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RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速裂解細胞,壓制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質(zhì)化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機相。RNA存在于水相中。水相轉(zhuǎn)移后,RNA通過異丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機相得到蛋白質(zhì)。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點:針對植物材料獨特配置,操作更簡單、流程更優(yōu)化。濟南RNA提取試劑平均價格
動物組織總RNA提取:1、盡量選取新鮮的組織,如果不是新鮮的(較好在三個月之內(nèi)-80℃冰箱或者在液氮中凍存的。在剪取組織時,不要拿到室溫直接剪取,一定要放到冰盒上,盡量避免反復凍融。2、用干凈的剪刀鑷子剪取一小塊組織,剪取樣本時盡量剪組織中心的部位,或者先將大塊的組織先從中間切開,然后再在新鮮切口的位置剪取樣本。取下的組織要充分的剪碎,將剪碎的組織放到無RNA酶的EP管中,加入裂解液,剪碎的組織要充分接觸裂解液,準備勻漿。3、正常組織選取綠豆粒大?。?0~60mg)的組織進行勻漿,如果組織中含有大量的蛋白、脂肪或者是緊密的纖維組織比如肝臟等,適當增減剪取組織的量(可選10~20mg)。4、如果提取的是魚肌肉,蝦肉,海蜇等含水分較多的組織時則應當適當提高樣本量用量(推薦100~200mg)。5、條件允許的情況下,動物組織使用高通道組織勻漿機勻漿后即可直接進行提取步驟,如沒有該設備。6、較后提取后得到的RNA一定要立即放到冰盒上,以減少RNA的降解。開封正規(guī)RNA提取試劑直銷廠家加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機相。
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒:1、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過程中去除干擾物的技術,已成功用于葡萄,中草藥等多糖含量高的樣品,成功用于棉花等多酚含量高的樣品。另外華越洋還開發(fā)了糖類清理劑,PCR壓制物清理劑,核酸提取優(yōu)化劑,樣品核酸穩(wěn)定劑,RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產(chǎn)品。2、適用材料普遍:尤其適合解決多醣多酚,色素等次級代謝物豐富的植物樣本難題。昆蟲RNA柱式提取試劑盒特點:操作簡單快速,處理一個樣品只需要約十分鐘。RNA純度高,平均OD260/280一般都在2.0左右,能夠有效去除大多數(shù)昆蟲中的多糖污染。適用于各種昆蟲組織,每100mg組織能提取到20~30μg總RNA。得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern雜交、cDNA合成等實驗。
功能的區(qū)別:1、RNA的功能:mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而成的蛋白質(zhì)合成模板;tRNA是mRNA上遺傳密碼的識別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運者;rRNA是組成核糖體的部分,而核糖體是蛋白質(zhì)合成的機械。細胞中還有許多種類和功能不一的小型RNA,可調(diào)節(jié)基因表達。而其他如I、II型內(nèi)含子、RNaseP、HDV、核糖體RNA等等都有催化生化反應過程的活性,即具有酶的活性,這類RNA被稱為核酶。2、DNA的功能:DNA有傳遞遺傳信息的功能,而蛋白質(zhì)則是由DNA的指令合成的。鑒定親子關系用得較多的是DNA分型鑒定。人的血液、毛發(fā)、唾液、口腔細胞等都可以用于用親子鑒定,十分方便。DNA是人身體內(nèi)細胞的原子物質(zhì)。每個原子有46個染色體,另外,男性的精子細胞和女性的卵子,各有23個染色體,當精子和卵子結合的時候。這46個原子染色體就制造一個生命,因此,每人從生父處繼承一半的分子物質(zhì),而另一半則從生母處獲得。馬鈴薯塊莖,蘋果,西瓜果肉,獼猴桃,梨,月季等,中快速提取總RNA,同時可以處理大量不同樣品。
RNA提取試劑注意事項:1、必須戴一次性手套操作,且盡量不要對著RNA樣品說話,以防RNA酶污染。建議戴一次性口罩操作。2、TRIReagent含有毒物質(zhì)苯酚,避免接觸皮膚或吸入。為防止濺入眼睛,請戴防護眼鏡或使用透明保護屏。如皮膚接觸TRIReagent,請立即用大量去垢劑和水沖洗,如仍有不適,請聽取醫(yī)生意見。3、TRIReagent抽提總RNA的同時,理論上也可抽提蛋白和DNA,但未經(jīng)測試。4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。是基于異硫氰酸胍/苯酚法的一種即用的從細胞和組織中提取總RNA的試劑,在樣品裂解或勻漿過程中取出水相,用異丙醇可沉淀回收RNA;中間層用乙醇沉淀可回收DNA;有機相用異丙醇沉淀可回收蛋白。細胞質(zhì)和細胞核RNA提取試劑盒特點:細胞質(zhì)RNA不含DNA,直接用于RT-PCR/qRT-PCR。無錫武漢RNA提取試劑
總共可以使用該試劑盒進行50次標準提取。濟南RNA提取試劑平均價格
Trizol是一種總RNA抽提試劑,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速裂解細胞,壓制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。原理:在勻質(zhì)化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機相。RNA存在于水相中。水相轉(zhuǎn)移后,RNA通過異丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機相得到蛋白質(zhì)。異硫氰酸胍氯化銫超速離心法:原理:使用蛋白質(zhì)變性劑異硫氰酸胍有效壓制RNA酶的活性,經(jīng)過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質(zhì),進行密度梯度超速離心,RNA沉淀于管底,而DNA與蛋白質(zhì)在上清液中。使用這種方法,不但能得到高質(zhì)量的RNA,而且能同時分離出細胞染色體DNA。濟南RNA提取試劑平均價格