平板計數瓊脂(PCA)標準方法瓊脂(SA)

天然培養(yǎng)基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機營養(yǎng)物質包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低，除在實驗室經常使用外，也適于用來進行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產。合成培養(yǎng)基是根據天然培養(yǎng)基的成分，用化學物質模擬合成、人工設計而配制的培養(yǎng)基。例如。高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方，配制合成培養(yǎng)基時重復性強，但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高，微生物在其中生長速度較慢，一般適于在實驗室用來進行有關微生物營養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。Hugh-Leifson培養(yǎng)基（O/F試驗用）HL培養(yǎng)基 葡萄糖銨培養(yǎng)基 營養(yǎng)半固體瓊脂（NSA） Rustigian氏尿素培養(yǎng)液。平板計數瓊脂(PCA)標準方法瓊脂(SA)

培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質濃度合適時微生物才能生長良好，營養(yǎng)物質濃度過低時不能滿足微生物正常生長所需，濃度過高時則可能對微生物生長起抑制作用，例如高濃度糖類物質、無機鹽、重金屬離子等不只不能維持和促進微生物的生長，反而起到抑菌或殺菌作用。另外，培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產物的形成和積累，其中碳氮比(C/N)的影響較大。嚴格地講，碳氮比指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質的量比值，有時也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比。例如，在利用微生物發(fā)酵生產谷氨酸的過程中，培養(yǎng)基碳氮比為4/1時，菌體大量繁殖，谷氨酸積累少；當培養(yǎng)基碳氮比為3/1時，菌體繁殖受到抑制，谷氨酸產量則大量增加。再如，在維生素發(fā)酵生產過程中，可以通過控制培養(yǎng)基中碳源與遲效氮(或碳)源之間的比例來控制菌體生長與維生素的合成協(xié)調。B5培養(yǎng)基（不含蔗糖和瓊脂）如果細菌的生長受到限制，可以嘗試調整培養(yǎng)基的成分或添加輔助物質，例如控制培養(yǎng)基中氧氣的含量。

基礎培養(yǎng)基：含有基礎生長所需的基本營養(yǎng)成分，較常用的是肉浸液，俗稱肉湯，主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基礎培養(yǎng)基普遍用于細菌的增菌、檢驗，也是制備其他培養(yǎng)基的基礎成分。營養(yǎng)培養(yǎng)基：在基礎培養(yǎng)基中可加入葡萄糖、血液、生長因子等特殊成分，供營養(yǎng)要求較高的細菌和需要特殊生長因子的細菌生長。較常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等。特殊培養(yǎng)基：包括厭氧培養(yǎng)基和細菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基，除含營養(yǎng)成分外，還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢，如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型，由于胞內滲透壓較高，故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。

對于已經購買來的預裝培養(yǎng)基，其內部較初的狀態(tài)已經是無菌的。因此，在通常情況下，我們不需要對新的預裝培養(yǎng)基進行任何形式的消毒處理。只需要在使用之前，檢查預裝培養(yǎng)基瓶口是否無菌，便可以直接使用。在使用過程中，應當嚴格遵守實驗室操作規(guī)范，避免外界微生物的污染。對于需要自制的培養(yǎng)基而言，其情況也不盡相同。如果自制的培養(yǎng)基中包含天然成分，那么在自制之后就需要進行消毒處理，以殺死培養(yǎng)基中可能存在的微生物。在消毒處理之后，再將培養(yǎng)基裝入瓶中，就可以進行進一步的實驗使用。同時，在使用自制的預裝培養(yǎng)基時，需要嚴格控制其培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間、以及實驗環(huán)境等參數，以保證實驗結果的準確性。培養(yǎng)基的配方也會受到環(huán)境、藥物和其他外部壓力的影響，因此，在實際應用中需要不斷進行調整和改進。

干粉培養(yǎng)基的保存和注意事項：干粉培養(yǎng)基的儲存條件應保持干燥、防潮、防曬，并存放于陰涼干燥處，避免受到光線、溫度、濕度等外界環(huán)境的影響。一旦開封，干粉培養(yǎng)基應立即密封并放回原包裝中，以免受到環(huán)境中的污染和變質。在使用干粉培養(yǎng)基時，應注意其有效期和使用方法。有效期是指干粉培養(yǎng)基在儲存條件下能夠保持理想品質的時間，一般為 2 年至數年不等。在該期限內使用的干粉培養(yǎng)基能夠保證培養(yǎng)實驗的有效性和可重復性。同時，使用干粉培養(yǎng)基時應遵循無菌操作的原則，注意消毒、凈化和防止污染，保證實驗結果的準確和可靠。黃色布氏菌芽孢桿菌常用的培養(yǎng)基為營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基。胰蛋白胨酵母浸粉肉湯

培養(yǎng)基的傳遞需要在制備和使用期間保持良好的無菌技術，避免細菌交叉污染。平板計數瓊脂(PCA)標準方法瓊脂(SA)

對于預裝培養(yǎng)基的儲存溫度應該是在 4℃ 到 8℃ 的范圍內。這是因為預裝培養(yǎng)基中含有大量的營養(yǎng)物質，這些物質在常溫下很容易被微生物利用，從而失去營養(yǎng)價值。同時，4℃ 到 8℃ 的溫度可以有效地防止微生物的生長和繁殖，從而保證培養(yǎng)基的質量和效果。對于預裝培養(yǎng)基的儲存條件應該是“干燥、陰涼、避光和密封”。這是因為預裝培養(yǎng)基中含有一定比例的水分，如果儲存條件不當，就會導致微生物的生長和繁殖，從而影響實驗結果的準確性。因此，我們需要選擇干燥、陰涼、避光和密封的地方進行存儲。在存儲時，應該避免陽光直射、潮濕和高溫的環(huán)境，以免影響預裝培養(yǎng)基的質量和穩(wěn)定性。同時，在儲存過程中，應該注意避免磕碰和摔落，提高預裝培養(yǎng)基的存儲安全性。平板計數瓊脂(PCA)標準方法瓊脂(SA)