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為了分離外泌體,研究人員用兩個這樣的單元串聯(lián)構(gòu)建了一個裝置。首先,使用聲波從血液樣品中除去細(xì)胞和血小板。一旦細(xì)胞和血小板被去除,樣品進(jìn)入第二個微流體單元,然后使用較高頻率的聲波將外泌體與稍大的細(xì)胞外囊泡分開。這項(xiàng)工作的通訊作者之一,麻省理工學(xué)院材料科學(xué)與工程系科學(xué)家MingDao博士說:“聲波更溫和。而且在分離時,這些囊泡受處理的時間只有1秒鐘或更短。這是一個很大的優(yōu)勢?!笔褂迷撛O(shè)備,處理100微升未稀釋血液樣本只需要不到25分鐘?!斑@種新技術(shù)可以解決當(dāng)前外泌體分離技術(shù)的缺點(diǎn),如周期長,一致性差,產(chǎn)量低,污染以及完整性受損等。我們想要把提取高質(zhì)量的外泌體的過程簡化為按一個按鈕就在10分鐘內(nèi)獲得所需樣品一樣簡單?!毖芯咳藛T們說。由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體,大于一般蛋白質(zhì)。杭州正規(guī)外泌體提取試劑進(jìn)貨價
近年來,隨著外泌體研究的不斷深入,它的應(yīng)用已經(jīng)涉及一些病癥治病領(lǐng)域、醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域、寄生蟲領(lǐng)域;臨床研究上已涉及心血管系統(tǒng)、內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)等。外泌體來源及內(nèi)含物。幾乎所有類型的細(xì)胞都可以分泌外泌體,同時外泌體也普遍存在于體液中,包括血液、眼淚、尿液、唾液、乳汁、腹水等。目前研究發(fā)現(xiàn)外泌體中富含核酸(microRNA、lncRNA、circRNA、mRNA、tRNA等)、蛋白、膽固醇等。外泌體的表面marker主要有CD63、CD81、CD9、TSG101、HSP27等。外泌體鑒定。目前對于外泌體的鑒定主要有四種方法:透射電子顯微鏡(TEM)、Nanosight、WesternBlot、流式細(xì)胞術(shù)。濟(jì)南外泌體提取試劑直銷價通過超速離心(120000g/分鐘)20小時以上才能獲得足夠的外泌體量。
外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進(jìn)了一些病癥的生長與侵襲。功能:當(dāng)外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后,其被認(rèn)為是細(xì)胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構(gòu)成及運(yùn)輸、細(xì)胞間信號的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。
研究探討了外泌體是否可以作為RNAi的有效載體的可能性。與脂質(zhì)體和其他合成藥物納米顆粒載體不同,外泌體含有可能增強(qiáng)內(nèi)吞作用的跨膜和膜錨定蛋白,從而促進(jìn)其內(nèi)容物的遞送。CD47是外泌體蛋白質(zhì)之一,是一個普遍表達(dá)的整合素相關(guān)跨膜蛋白,其部分功能可以保護(hù)細(xì)胞免受吞噬作用。CD47是信號調(diào)節(jié)蛋白α(SIRPα,也稱為CD172a)的配體,CD47-SIRPα間的結(jié)合能夠發(fā)出“不要吃我”的信號,從而壓制吞噬作用。病基因RAS能夠促進(jìn)胰腺病細(xì)胞增殖,增強(qiáng)胞飲作用從而促進(jìn)一些病癥細(xì)胞攝取外泌體。合成納米顆粒對細(xì)胞有一定毒性作用,但使用外泌體能夠較小化對細(xì)胞的毒性。研究人員發(fā)現(xiàn),CD47和病基因KRAS驅(qū)動的胞飲作用都會壓制外泌體被循環(huán)系統(tǒng)的清理,并增強(qiáng)胰腺病細(xì)胞對外泌體的特異性。所以,外泌體的這種特性增強(qiáng)了它們通過遞送RNAi來特異性靶向胰腺病中的KRAS的能力,并且使用外泌體作為單一靶向劑顯著改善了所有實(shí)驗(yàn)PDAC小鼠模型的總生存期。外泌體提?。盒》肿涌蛇M(jìn)入凝膠中絕大部分孔洞,在柱中受到更強(qiáng)地滯留,更慢地被洗脫出。
外泌體研究的主要應(yīng)用:外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進(jìn)了一些病癥的生長與侵襲。一些病癥。一些病癥轉(zhuǎn)移。來自白血病干細(xì)胞的外泌體促進(jìn)急性骨髓性白血?。ˋML)細(xì)胞的增殖、遷移和壓制細(xì)胞凋亡。治病靶標(biāo)。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D,從而特異性高效靶向至胰腺病細(xì)胞,以明顯降低RAS活化、病細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移過程。免疫。β細(xì)胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細(xì)胞外,并可轉(zhuǎn)移到其他代謝部位或免疫內(nèi)皮細(xì)胞,有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗。心血管。外泌體介導(dǎo)miR-155從平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致了內(nèi)皮細(xì)胞的損傷促進(jìn)動脈硬化。分子標(biāo)記。疾病診斷。在酒精性肝病、NASH、菌類性肝炎、藥物性肝損傷和肝細(xì)胞病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升。預(yù)后標(biāo)志用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng):選擇血清還是血漿?推薦大多數(shù)研究選擇血漿。武漢外泌體提取試劑進(jìn)貨價
外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢:適用于多種物種。杭州正規(guī)外泌體提取試劑進(jìn)貨價
外泌體在肺病進(jìn)程中的作用:在一些病癥微環(huán)境中,一些病癥細(xì)胞來源的外泌體能夠誘導(dǎo)CD4+T分化為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞,壓制機(jī)體的抗一些病癥免疫反應(yīng);肺病細(xì)胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a,可在免疫細(xì)胞中結(jié)合并啟動TLR8,使TLR介導(dǎo)的NF-κB信號通路活化,從而導(dǎo)致一些病癥的生長和轉(zhuǎn)移。在肺病的侵襲和轉(zhuǎn)移過程中,細(xì)胞間通訊扮演著重要的角色。據(jù)有關(guān)報道稱,NSCLC分泌的外泌體內(nèi)TGFβ和IL10的高表達(dá)與肺病的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。此外,啟動的T細(xì)胞可以通過調(diào)控Fas信號通路增加基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)肺病的轉(zhuǎn)移。這些機(jī)制有望成為肺病治病的潛在靶點(diǎn)。雖然大多數(shù)外泌體都是促進(jìn)一些病癥的侵襲與轉(zhuǎn)移,但也有報道稱,外泌體miR-302b可以通過壓制TGFβRⅡ來壓制肺病細(xì)胞的轉(zhuǎn)移與增殖。如純度和回收率低,雜蛋白較多(假陽性),顆粒大小不均一,產(chǎn)生難以去除的聚合物。杭州正規(guī)外泌體提取試劑進(jìn)貨價