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外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：純化和富集的完整血漿/血清，尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究；樣本輸入量多樣；無(wú)需耗時(shí)的超速離心，過濾或特殊注射器；無(wú)需沉淀試劑，也無(wú)需過夜培養(yǎng)；無(wú)需蛋白酶處理；適用于多種物種；外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白；可以使用NanoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體，以評(píng)估近似外泌體大小范圍和濃度。外泌體（exosomes）是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡。它普遍存在并分布于各種體液中，攜帶和傳遞重要的信號(hào)分子，形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng)，影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切相關(guān)。外泌體提取：可以將不同的洗脫溶液應(yīng)用于該方法。開封正規(guī)外泌體提取試劑服務(wù)電話

外泌體的提取方法：1、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合，即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡(jiǎn)便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn)，但是效率低，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實(shí)驗(yàn)，難以普遍普及。2、多聚物沉淀法。聚乙二醇（PEG）為常用的多聚物，可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽(yáng)性），顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等。成都外泌體提取試劑價(jià)格可將外泌體吸附并分離出來。

研究中研究人員發(fā)現(xiàn)，胃病細(xì)胞周圍富含TAM。TAM以M2極化表型為特征，并促進(jìn)胃病細(xì)胞在體外和體內(nèi)的遷移。此外，研究人員發(fā)現(xiàn)M2衍生的外泌體決定了TAMs介導(dǎo)的遷移活動(dòng)。通過使用質(zhì)譜方法，研究人員確定載脂蛋白E（ApoE）是M2巨噬細(xì)胞衍生的外泌體中高度特異性和有效的蛋白質(zhì)。ApoE是一種M2特異性且高度豐富的來源于M2外泌體的蛋白質(zhì)，是決定胃病細(xì)胞遷移潛力的主要驅(qū)動(dòng)因素。然而，來自ApoE-/-的小鼠M2巨噬細(xì)胞的外泌體在體外和體內(nèi)對(duì)胃病細(xì)胞的遷移沒有顯著影響。在機(jī)制上，M2巨噬細(xì)胞衍生的外泌體介導(dǎo)ApoE啟動(dòng)的PI3K-Akt信號(hào)通路，并在TAM和受體胃病細(xì)胞之間進(jìn)行細(xì)胞間轉(zhuǎn)移，促進(jìn)細(xì)胞骨架的遷移。總的來說，該研究發(fā)現(xiàn)外泌體介導(dǎo)的功能性ApoE蛋白從TAM轉(zhuǎn)移到一些病癥細(xì)胞，促進(jìn)了胃病細(xì)胞的遷移。

外泌體在肺病進(jìn)程中的作用：肺病細(xì)胞來源外泌體（LCC-exosome）可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進(jìn)一些病癥的生長(zhǎng)。據(jù)相關(guān)報(bào)道稱，LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞中酪氨酸受體激酶A3的含量，促進(jìn)一些病癥血管的生成；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動(dòng)脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進(jìn)肺病的生血管作用。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達(dá)增加，促使人正常支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)EMT，從而使肺支氣管正常上皮細(xì)胞出現(xiàn)增殖，遷移能力。色譜法。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備，應(yīng)用不普遍由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的囊狀小體，大于一般蛋白質(zhì)。

外泌體的提取、分離方法：聚合物沉淀法。聚合物沉淀法用于分離病毒和其他的生物大分子已有50多年歷史，近幾年，將其作為一種新的方法來分離外泌體。目前，市場(chǎng)已經(jīng)有應(yīng)用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒，較常見的是SystemBiosciences公司的ExoQuick?和ExoQuick-TC?kits，該試劑盒操作簡(jiǎn)單不需要特殊的儀器，但是價(jià)格昂貴。提取外泌體的試劑盒主要成分是PEG8000(30%~50%),將試劑盒與體液或細(xì)胞培養(yǎng)液4℃孵育過夜，之后再低速離心。外泌體檢測(cè)作為一種新型的液體活檢熱點(diǎn)技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無(wú)創(chuàng)診斷。杭州正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹

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具膜囊泡，當(dāng)我們使用常規(guī)方法分離這些結(jié)構(gòu)時(shí)不推薦使用其他的名稱來稱呼它們。外泌體（exosome）適用于通過特殊手段拿到的由胞內(nèi)體來源的釋放到細(xì)胞外的膜泡結(jié)構(gòu)。建議對(duì)細(xì)胞外囊泡進(jìn)行細(xì)分時(shí)使用物理上的界定如小細(xì)胞外囊泡（sEV）和中/大細(xì)胞外囊泡（m/lEV），或者高密度囊泡（highdensity）和低密度囊泡（lowdensity）等，同時(shí)也建議使用表面蛋白來界定如CD63+CD81+細(xì)胞外囊泡等。當(dāng)使用exosomes等稱呼時(shí)應(yīng)當(dāng)進(jìn)行嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)證明使用的“exosomes樣品”是由胞內(nèi)體途徑產(chǎn)生的。小和同學(xué)：都是細(xì)胞外囊泡，外泌體和微囊泡有啥區(qū)別？小光老師：外泌體和微囊泡的區(qū)別在于其生成的方式不同。從晚期內(nèi)體來源產(chǎn)生的細(xì)胞外囊泡稱為外泌體，從細(xì)胞膜直接出芽產(chǎn)生的細(xì)胞外囊泡稱為微囊泡。開封正規(guī)外泌體提取試劑服務(wù)電話