無血清細胞凍存液相對于含血清細胞凍存液的優(yōu)勢有:1.即用型,無需現(xiàn)配,直接將細胞懸浮于凍存液中即可。2.通用型,適用于凍存各種細胞系、原代細胞。3.無需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡單。4.不含血清,較大減少細胞污染。5.因不含血清,批次間差異小。6.無需液氮,-80℃冰箱長期凍存。7.可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細胞凍存時可節(jié)省篩選過程。無血清細胞凍存液是不含血清和動物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細胞凍存液。可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結合細胞外的水分子。廈門無血清細胞凍存液報價
無血清細胞凍存液對比含血清細胞凍存液的優(yōu)勢:傳統(tǒng)的細胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合,其中DMSO的含量是10%,血清的含量是10%,統(tǒng)稱為含血清細胞凍存液。含血清細胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法,如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,然后移至-20℃冰箱30分鐘,再移至-80℃冰箱保存16-18個小時(或隔夜),較后才移至液氮罐中進行長期的儲存。(其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量的死亡。)廈門無血清細胞凍存液報價無血清細胞凍存液,2-8℃保存即可,無需再進行分裝。
凍存溫度:凍存溫度是指能長期保存細胞的較低溫度,在此溫度下,細胞生化反應極其緩慢甚至停止,但經(jīng)過長期保存,在復蘇后仍能保持正常的結構和功能。不同的細胞和生物體以及使用不同的冷凍保存方法要取得同樣的冷凍保存效果,冷凍保存溫度可以不同。但從實際和效益的觀點出發(fā),液氮溫度-196℃是目前較佳的冷凍保存溫度。在-196℃時,細胞的生命活動幾乎完全停止,但復蘇后細胞的結構和功能完好。如果冷凍過程得當,一般生物樣品在-196℃下均可保存十年以上。應用-70℃~-80℃保存細胞,短期內(nèi)對細胞的活性無明顯影響,但隨著凍存時間延長,細胞存活率明顯降低。在冰點到-40℃范圍內(nèi)保存細胞的效果不佳。
干細胞無血清凍存液操作事項:使用說明:1.細胞消化和計數(shù),用胰酶對待凍存的細胞進行消化,并對細胞進行計數(shù)。2.1000轉/min離心5分鐘(4℃),去掉上清。3.根據(jù)細胞計數(shù)的情況,加入適量的干細胞無血清凍存液,使細胞密度在1×106左右(或根據(jù)自己希望達到的細胞密度)。4.輕輕地重懸細胞(務必重懸均勻)。5.將重懸的細胞按等份加入到滅菌的凍存管(需提前做好標記或者貼上標簽)中,旋緊凍存管蓋。6.將凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒直接放入-80℃。7.第二天將細胞從-80℃轉移到液氮中。注意事項:1.用處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存。2.控制好胰酶的消化時間,切記消化過度,會影響復蘇效果。3.重懸細胞的過程中,請務必要輕柔,以免損傷細胞,但同時也一定要充分重懸,這樣細胞在復蘇時才不會成團。4.細胞操作請注意無菌。無血清細胞凍存液產(chǎn)品特色:不含動物源成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低。
無血清快速細胞凍存液細胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2.按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù)。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3.取相當于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min)。移去離心管中的上清液。4.加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細胞混合液。5.將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。6.直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,長期冷凍保存。7.若研究者需要液氮保存時,可將完全凍結的凍存管(放入-80℃冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐。將融化后的含細胞的冷凍保存液迅速析出置于新鮮培養(yǎng)基中充分混勻。廈門無血清細胞凍存液銷售廠家
將要凍存的細胞懸液,進行細胞計數(shù),計數(shù)后離心。廈門無血清細胞凍存液報價
冷凍速率:冷凍速率是指降溫的速度,直接關系到冷凍效果。冷凍速度不同,細胞內(nèi)水分向外流動的情況也不相同,不同的冷凍速度既然能使細胞內(nèi)發(fā)生不同的生理變化,也可以對細胞產(chǎn)生不同的損傷。超快速玻璃化冷凍對細胞存活來說是較為理想的冷凍方法。細胞內(nèi)外呈玻璃化凝固,無冰晶形成或形成很小的冰晶,對細胞膜和細胞器不致造成損傷,細胞也不會在高濃度的溶質(zhì)中長時間暴露而受損。不同細胞的較適冷凍速率不同。小鼠骨髓干細胞、酵母、人紅細胞的較適冷凍速率分別為1.6℃/min、7℃/min和200℃/min。細胞與細胞之間的較適冷凍速率可在1.6℃~300℃/min,故對一種細胞進行冷凍保存之前,首先需要測定其較適冷凍速率,以保證獲得較高的冷凍存活率。廈門無血清細胞凍存液報價