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RNA是核糖核酸,是存在于生物細(xì)胞以及部分病菌、類(lèi)病菌中的遺傳信息載體。RNA是由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成的長(zhǎng)鏈狀分子。一個(gè)核糖核苷酸分子則由磷酸,核糖和堿基構(gòu)成。在細(xì)胞中,根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,RNA主要分三類(lèi),即tRNA、rRNA,以及mRNA。mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而成的蛋白質(zhì)合成模板;tRNA是mRNA上遺傳密碼的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者;rRNA是組成核糖體的部分,而核糖體是蛋白質(zhì)合成的機(jī)械。細(xì)胞中還有許多種類(lèi)和功能不一的小型RNA,可調(diào)節(jié)基因表達(dá)。而其他如I、II型內(nèi)含子、HDV、核糖體RNA等等都有催化生化反應(yīng)過(guò)程的活性,即具有酶的活性,這類(lèi)RNA被稱(chēng)為核酶。再采集樣本之后馬上加入 DNA/RNA Shield,可以快速降解掉 RNase 等蛋白物質(zhì)。蘇州正規(guī)RNA提取試劑直銷(xiāo)廠家
RNA提?。侯A(yù)備工作(1)塑料制品:盡量使用一次性無(wú)菌塑料制品。已標(biāo)明RNase-free的塑料制品,如沒(méi)有開(kāi)封使用過(guò),通常不必再處理。處理的步驟如下:O在玻璃燒杯中注入去離子水,加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%(DEPC-H2O)。(DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強(qiáng)的劇毒物,須在通風(fēng)櫥中小心使用)O將待處理的塑料制品放入一個(gè)可以高溫滅菌的容器中,注入DEPC-H2O,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中,在通風(fēng)柜中37℃或室溫下處理過(guò)夜。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中,將裝有DEPC-H2O處理過(guò)的塑料制品的容器以鋁箔封口,高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。O滅菌塑料制品烘烤干燥,置潔凈處備用。(2)玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時(shí)以上。蘇州正規(guī)RNA提取試劑進(jìn)貨價(jià)常用RNA提取方法有:1TRIzol法;2TRIzol+過(guò)柱法;3CTAB+過(guò)柱法;4試劑盒法。
總RNA提取試劑是一種快速?gòu)慕M織細(xì)胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過(guò)程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后離心,RNA相將與DNA和蛋白質(zhì)分離,隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質(zhì)。純化的總RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保護(hù)、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯等實(shí)驗(yàn)。是一種快速?gòu)慕M織細(xì)胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過(guò)程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后離心,RNA相將與DNA和蛋白質(zhì)分離,隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質(zhì)。純化的總RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保護(hù)、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯等實(shí)驗(yàn)
糞便總RNA快速提取試劑盒:獨(dú)特裂解劑/裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶,然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶,然后將粗純化的玻璃奶轉(zhuǎn)移到離心柱,再通過(guò)一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將腐植酸、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。試劑盒特點(diǎn):離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好??朔藝?guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。兼容性強(qiáng),適用于各種不同的土壤、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟??焖?,簡(jiǎn)捷,單個(gè)樣品操作一般可在1小時(shí)內(nèi)完成。多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值達(dá)1.9以上,可直接用于PCR,Northern-blot和各種酶切反應(yīng)。拭子RNA提取試劑的選擇?洗脫液洗脫能力好,核酸的提取得率就高。
昆蟲(chóng)RNA柱式提取試劑盒使用方法:將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的乙醇會(huì)影響RNA的使用。將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脫液,室溫放置1~2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用在裂解液上游加入酶裂解步驟(如蛋白酶 K、溶菌酶等)。蘇州正規(guī)RNA提取試劑進(jìn)貨價(jià)
當(dāng)然還有其它的進(jìn)口試劑盒,但是均存在價(jià)格高、訂貨周期長(zhǎng)的問(wèn)題。蘇州正規(guī)RNA提取試劑直銷(xiāo)廠家
超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒:無(wú)DNA污染,可直接反轉(zhuǎn)錄,熒光定量,不會(huì)出現(xiàn)洗脫液含絡(luò)合Mg離子成分,壓制后續(xù)PCR反應(yīng)的情況。本試劑盒提取的RNA可直接用于對(duì)前期RNA提取質(zhì)量非常高的后續(xù)實(shí)驗(yàn),如轉(zhuǎn)錄組RNA測(cè)序,制作基因芯片,熒光定量PCR,核酸雜交,反轉(zhuǎn)錄等所有后續(xù)實(shí)驗(yàn)。一個(gè)樣十多分鐘搞定!具有多糖多酚植物RNA提取試劑盒已普及到全國(guó)各大農(nóng)業(yè)大學(xué),農(nóng)科院,植物所等相關(guān)院校單位,包括中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué),中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)所,作物所,蔬菜所,多糖多酚植物RNA提取試劑盒由華越洋自主研發(fā)生產(chǎn),博取眾家之長(zhǎng),根據(jù)多年來(lái)市場(chǎng)反饋不斷進(jìn)行技術(shù)升級(jí)和改良得來(lái)。具有操作步驟少,實(shí)驗(yàn)快捷,RNA產(chǎn)量純度高,充分滿(mǎn)足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求的需要,適用提取樣品普遍等特點(diǎn)。產(chǎn)量:每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不等。純度:OD值一般在1.9以上。得到的RNA無(wú)DNA污染,可直接用于反轉(zhuǎn)錄,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(尤其對(duì)RNA溶液中DNA非常敏感)等所有后續(xù)實(shí)驗(yàn)蘇州正規(guī)RNA提取試劑直銷(xiāo)廠家