太原無(wú)血清細(xì)胞凍存液

無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液，通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株。特別配方具有有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力。不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白，能減少各類(lèi)病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細(xì)胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細(xì)胞的凍存，也適用于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存。產(chǎn)品特色：高安全性，完全使用醫(yī)藥品等級(jí)原料進(jìn)行生產(chǎn)，不含動(dòng)物成分，病毒、霉菌和支原體等污染可能性低，各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。細(xì)胞存活率高，無(wú)批次差異。完全凍存液配方，可直接使用，方便簡(jiǎn)捷，可直接存放于-70℃冰箱凍存，無(wú)需經(jīng)過(guò)費(fèi)時(shí)的程序降溫過(guò)程（省時(shí)、省力、省錢(qián)）。隨著細(xì)胞治好以及細(xì)胞儲(chǔ)存產(chǎn)業(yè)發(fā)展，細(xì)胞凍存也面臨從科研應(yīng)用走向產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化。太原無(wú)血清細(xì)胞凍存液

無(wú)血清細(xì)胞凍存液通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株（tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞），大部分的干細(xì)胞，凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存。不含動(dòng)物源性蛋白，不含血清成分，可有效減少各類(lèi)細(xì)菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分，提高細(xì)胞存活率和活力，亦適合于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：1、無(wú)需程序性降溫，可直接將細(xì)胞置于-80℃凍存，凍存液無(wú)需稀釋。2、細(xì)胞可于-80℃長(zhǎng)期保存。3、凍存液不含血清等，較大降低細(xì)胞污染的可能性。保存方法：冰袋運(yùn)輸，4℃保存，保質(zhì)期一年。合肥無(wú)血清細(xì)胞凍存液進(jìn)貨價(jià)無(wú)血清凍存液使用方法：將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。

細(xì)胞凍存，我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng)：DMSO快速稀釋會(huì)對(duì)細(xì)胞造成滲透性損傷，使存活率下降50%。對(duì)于DMSO凍存的細(xì)胞，復(fù)蘇后應(yīng)緩慢稀釋成細(xì)胞懸液：1）凍存液：培養(yǎng)基=1:1稀釋成細(xì)胞懸液后離心，然后重懸至培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，隔天換液；2）凍存液：培養(yǎng)基=1:10稀釋成細(xì)胞懸液，不用離心，直接放置到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)2-4小時(shí)后，換液。上述兩種方法都是比較常用的細(xì)胞復(fù)蘇方法，后者更適用于原代細(xì)胞或比較難養(yǎng)的細(xì)胞。液氮內(nèi)的細(xì)胞凍存較長(zhǎng)時(shí)間不要超過(guò)半年，凍存在液氮中的細(xì)胞應(yīng)一段時(shí)間內(nèi)進(jìn)行更替。一個(gè)細(xì)胞系在培養(yǎng)一個(gè)月后，可復(fù)蘇一管新的細(xì)胞確保其質(zhì)量沒(méi)有發(fā)生太大變化，傳代幾次后，再凍存留種。

細(xì)胞凍存的操作步驟：1.配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。3.去除PBS，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái)；4.離心1000rpm，5min；5.去除胰蛋白酶，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的較終密度為5×106/ml～1×107/ml；6.將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5ml；7.在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱(chēng)，凍存時(shí)間及操作者；8.凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時(shí)，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。無(wú)血清凍存液用途：無(wú)血清細(xì)胞凍存液用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲(chǔ)。

無(wú)血清細(xì)胞凍存液與含血清細(xì)胞凍存液對(duì)比：傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%，統(tǒng)稱(chēng)為含血清細(xì)胞凍存液。含血清細(xì)胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘，然后移至-20℃冰箱30分鐘，再移至-80℃冰箱保存16-18個(gè)小時(shí)（或隔夜），較后才移至液氮罐中進(jìn)行長(zhǎng)期的儲(chǔ)存?？梢?jiàn)，含血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時(shí)遇到的問(wèn)題：1.凍存細(xì)胞時(shí)需現(xiàn)配凍存液(如購(gòu)買(mǎi)市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液，此步可省略)。2.需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮），步驟繁瑣，耗時(shí)耗力。3.含血清，細(xì)胞污染(病毒、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高。4.血清批次、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異。5.需液氮凍存，且不能原位（如孔板）凍存。同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞。太原無(wú)血清細(xì)胞凍存液

無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能：為了避免反復(fù)凍融，傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液，分裝成小管后置于-20℃環(huán)境下保存。太原無(wú)血清細(xì)胞凍存液

細(xì)胞凍存的基本原理：細(xì)胞代謝過(guò)程需要各種蛋白酶的參與，而這些蛋白酶在環(huán)境溫度低于-70℃時(shí)會(huì)集體不工作，低溫貯藏的目的是通過(guò)較低溫使細(xì)胞代謝活動(dòng)近乎停止。細(xì)胞因此進(jìn)入休眠狀態(tài)，使細(xì)胞“不會(huì)老”，所以可以長(zhǎng)期保存。因?yàn)閮鋈谶^(guò)程對(duì)所有細(xì)胞和組織都是有一定傷害的，因此，需要開(kāi)發(fā)出有效的技術(shù)來(lái)防止細(xì)胞死亡和損傷。低溫保護(hù)劑可保護(hù)細(xì)胞不受細(xì)胞內(nèi)冰凍影響，目前多采用DMSO，甘油，乙二醇和丙二醇等滲透型低溫保護(hù)劑。它們的作用機(jī)制包括：自由進(jìn)入細(xì)胞，取代水，使冰點(diǎn)下降，充當(dāng)鹽的二次溶劑，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性。太原無(wú)血清細(xì)胞凍存液