)向4。中沉淀中加入10-20ml醋酸,重復(fù)以上步驟,以制備更多的鼠尾膠。在使用時(shí),先將冰存的膠原液在室溫下解凍,再按以下步驟包被培養(yǎng)器皿:1)用吸管吸取膠原液,在無(wú)菌的培養(yǎng)器皿的生長(zhǎng)面內(nèi)壁上均勻地涂上薄薄的一層膠原溶液。2)若包被的是培養(yǎng)瓶,可向培養(yǎng)瓶通入氨氣或用浸有氨水的棉球封口片刻。讓氨氣充入瓶?jī)?nèi)后,即可旋緊瓶蓋或塞緊瓶塞。若為培養(yǎng)皿或板的話,可將培養(yǎng)皿或板放在已消毒的飯盒內(nèi),將浸有氨水的棉球放入飯盒內(nèi),蓋緊飯盒蓋,四周用封口膠封死。鼠尾膠原醋酸溶解:建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。

天津正規(guī)鼠尾膠原直銷廠家,鼠尾膠原

酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對(duì)分子質(zhì)量和濃度檢測(cè)鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上,可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(,其生物力學(xué)強(qiáng)度極差,一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進(jìn)行SDS-PAGE,結(jié)果顯示:Ⅰ型膠原蛋白原液在相對(duì)分子質(zhì)量130000附近有明顯條帶,另一條帶的相對(duì)分子質(zhì)量大于170000(圖2)。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中,將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中。礦化2、6d后,分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進(jìn)行TEM和電子衍射觀察。鼠尾膠原醋酸溶解:不要晃動(dòng)或攪拌。成都鼠尾膠原廠家

一種基于鼠尾膠原蛋白:各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?% 2% 1%,余量的水。天津正規(guī)鼠尾膠原直銷廠家

一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,調(diào)節(jié)pH=6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時(shí),去除上清液,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀;2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,冰水浴中,調(diào)節(jié)PH=6.5;溶液依次通過(guò)陽(yáng)離子交換樹脂、陰離子交換樹脂進(jìn)行脫鹽處理;(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液,-40至-20°C預(yù)凍2?4小時(shí),然后真空冷凍干燥,凍干產(chǎn)品經(jīng)進(jìn)一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,滅菌、包裝,得到成品膠原蛋白粉末。天津正規(guī)鼠尾膠原直銷廠家