3%NaCl賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基

氨基酸是細胞合成蛋白質的基本成分，氨基酸中有12種是細胞本身不合成的，必須由培養(yǎng)液提供。水解乳蛋白、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產(chǎn)物，呈蛋黃色粉末狀，富含氨基酸。一般配制成0．5%溶液，微酸性。膠原是從動物真皮中提取的，具改善細胞表面特性促使其附著生長的作用。特殊培養(yǎng)基：包括厭氧培養(yǎng)基和細菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基，除含營養(yǎng)成分外，還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢，如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型，由于胞內滲透壓較高，故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固態(tài)培養(yǎng)基是常用的培養(yǎng)基種類。3%NaCl賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基

以MS培養(yǎng)基母液為基礎，向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL，微量元素100×母液20mL，鐵鹽100×母液20mL，維生素100×母液20mL，肌醇200×母液10mL，甘氨酸200×母液10mL，配制得MS培養(yǎng)基后，再加入0.5mg·L-1的BA8mL，0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水，加入40g蔗糖后攪拌使其溶化，用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調整pH值至5.8-6.0。加入14g瓊脂，將鋁鍋置于電爐上，攪拌加熱使瓊脂完全溶化，然后用蒸餾水定容至終體積2L，繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。3%NaCl賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基培養(yǎng)基的傳遞需要在制備和使用期間保持良好的無菌技術，避免細菌交叉污染。

動物細胞培養(yǎng)必需的溶液，平衡鹽水（BSS）：Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎溶液。PH調整液：3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液（二羥乙基哌嗪乙烷磺酸）細胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、膠原酶溶液。1)青、鏈霉素，每毫升培養(yǎng)液含100U青霉素和100ug鏈霉素。2)卡那霉素：終濃度為50ug/ml培養(yǎng)液。3）制霉菌素：濃度25U/ml，小瓶分裝，每瓶一次用完。常用的動物血清主要有牛血清和馬血清。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清，前者來源少，價格高；后者要求剛產(chǎn)下尚未哺乳的小牛，因為哺乳后的小牛血清中可能含有更復雜的成分。血清中已知的成分主要有蛋白質、氨基酸、葡萄糖等。蛋白質主要是白蛋白和球蛋白。

選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基。其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選效率。酵母菌富集培養(yǎng)基：葡萄糖5%，尿素0.1%，硫化銨0.1%，磷酸二氫鉀0.25%，磷酸氫二鈉0.05%，七水合硫酸鎂0.1%，七水合硫酸鐵0.01%，酵母膏0.05%，孟加拉紅0.003%，pH4.5。富集好氧自生固氮菌：甘露醇1%，磷酸二氫鉀0.02%，七水合硫酸鎂0.02%，氯化鈉0.02%，二水合硫酸鈣0.01%，碳酸鈣0.5%培養(yǎng)基種類繁多，根據(jù)需求選擇適合的培養(yǎng)基對于成功的微生物培養(yǎng)至關重要。

天然培養(yǎng)基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基，如血漿、血清、、雞胚浸出液等。組織培養(yǎng)技術建立早期，體外培養(yǎng)細胞都是利用天然培養(yǎng)基。但是由于天然培養(yǎng)基制作過程復雜、批間差異大，因此逐漸為合成培養(yǎng)基所替代。普遍使用的天然培養(yǎng)基是血清，另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養(yǎng)某些特殊細胞也是必不可少。血清質量高低取決于兩方面因素：一是取材對象，二是取材過程。用于取材的動物應健康無病并且在指定的出生天數(shù)之內，取材過程應嚴格按照操作規(guī)程執(zhí)行，制備出的血清要經(jīng)過嚴格的質量鑒定。培養(yǎng)基是一種含有必需營養(yǎng)物質的生長介質，用于細胞、細菌的培養(yǎng)和繁殖。PK瓊脂培養(yǎng)基

細菌類培養(yǎng)基則包括馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥芽瓊脂培養(yǎng)基等等。3%NaCl賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基

按培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分是否完全區(qū)分：1.基本培養(yǎng)基，亦稱“較低限度培養(yǎng)基”。只能滿足微生物野生型菌株生長需要的培養(yǎng)基，稱為基本培養(yǎng)基，是含有營養(yǎng)要求較低成分的合成培養(yǎng)基，常用“[-]”表示。這種培養(yǎng)基往往缺少某些生長因子，所以經(jīng)過誘變過的營養(yǎng)缺陷型菌株不能生長。2.完全培養(yǎng)基，基礎培養(yǎng)基添加血清等物質后，叫完全培養(yǎng)基，也叫（血清）細胞培養(yǎng)基。完全培養(yǎng)基可用來滿足微生物的各種營養(yǎng)缺陷型菌株的生長需要，常以“[+]”表示。3.補充培養(yǎng)基，凡是只能滿足相應的營養(yǎng)缺陷型生長需要的組合培養(yǎng)基，稱為補充培養(yǎng)基，它是在基本培養(yǎng)基中加入該菌株不能合成的營養(yǎng)因子而組成的。根據(jù)在基本培養(yǎng)基中加入的是A或B等營養(yǎng)因子代謝物而分別用[A]或[B]等來表示。3%NaCl賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基

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