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糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過(guò)碘酸水溶液5分鐘?;?%過(guò)碘酸95%酒精溶液(過(guò)碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。試劑配制:(1)0.5%過(guò)碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過(guò)濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過(guò)濾,此時(shí)溶液應(yīng)為無(wú)色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差~可以選用真空滲入法來(lái)幫助底物和酶滲入細(xì)胞。山東品牌糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
糖原染色:1、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上,主要用來(lái)檢測(cè)組織中的糖類。過(guò)碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。2、原理PAS染色又稱過(guò)碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來(lái)顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過(guò)碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無(wú)色品紅結(jié)合,紅色,定位于胞漿上。3、應(yīng)用隨著醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展,糖原染色應(yīng)用的范圍更加普遍,如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些的診斷等浙江糖原染色試劑盒單價(jià)腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽(yáng)性。
網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細(xì)而短的纖維,大量堆積時(shí)則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi),血管周圍以及造血部位,內(nèi)分泌腺的腺細(xì)胞團(tuán)索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過(guò)程,對(duì)疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細(xì)緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗(yàn)的重要指標(biāo),尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來(lái)鑒別與肉瘤。而在HE染色標(biāo)本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色。
糖元染色試劑盒細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面。細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分普遍,主要包括。①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。②生物膜與細(xì)胞器的研究。③細(xì)胞骨架體系的研究。④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。⑧細(xì)胞工程。PAS染色,全稱過(guò)碘酸雪夫染色(PeriodicAcid-SchiffStain),主要用來(lái)顯示糖原和其他多糖物質(zhì),因此也稱作糖原染色。另外,此染色方法還可以顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì),以及軟骨、垂體、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜、霉菌等。PAS法的檢測(cè)原理在于:過(guò)碘酸(也成為高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑糖原的固定要及時(shí),而且標(biāo)本要新鮮。
染色的一般原則:因檢測(cè)細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測(cè)儀器不同,因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同,因此建議每次檢測(cè)均需使用凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞做單陽(yáng)對(duì)照,進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。標(biāo)記抗體常用熒光素FITC,EGFP激發(fā)光:488nm發(fā)射光:525nm;使用面較廣,價(jià)格便宜。PE激發(fā)光488nm發(fā)射光575nm,此熒光的激發(fā)效率較佳,故此熒光得到的信號(hào)較強(qiáng);檢測(cè)某些弱表達(dá)的抗原,推薦使用此熒光素。價(jià)格較FITC昂貴。APC激發(fā)光633nm,發(fā)射光660nm,在配有雙激光的流式細(xì)胞儀上,此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來(lái)避開自帶綠色熒光的樣本。流式細(xì)胞儀相關(guān)試劑盒。推薦用于骨和軟骨的染色。江西提供糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
自早幼粒階段以后的粒細(xì)胞和幼單核細(xì)胞可呈弱陽(yáng)性反應(yīng)。山東品牌糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
注意事項(xiàng):染色時(shí):①染色時(shí)必須嚴(yán)格按照染色操作說(shuō)明書進(jìn)行染色。②在染色過(guò)程中,前一個(gè)染液浸染完成后,在進(jìn)行下一個(gè)染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,使前一個(gè)染液沖洗干凈后再進(jìn)行下一步驟。③每次滴加染液前,務(wù)必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,造成染色不佳。④在滴加染液時(shí),務(wù)必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費(fèi)試劑。在染色時(shí),用有色鉛筆在組織周圍劃一個(gè)圈,這樣在滴加染液時(shí)就不會(huì)使染液溢出。山東品牌糖原染色試劑盒量大從優(yōu)