長沙正規(guī)外泌體提取試劑報價

由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能，使得它具有潛在的應(yīng)用價值，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo)，另一方面也可以作為治病手段，未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床治病。外泌體的分離純化一直是科研工作者關(guān)注的問題，獲得高純度的外泌體對后續(xù)的研究至關(guān)重要。據(jù)了解，目前人們多采用超速離心、免疫磁珠、超濾、沉淀或試劑盒等方法實現(xiàn)外泌體的提取分離。外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細胞因子、生長因子）以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質(zhì)，在體內(nèi)參與細胞通訊、細胞遷移、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過程，與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關(guān)。用于外泌體提取的體液收集注意事項：操作要輕柔迅速。長沙正規(guī)外泌體提取試劑報價

外泌體（exosomes）是活細胞經(jīng)過"內(nèi)吞-融合-外排"等一系列調(diào)控過程而形成的膜性囊泡，來源于晚期核內(nèi)體(也稱為多囊泡體)，直徑約為30-150nm，密度在1.13-1.21g/ml，天然存在于血液、唾液、尿液及母乳等體液中，同時外泌體也存在于組織和細胞間隙中。人體中幾乎所有類型的細胞均能產(chǎn)生外泌體，人體中大約有1014個外泌體，大約平均每個細胞產(chǎn)生1000-10000個。外泌體中含有核酸（DNA、miRNA、lncRNA、mRNA、tRF等）、蛋白和脂類，在細胞間物質(zhì)和信息轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮重要作用，研究表明其在干細胞、免疫調(diào)控、瘤轉(zhuǎn)移、血管生成以及生物標(biāo)志物等領(lǐng)域都發(fā)揮著不可替代的作用。徐州正規(guī)外泌體提取試劑同時可獲得高純度和高回收率的外泌體——如新西蘭IZON開發(fā)的系列的外泌體排阻劑。

外泌體的提取分離：1、PEG-base沉淀法。聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性），顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會破壞外泌體等，因此發(fā)表文章時易受質(zhì)疑。2、試劑盒提取。近幾年來，市場上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒，有的是通過特殊設(shè)計的過濾器過濾掉雜質(zhì)成分，有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進行分離純化，也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。這些試劑盒不需要特殊設(shè)備，隨著產(chǎn)品不斷更新?lián)Q代，提取效率和純化效果逐漸提高，因而逐漸取代超速離心法并推廣開來。有些試劑盒操作簡便，不用超速離心，同時可獲得高純度和高回收率的外泌體。

外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體，可通過細胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體，內(nèi)涵體與細胞膜融合后釋放其中的小囊泡。外泌體的直徑在40-110nm之間，其中包含RNA、蛋白質(zhì)、microRNA、DN段等多種物質(zhì)，存在于血液、唾液、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史，雖然較初被認為可能是細胞的“垃圾”，所以才被排出來，但是近年來研究表明外泌體具有功能活性并可進行細胞間信息傳遞。如今，研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中、一些病癥細胞發(fā)生的發(fā)展、神經(jīng)細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中都發(fā)揮著重要作用。外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能，使得它具有潛在的應(yīng)用價值，可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo)。

用于外泌體提取的體液收集注意事項：1、選擇血清還是血漿？推薦大多數(shù)研究選擇血漿。血液凝固過程中血小板會產(chǎn)生大量外泌體，含量占血清中外泌體的50%以上，選擇血漿可避免不必要的影響。2、注意抗凝劑的選擇。肝素類抗凝劑與PCR假陰性有關(guān)，這可能是因為肝素與引物和/或酶有競爭作用。除了克制PCR，肝素可以與外泌體結(jié)合，阻止細胞攝取外泌體。因此需要記錄肝素類藥物的患者的血液樣本。EDTA和雙嘧達莫（CTAD），CTAD可以阻止血小板的并克制其釋放外泌體。EDTA可能會干擾PCR反應(yīng)（盡管其程度小于肝素），但是還是優(yōu)于其他選擇。此外，有研究表明鈣螯合劑可在體外促進外泌體與血小板的結(jié)合從而降低經(jīng)EDTA、或檸檬酸鹽處理后的血液樣本中外泌體的表觀數(shù)量。外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢：無需耗時的超速離心，過濾或特殊注射器。北京外泌體提取試劑廠家供應(yīng)

目前人們多采用超速離心、免疫磁珠、超濾、沉淀或試劑盒等方法實現(xiàn)外泌體的提取分離。長沙正規(guī)外泌體提取試劑報價

外泌體的提取方法學(xué)規(guī)范、統(tǒng)一定量及鑒定等。關(guān)于外泌體的提取有超速離心、試劑盒、超濾法、蔗糖密度梯度離心等，然而各種方法均有其利弊。超速離心法是目前外泌體相關(guān)文章中的主流方法，由于離心步驟繁瑣，費事費力，而且步驟多導(dǎo)致實驗中容易污染，且損耗量大，使得較終回收的外泌體不穩(wěn)定。而且對于抽提細胞上清來說，更是極為不請便，試想用提取300ml的上清需要6個50ml離心管，無論是過濾還是后續(xù)的每一步的離心去沉淀，都具有操作極其不便的缺點，總之非常麻煩。而超濾法存在外泌體會堵塞膜孔，造成濃縮效率低，濃縮管重復(fù)利用差，甚至堵塞在膜孔的外泌體還可能會粘連成團，造成損失及較后的數(shù)據(jù)有誤差，對于后續(xù)實驗也有影響。長沙正規(guī)外泌體提取試劑報價