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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-08-27

糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個(gè)方面:PAS染色時(shí)需于暗處加蓋反應(yīng),染色時(shí)間10~20min(染色時(shí)間長(zhǎng)短取決于試劑的質(zhì)量和環(huán)境溫度,SO濃度高,染色時(shí)間適當(dāng)縮短;環(huán)境溫度高,染色時(shí)間也應(yīng)適當(dāng)縮短,反之則需適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間)。染色過程中不能接觸伊紅,以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時(shí),較好作消化對(duì)照,即取兩張連續(xù)切片,其中一張脫蠟至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后與不經(jīng)消化處理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如經(jīng)消化處理的切片染色陰性,不經(jīng)消化處理的切片染色陽(yáng)性,即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉(鉀)溶液配置后,不能保存,因此,必須現(xiàn)配現(xiàn)用,用過一次即應(yīng)廢棄。各種試劑必須是化學(xué)純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥??梢赃x用真空滲入法來(lái)幫助底物和酶滲入細(xì)胞。上海提供糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨

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特染的應(yīng)用價(jià)值:現(xiàn)代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細(xì)胞及分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用日益普遍,但由于這些技術(shù)要求一定的實(shí)驗(yàn)條件以及所需的試劑價(jià)格較為昂貴,對(duì)于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學(xué)技術(shù)則具有無(wú)需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡(jiǎn)單的優(yōu)勢(shì),在臨床病理學(xué)診斷中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。比如,當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當(dāng)組織中出現(xiàn)均一化學(xué)物質(zhì)是否為淀粉樣變性等,用組織化學(xué)技術(shù)區(qū)別起來(lái)很簡(jiǎn)單,所以組織化學(xué)技術(shù),雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個(gè)很有實(shí)用價(jià)值的技術(shù)~安徽提供糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家本試劑盒常用于常規(guī)組織切片染色,對(duì)于細(xì)胞、極其薄的切片。

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糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘。或1%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時(shí)溶液應(yīng)為無(wú)色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。

特殊染色方法選擇應(yīng)遵循:染色結(jié)果對(duì)比鮮明、結(jié)果易保存、陽(yáng)性突出的染色方法;突出的陽(yáng)性結(jié)果在于所選擇方法表達(dá)的色調(diào)及如何進(jìn)行背景的復(fù)染。結(jié)果能夠長(zhǎng)時(shí)間保存、不褪色對(duì)于后續(xù)的調(diào)閱、科研、論文均較為有利。如顯示淀粉樣物質(zhì),甲基紫染色法雖然流程較為簡(jiǎn)單,但結(jié)果不易保存,陽(yáng)性對(duì)比度相對(duì)不突出;剛果紅染色法陽(yáng)性結(jié)果明顯,長(zhǎng)時(shí)間保存不褪色,流程簡(jiǎn)便,更是實(shí)用的方法。如顯示彈性纖維,地衣紅染色染液雖配制較方便,但結(jié)果對(duì)比度相對(duì)欠佳,與其他幾個(gè)染色法相比,多不選擇使用。糖原染色顯示在肝或心肌細(xì)胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診。

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糖原pas染色液配制及使用方法:1、常規(guī)固定,常采用10%的福爾馬林,常規(guī)脫水包埋。2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水;冰凍切片直接入蒸餾水。3、自來(lái)水沖洗2~3min,再用蒸餾水浸洗2次。4、入過碘酸溶液,室溫放置,一般不宜超過10min。5、自來(lái)水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室溫陰暗處浸染。7、自來(lái)水沖洗10min。8、入蘇木素染色液,染細(xì)胞核。9、酸性乙醇分化液分化。_x005f_x005f_x005f_x000c_10、自來(lái)水沖洗10~15min,更換蒸餾水清洗,使其返藍(lán)。11、逐級(jí)常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明,中性樹膠封固。取材必須新鮮,這一點(diǎn)對(duì)于從事細(xì)胞生物學(xué)研究尤為重要。山東哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒廠家直銷

切取的材料應(yīng)小而薄,便于固定液迅速滲入內(nèi)部。上海提供糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨

粘液染色法:粘液一般有以下幾點(diǎn)特性:(1)對(duì)鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色。(2)對(duì)某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性。(3)遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外。(4)溶于弱堿溶液。常用的粘液染色有以下幾種:1、P.A.S染色法:操作方法同前,結(jié)果;中性粘液性物質(zhì),某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,核呈藍(lán)色。2、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點(diǎn)是能同時(shí)顯示出酸性和中性粘液物質(zhì)。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水。(2)3%醋酸液洗2分鐘,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘。(3)蒸餾水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,水洗。(6)常規(guī)脫水、封片上海提供糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨