上海石家莊RNA提取試劑

RNA提取試劑注意事項：1、必須戴一次性手套操作，且盡量不要對著RNA樣品說話，以防RNA酶污染。建議戴一次性口罩操作。2、TRIReagent含有毒物質(zhì)苯酚，避免接觸皮膚或吸入。為防止濺入眼睛，請戴防護眼鏡或使用透明保護屏。如皮膚接觸TRIReagent，請立即用大量去垢劑和水沖洗，如仍有不適，請聽取醫(yī)生意見。3、TRIReagent抽提總RNA的同時，理論上也可抽提蛋白和DNA，但未經(jīng)測試。4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。是基于異硫氰酸胍/苯酚法的一種即用的從細胞和組織中提取總RNA的試劑，在樣品裂解或勻漿過程中取出水相，用異丙醇可沉淀回收RNA；中間層用乙醇沉淀可回收DNA；有機相用異丙醇沉淀可回收蛋白。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點：RNA純度更高，無雜質(zhì)殘留，特別適合于對純度要求很高的下游實驗。上海石家莊RNA提取試劑

酵母RNA的提取方法：稀堿法是屬化學(xué)破壁法，其方法是在一定堿濃度下，使構(gòu)成細胞壁的蛋白質(zhì)、脂肪及糖的化合物得到水解，從而破壞細胞壁，此法對堿的濃度及提取溫度要求比較嚴格，堿的濃度不可過濃，應(yīng)控制在1％，并且對提取溫度也有一定的要求，提取時間短。因為在過分劇烈的條件下，容易使核糖核酸分子內(nèi)的酯鍵斷裂，使核糖核酸降解而影響收得率。酵母菌作為重要的模式生物，是遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的重要研究材料。由于酵母菌的細胞壁成分復(fù)雜，且較原核生物厚，難于破碎，因此酵母菌總RNA的抽提純化要比原核生物總RNA的抽提純化困難的多。如何有效地破碎細胞壁并保證RNA的完整性，是獲得高質(zhì)量酵母菌總RNA的關(guān)鍵問題。總RNA的提取方法還有很多，如Trizol法、異硫氰酸胍法、十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)法、尿素法、十二烷基硫酸鈉(SDS)法、熱硼酸鹽法等，這些方法各有優(yōu)缺點，不同的方法適用于不同類型的材料。南京正規(guī)RNA提取試劑進貨價rRNA是組成核糖體的組分，是蛋白質(zhì)合成的工作場所。

RNA提取：預(yù)備工作（1）塑料制品：盡量使用一次性無菌塑料制品。已標明RNase-free的塑料制品，如沒有開封使用過，通常不必再處理。處理的步驟如下：O在玻璃燒杯中注入去離子水，加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%（DEPC-H2O）。（DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強的劇毒物，須在通風(fēng)櫥中小心使用）O將待處理的塑料制品放入一個可以高溫滅菌的容器中，注入DEPC-H2O，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中，在通風(fēng)柜中37℃或室溫下處理過夜。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中，將裝有DEPC-H2O處理過的塑料制品的容器以鋁箔封口，高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。O滅菌塑料制品烘烤干燥，置潔凈處備用。（2）玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時以上。

酵母RNA的提取方法：濃鹽法。酵母菌外層是厚達1.2μm的細胞壁，其化學(xué)成分是葡聚糖（30-40%）和甘露聚糖（30%），此外，脂類8.5-13.5%，蛋白質(zhì)6-8%，還含有幾丁質(zhì)，酵母菌的葡聚糖，分子是為240000道爾頓，是一種分枝聚合物，葡聚糖與甘露糖之間由蛋白質(zhì)維系起來。近10%的甘露聚糖的側(cè)鏈通過磷酸二酯鍵與磷酸邊接，所有這些連接方式都使得酵母提取物首要的也是關(guān)鍵的是如何破壞細胞壁。破壁方法有自溶破壁、酶法破壁等多種方法，而用高濃度鹽溶液處理，同時加熱，以改變細胞的通透性，就可以使核酸從細胞內(nèi)釋放出來。由于RNA鈉鹽易溶于水,在含鹽的菌體溶液中,RNA有較高的溶解度,這樣,通過控制溫度使蛋白質(zhì)變性沉淀,通過離心將RNA及蛋白質(zhì)和脫核酵母菌體分離,從而達到提取之目的。其中食鹽起到自溶促進劑，以及防腐與脫臭的作用。在裂解液上游加入酶裂解步驟（如蛋白酶 K、溶菌酶等）。

總RNA提取試劑試劑能促進不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如，從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色，可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分)，兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S)，低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳，28S的位置大約在2kb，18S大約在1kb的位置，不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項：樣品用總RNA提取試劑勻漿后，如果不即刻加入氯仿之前，置于-70°C下可放置一個月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀，2-8°C可以保存一周，-20°C條件下可以保存1年。RNA半衰期比較短，容易降解，建議提取后盡快進行后續(xù)實驗，如反轉(zhuǎn)錄成cDNA，NorthernBlot等。再采集樣本之后馬上加入 DNA/RNA Shield，可以快速降解掉 RNase 等蛋白物質(zhì)。上海石家莊RNA提取試劑

一個核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和堿基構(gòu)成。上海石家莊RNA提取試劑

游離RNA(或稱循環(huán)RNA,cell-freeRNA,簡稱cfRNA),即存在于細胞外的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,包括mRNA和RNA,在人的多種體液中被普遍研究并成為疾病無創(chuàng)性診斷和研究的新分子標志物。文獻總結(jié)了以下兩個方面，一方面游離RNA主要來源于tumour細胞，另一方面tumour細胞來源有凋亡、壞死、主動釋放三種機制，目前認為以凋亡為主。游離RNA的生物學(xué)特征：游離RNA的結(jié)構(gòu)RNA相對DNA而言,更易被普遍存在的核糖核酸酶所降解,而且病癥患者血清中含有更高濃度的核糖核酸酶,病癥患者血清中以RNA-蛋白脂復(fù)合物化學(xué)組成來保護RNA,半衰期大約為2天。本試劑盒采用獨特的配方和添加劑，能高效的分離血清、血漿及其它無細胞體液等樣品中分離出游離的RNA，另外本試劑還可以有效地壓制各種外源性和內(nèi)源性的RNA酶，同時結(jié)合特制的純化柱，能較大限度的保持RNA的完整性、高得率以及純度，并能保留小RNA，為需要進行小RNA研究，如RNA的用戶提供了強有力的工具。上海石家莊RNA提取試劑