長沙RNA提取試劑生產(chǎn)廠家

來源: 發(fā)布時間:2021-08-16

通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒自主研發(fā)生產(chǎn),博取眾家之長,根據(jù)多年來市場反饋不斷進行技術升級和改良得來。具有操作步驟少,實驗快捷,RNA產(chǎn)量純度高,充分滿足后續(xù)實驗要求的需要,適用提取樣品普遍等特點。產(chǎn)量:每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不等。純度:OD值一般在1.9以上。得到的RNA無DNA污染,可直接用于反轉錄,實時熒光定量PCR(尤其對RNA溶液中DNA非常敏感)等所有后續(xù)實驗。1、快速:多糖多酚植物RNA提取試劑盒提取RNA的整個實驗操作步驟簡化快捷從時間因素考量上較大限度的防止RNA在提取中的降解(一般樣品十多分鐘就能完一個樣RNA的提取,較大縮短了一般試劑盒提取所需要的半小時甚至更長的時間,)。2、高產(chǎn)量:多糖多酚植物RNA提取試劑盒擁有較強細胞裂解液,保證后續(xù)RNA提取的得率。(能完全通過化學方法徹底裂解細胞讓RNA釋放完整,并且有效成分能壓制內源RNA酶的降解作用)。拭子RNA提取試劑的選擇?產(chǎn)品價格。長沙RNA提取試劑生產(chǎn)廠家

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植物RNA提取:植物組織中,富含酚類化合物,或富含多糖,或含有某些尚無法確定的次級代謝產(chǎn)物,或RNase的活性較高。這些物質在細胞裂解后與RNA緊密結合形成難溶復合物或者膠狀沉淀,很難將其去除。所以我們在提取植物組織時,要選取針對植物的試劑盒,試劑盒里的裂解液能有效解決多酚易氧化、多糖化合物與核酸分離等難題。1、植物的果皮、果肉、種子、葉片等要在研缽中充分研磨,研磨過程中液氮要及時補充,避免樣品融化,研磨后的樣品應迅速加入裂解液中震蕩混勻,避免RNA降解。2、像水稻及小麥葉片等富含纖維的樣本,則應適當減少提取用量,否則組織研磨及裂解不徹底,會使提取的RNA產(chǎn)量較低。3、含水分較多的植物組織例如石榴果實、西瓜果實、桃子果實等則應當適當提高樣本量(可選100~200mg)。4、植物組織,如植物葉片、根莖、堅硬的果實等材料一般建議使用液氮在研缽中徹底研缽成份,再繼續(xù)進行提取步驟。常規(guī)的組織勻漿機對植物組織的勻漿效果可能不佳,一般不建議使用。長沙RNA提取試劑生產(chǎn)廠家RNA提取試劑:TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染。

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細胞外RNA(exRNA)已成為研究界的新寵。近年來,人們在血漿或血清樣本中成功檢測到疾病相關的exRNA,使其有望成為非侵入性的生物標志物。然而,從血漿或血清中分離exRNA仍頗具挑戰(zhàn)性,這一方面是因為exRNA豐度低,另一方面是因為血液中的污染物會壓制PCR。商品化的試劑盒能簡化和加速exRNA提取過程,已成為循環(huán)exRNA研究不可缺少的工具。然而,這些試劑盒的提取效率如何,是否能去除血漿中的污染物,是否會偏向特定的RNA,都沒有經(jīng)過評估,而這類評估對于結果解釋和實驗之間的比較都很關鍵。

RNA提取真正需要注意的要點:你的植物組織樣本采樣、保存正常嗎?組織裂解充分了嗎?組織起始量是否過大?起始量過大的話,他們得帶進去多少RNase呀,導致裂解液不能充分壓制內源性的RNase,失敗就在預料之中!你的細胞活性好嗎?細胞都到衰亡期了,你提什么RNA呀;細胞加的那么多,破壁不充分,怎么裂解的好呢,他們本身得帶進去多少內源性RNase污染呀!轉移液體時吸到沉淀了嗎?吸水相時碰到中間層了嗎?乙醇干燥凈了嗎?裂解樣本的過程是重中之重液氮研磨(手工):要先加液氮預冷一下研缽,然后研磨,研磨過程要保證研缽中一直有少量液氮,研磨完成一個樣本后,直接加入裂解液渦旋震蕩后放常溫,或者直接丟到液氮中,全部研磨后一起加裂解液。液氮研磨(研磨儀):研磨模塊丟到液氮中預冷,直到?jīng)]有氣泡冒出視為預冷完畢。在2ml圓底離心管(不需要無酶管,液氮研磨中不破裂就好)中加入5mm鋼珠一粒,放進樣品,投入液氮中預冷。把所有預冷好的離心管**研磨模塊中,放進研磨機震蕩20-30秒。完成后馬上加裂解液,渦旋。RNA提取試劑銷售廠家總共可以使用該試劑盒進行50次標準提取。RNA提取試劑注意事項:所有離心管,泵頭及相關溶液都必須無RNA酶污染。

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細菌RNA快速提取試劑盒:該產(chǎn)品基于獨特的裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞RNA酶,然后用乙醇調節(jié)結合條件后,總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的去蛋白、漂洗的步驟將細胞代謝物、蛋白等雜質去除,較后低鹽的RNaseFreeH2O將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。該產(chǎn)品可在30min內完成樣品RNA的提取,提取的總RNA完整性好,無蛋白和基因組DNA污染。注意事項:初次使用前請先在漂洗液RW瓶加入指定量無水乙醇,加入后請及時打鉤標記已加入乙醇,以免多次加入!裂解液RLT和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作時要戴乳膠手套,避免沾染皮膚,眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時,要用大量清水或者生理鹽水沖洗。所有離心操作步驟,均可在室溫(15-25℃)下進行。提取細菌RNA需先配制加了溶菌酶或者Lysostaphin的TE(10mMTris-HCl,1mMEDTA),TE中已加入溶菌酶或者Lysostaphin,濃度為1mg/mL。較佳方法是保證樣品完全裂解,但相同的裂解方案換了一個樣本可能就沒轍了。長沙RNA提取試劑生產(chǎn)廠家

目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。長沙RNA提取試劑生產(chǎn)廠家

眾所周知,RNA提取是一項困難的工作。常見的挑戰(zhàn)包括RNA降解、低產(chǎn)率和/或純度以及DNA污染。此外,不同的樣品類型有自己獨特的特性,需要特別注意。例如,微生物(如革蘭氏陽性/陰性細菌、菌類、古生菌等)的細胞壁堅硬,不易被化學和酶解。其他樣本類型,如糞便和植物含有壓制劑(如多酚類、腐殖酸/黃腐酸、單寧酸等),可與RNA共沉淀,并可壓制下游分析,如RT-qPCR。RNA是不穩(wěn)定的,極易降解。許多樣品含有高水平的RNase,會快速降解RNA。為了使之較小化,較好在采集時穩(wěn)定樣本中的RNA。常用的樣品穩(wěn)定方法包括液氮快速冷凍、干冰乙醇浴或-80°C冷凍室。然而,這些方法也有缺點,如核酸的凍融損傷,并不是所有的研究人員在采集樣品時都能立即使用這些方法。長沙RNA提取試劑生產(chǎn)廠家