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連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基(TetrathionateBroth,簡稱TTB)是一種選擇性富集培養(yǎng)基,主要用于分離和富集沙門氏菌。以下是其主要特點:1.**成分組成**:-連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基的基礎成分包括胰酪蛋白胨、動物組織消化物、膽鹽、碳酸鈣和硫代硫酸鈉等。每升培養(yǎng)基中通常包含胰酪蛋白胨2.5g、動物組織消化物2.5g、膽鹽1.0g、碳酸鈣10.0g和硫代硫酸鈉30.0g。2.**選擇性**:-該培養(yǎng)基通過添加去氧膽鹽和亮綠染料等抑制劑,抑制革蘭氏陽性菌的生長,從而提高對沙門氏菌的選擇性。碘-碘酸鉀與硫代硫酸鈉反應生成四硫磺酸鹽,阻遏常規(guī)腸道細菌生長。3.**鑒別功能**:-葡萄糖和甘露醇是可發(fā)酵的糖類物質(zhì),輔助腸道致病菌尤其是沙門氏菌的鑒別。連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基含有碘液和煌綠水溶液,這些添加劑有助于抑制共生生物,從而改善沙門氏菌的分離。4.**應用廣**:-主要用于傷寒沙門氏菌和其他沙門氏菌的分離、增菌和鑒定。常用于從糞便、污水等樣品中分離沙門氏菌。5.**配制方法**:-一般將培養(yǎng)基粉末溶解在蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸,分裝后進行高壓滅菌。使用時需現(xiàn)配現(xiàn)用,以保證培養(yǎng)基的穩(wěn)定性和選擇性。胡蘿卜浸出液含有多種維生素、礦物質(zhì)和植物化學成分,這些成分可以為微生物提供必需的營養(yǎng)物質(zhì),促進生長。桑塔斯瓊脂基礎
LPM瓊脂培養(yǎng)皿的制備方法LPM瓊脂培養(yǎng)皿的制備通常遵循以下步驟:稱量:首先,根據(jù)需要的培養(yǎng)基體積,準確稱量LPM瓊脂粉末。溶解:將稱量好的LPM瓊脂粉末溶解在蒸餾水中,通常使用1000毫升水溶解50.5克培養(yǎng)基粉末。滅菌:將溶解后的培養(yǎng)基溶液進行高壓滅菌,通常在121℃下保持15分鐘。冷卻:滅菌后的培養(yǎng)基需要冷卻至45-50℃,以便于后續(xù)添加添加劑。添加添加劑:在冷卻后的培養(yǎng)基中加入LPM瓊脂添加劑,如拉氧頭孢,每100毫升培養(yǎng)基中加入1支。混合:將添加劑與培養(yǎng)基混合均勻。傾倒入平皿:將混合好的培養(yǎng)基溶液倒入無菌平皿中,待其凝固后即可使用。大腸桿菌噬菌體MS2液體培養(yǎng)基TBA培養(yǎng)基的pH值也是經(jīng)過優(yōu)化的,以適應特定細菌群體的生長需求。
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基是一種專門用于檢測和分離單核細胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**用途**:-用于李斯特氏菌的顯色培養(yǎng),特別是在食品和藥品中快速檢測單增李斯特氏菌。單增李斯特氏菌在該培養(yǎng)基上顯藍色,外部有一不透明環(huán)。2.**成分組成**:-培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、氯化鈉、瓊脂、氯化鋰和抑菌劑。具體配方為每升含有營養(yǎng)物質(zhì)70.0克、顯色劑6.0克,pH值控制在7.2±0.2(25℃)。3.**顯色原理**:-根據(jù)單增李斯特氏菌生長代謝產(chǎn)生其特有葡萄糖甘酶及酯酶的特征,在培養(yǎng)基中加入相應的酶顯色底物。單增李斯特氏菌在該培養(yǎng)基上生長,產(chǎn)生特有的菌落形態(tài):菌落呈藍綠色,其周圍有一不透明環(huán),從而使單增李斯特氏菌得到分離鑒別。
在配制改良高氏二號培養(yǎng)基時,如果遇到成分沉淀問題,可以采取以下措施進行處理:1.**充分溶解**:確保所有成分在加入之前已經(jīng)充分溶解。對于不易溶解的成分,如瓊脂,需要在加熱條件下不斷攪拌直至完全溶解。2.**調(diào)整溶解順序**:根據(jù)各成分的溶解特性,調(diào)整添加順序。通常先溶解無機鹽和維生素,再加入有機物質(zhì)。3.**使用輔助溶劑**:對于某些難溶成分,可以考慮使用適當?shù)娜軇┗蛑軇﹣韼椭芙狻?.**避免混合沉淀**:在混合不同成分時,要注意避免因成分相互作用而產(chǎn)生沉淀。例如,避免將鈣鹽和磷酸鹽直接混合。5.**控制pH值**:pH值的變化可能會影響某些成分的溶解度,因此在調(diào)節(jié)pH值時要小心,確保在成分完全溶解后再進行。6.**分步滅菌**:如果培養(yǎng)基中某些成分不耐熱,可以考慮分步滅菌。即先滅菌大部分成分,冷卻后再添加不耐熱的成分。7.**過濾**:如果沉淀物已經(jīng)形成,可以通過過濾來去除。使用適當孔徑的濾紙或濾網(wǎng)過濾培養(yǎng)基。8.**攪拌**:在溶解和加熱過程中,持續(xù)攪拌可以減少沉淀的形成。9.**使用螯合劑**:對于易氧化的成分,如硫酸亞鐵,可以使用螯合劑(如EDTA)來防止沉淀和氧化。BCYE瓊脂培養(yǎng)皿在自然光下可以觀察到博茲曼軍團菌形成的藍白色菌落,而在紫外燈照射下則有藍白熒光 。
梭桿菌選擇性瓊脂基礎(FusobacteriumSelectiveAgar,FSA)是一種用于梭桿菌選擇性分離和培養(yǎng)的培養(yǎng)基。以下是其主要特點:1.**成分**:-梭桿菌選擇性瓊脂基礎的主要成分包括:酪蛋白胨、大豆蛋白胨、組織消化物、葡萄糖、酵母浸粉、氯化鈉、亞硫酸氫鈉、氯化血紅素、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、吐溫80、二硫蘇糖醇和瓊脂等。2.**使用說明**:-稱取53.2克培養(yǎng)基粉末于1升蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘或115℃滅菌30分鐘,滅菌結束后搖勻,以防瓊脂沉積于器皿底部而凝固,備用。-冷至55℃,無菌操作,每100毫升培養(yǎng)基中加入35℃預熱的脫纖維綿羊血5毫升、萬古霉素0.5毫克、交沙霉素0.3毫克、新霉素10毫克,混勻,傾注平板。3.**產(chǎn)品規(guī)格**:-通常以250克/瓶的形式提供。4.**儲存條件**:-常溫,避光,干燥。5.**應用**:-主要用于梭桿菌的選擇性分離和培養(yǎng)。梭桿菌選擇性瓊脂基礎通過添加特定的抗生物質(zhì)和血液,能夠有效抑制其他細菌的生長,從而促進梭桿菌的分離和培養(yǎng)。TSAM培養(yǎng)皿含有胰蛋白胨和大豆胨,這兩種成分富含氮源和碳源,能夠提供細菌生長所需的氨基酸和生長因子。卵黃氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基基礎
亞硫酸鉍瓊脂平板培養(yǎng)皿因其高效性,在食品微生物檢驗中對沙門氏菌的檢測具有重要應用價值。桑塔斯瓊脂基礎
LPM瓊脂培養(yǎng)皿的主要成分LPM瓊脂培養(yǎng)皿的主要成分包括:氯化鋰(Lithium chloride):這是一種滲透壓調(diào)節(jié)劑,能夠抑制非李斯特菌的生長,特別是對革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性菌有較強的抑制作用。苯乙醇(Phenylethanol):苯乙醇是一種抗菌劑,能夠抑制一些非目標細菌的生長,幫助篩選出李斯特菌。拉氧頭孢(Moxalactam):這是一種抗生物質(zhì),主要用于抑制革蘭氏陽性菌,特別是葡萄球菌和鏈球菌。甘氨酸酐(Glycine):甘氨酸酐是一種氨基酸衍生物,可以促進李斯特菌的生長。氯化鈉(Sodium chloride):氯化鈉用于維持培養(yǎng)基的滲透壓平衡。蛋白胨和牛肉浸粉:這些成分提供細菌生長所需的氮源和維生素。瓊脂:作為凝固劑,使培養(yǎng)基凝固成固體狀態(tài),便于細菌在其表面生長。桑塔斯瓊脂基礎