寧波正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹

外泌體可通過流式、WB（檢測(cè)指標(biāo)有CD9,CD63,CD81）、電鏡觀察、NTA粒徑追蹤等手段檢測(cè)，普遍應(yīng)用于藥物載體、疾病診斷marker、精細(xì)醫(yī)療、一些病癥治病等方面研究。由于外泌體直徑小，樣本含量低，提取十分困難。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心、超濾離心法、免疫磁珠抗體捕獲、商用試劑盒等。但到目前為止，仍沒有一種提取方法能同時(shí)保證外泌體的含量、純度以及生物活性。外泌體是細(xì)胞間進(jìn)行物質(zhì)運(yùn)輸和信息交流的重要工具，可以通過調(diào)節(jié)免疫功能促進(jìn)一些病癥的增殖，血管新生和一些病癥轉(zhuǎn)移。與細(xì)菌傳染，幫助細(xì)菌逃避免疫關(guān)系很大，并與心血管疾病，老年癡呆等疾病具有密切關(guān)系外泌體（Exosome）發(fā)現(xiàn)于1986年，是一種直徑約30~100nm的雙層膜囊泡狀結(jié)構(gòu)小體。寧波正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹

由于這些核酸被囊膜包裹而被保護(hù)，穩(wěn)定性高，不易降解，是一種用于一些病癥診斷和預(yù)后監(jiān)測(cè)的非常理想的新型生物標(biāo)記物一些疾病的早期診斷、用藥監(jiān)控、預(yù)后判斷。近年來，隨著人們對(duì)外泌體的研究和認(rèn)識(shí)加深，外泌體檢測(cè)作為一種新型的液體活檢熱點(diǎn)技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無創(chuàng)診斷、治病和監(jiān)測(cè)；如何高效地提取外泌體是實(shí)現(xiàn)這項(xiàng)新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵。外泌體(Exosome)是從體液(尿液、血液、唾液、腹水、胸腹水等)和細(xì)胞液中快速提取的，其是活細(xì)胞分泌到胞外的囊泡樣小體，含有多種蛋白和核酸分子(DNA、RNA、以及miRNA)，在體內(nèi)細(xì)胞間物質(zhì)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起到重要作用。武漢正規(guī)外泌體提取試劑價(jià)格外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能，使得它具有潛在的應(yīng)用價(jià)值，可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo)。

外泌體（exosome）是所有細(xì)胞釋放出的細(xì)菌大小的顆粒。它們天然地存在于血液中。根據(jù)來自美國德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心的一項(xiàng)新的研究，對(duì)外泌體進(jìn)行基因操縱可能提供一種新的胰腺病治病方法。論文通信作者為德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學(xué)系研究員RaghuKalluri博士。在這項(xiàng)新的研究中，經(jīng)過基因修飾的外泌體（被稱作iExosome）能夠運(yùn)送特異性地靶向KRAS突變基因的小RNA分子，從而導(dǎo)致胰腺病模式小鼠病情緩解，增加它們的總存活率。這些研究人員采用了一種被稱作RNA干擾（RNAi）的靶向方法：利用這些天然的納米顆粒（即外泌體）運(yùn)送小干擾RNA（siRNA）或短發(fā)夾RNA（shRNA）分子來靶向胰腺病細(xì)胞中的KRAS突變基因，從而影響多種胰腺病模型的一些病癥負(fù)荷和存活。他們證實(shí)外泌體能夠作為一種高效的RNAi載體發(fā)揮作用，這是因?yàn)檫@些納米大小的囊泡（即外泌體）輕松地在體內(nèi)遷移和進(jìn)入靶細(xì)胞（包括病細(xì)胞）中。

外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來的微小囊泡，直徑約為30-200nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯狀形態(tài)、雙層膜結(jié)構(gòu)，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類型的細(xì)胞（免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞)，都可以產(chǎn)生并釋放exosome。Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA，Exosome可通過細(xì)胞膜受體直接受體細(xì)胞，也可運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA，甚至細(xì)胞器進(jìn)入受體細(xì)胞，參與細(xì)胞間通訊。Exosome在免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、血管生成、凋亡、凝血和廢物處理等生理過程發(fā)揮關(guān)鍵作用，不同細(xì)胞來源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同，可作為多種疾病的早期診斷標(biāo)記物，也能作為靶向藥物的載體進(jìn)行疾病外泌體的提取方法：色譜法。

PS不是你想有，想有就能有，迄今為止所發(fā)現(xiàn)的外泌體，并非所有的外膜表面都暴露PS。例如，細(xì)菌來源的外泌體膜表面沒有PS，因此，本款試劑不能提取這種外泌體?，F(xiàn)在的研究尚未得知是否所有的外泌體上都會(huì)露出PS，但是上述的外泌體標(biāo)記根據(jù)細(xì)胞種類不同表現(xiàn)出的信號(hào)強(qiáng)弱差大，通過利用本試劑盒PS親和法捕捉、提取外泌體是較好的方法。：這個(gè)MagCapture?ExosomeIsolationKitPS，1次提取的外泌體量大概是多少？實(shí)驗(yàn)樣品的種類和體積不同，提取的外泌體量也不一樣。Wako的操作實(shí)例中，一次提取操作可獲得蛋白量約30μg/mL（BCA法檢測(cè)），粒子數(shù)1~2×1010（NanoSightLM10檢測(cè)）（經(jīng)莫能菌素鈉刺激外泌體分泌的K562培養(yǎng)上清5mL濃縮為1mL后，對(duì)其進(jìn)行提取）。另外，和光驗(yàn)證了從1mL正常人混合血清提取一次，可回收約34μg/mL蛋白質(zhì)（BCA法檢測(cè)），約5×109/mL的粒子數(shù)（NanoSightLM10檢測(cè)）。本試劑盒終可獲得100μL的洗脫液。重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害，從而降低其質(zhì)量。上海正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹

外泌體提取：基于聚合物的沉淀技術(shù)。寧波正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹

外泌體的提取方法，先用含無外泌體血清的培養(yǎng)基對(duì)人脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行饑餓培養(yǎng)，這樣可使干細(xì)胞處于正常生長狀態(tài)，不會(huì)被克制生長增殖，其所分泌的外泌體所包含的有效物質(zhì)也更貼近其自然狀態(tài)下的外泌體，然后將含有外泌體的培養(yǎng)上清液進(jìn)行低速差速離心(即先一離心處理、再第二離心處理)以去除細(xì)胞及其碎片，用100kd超濾管對(duì)低速差速離心后的離心液進(jìn)行超濾濃縮得到外泌體濃度更高的超濾液，將超濾液經(jīng)過第三離心處理去除雜質(zhì)后直接用0.22μm過濾器過濾除菌，過濾掉粒徑為220nm以上的物質(zhì)，進(jìn)一步得到含顆粒粒徑小于220nm的濃縮液，因超濾濃縮處理和第三離心處理使得液體量濃縮，這樣過濾除菌效率得到較大提高，較后將濃縮液進(jìn)行超速離心的第四離心處理分離提取到外泌體。寧波正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹