M2培養(yǎng)基

哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基（ColumbiaAgar）是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基，具有以下特點(diǎn)：1.**用途**：-主要用于梭菌的分離培養(yǎng)，特別是用于藥品中梭菌的檢測。2.**成分組成**：-培養(yǎng)基的主要成分包括酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、酵母浸出粉、玉米淀粉、氯化鈉和瓊脂。這些成分提供碳氮源、維生素和生長因子，維持均衡的滲透壓，并作為凝固劑。3.**添加劑**：-每瓶需配套添加硫酸慶大霉素，以抑制腸桿菌科和銅綠假單胞菌的生長。4.**pH值**：-培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.2（25℃）。5.**配制方法**：-稱取44g培養(yǎng)基粉末，加熱溶解于1000ml純化水中，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15分鐘，冷至45-50℃，加入硫酸慶大霉素20mg，混勻，傾入無菌平皿，備用。6.**培養(yǎng)條件**：-將培養(yǎng)基放置于30℃-35℃恒溫培養(yǎng)箱中，進(jìn)行厭氧培養(yǎng)48-72小時(shí)。7.**質(zhì)控結(jié)果**：-接種質(zhì)控菌株如生孢梭菌、大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌，觀察其生長情況和特征。生孢梭菌在該培養(yǎng)基上生長良好，形成無色菌落，而大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌則被抑制。8.**注意事項(xiàng)**：-培養(yǎng)基中含少量淀粉，若滅菌前未加熱煮沸溶解，滅菌后冷卻可能出現(xiàn)少量白色沉淀。

在配制改良高氏二號培養(yǎng)基時(shí)，如果遇到成分沉淀問題，可以采取以下措施進(jìn)行處理：1.**充分溶解**：確保所有成分在加入之前已經(jīng)充分溶解。對于不易溶解的成分，如瓊脂，需要在加熱條件下不斷攪拌直至完全溶解。2.**調(diào)整溶解順序**：根據(jù)各成分的溶解特性，調(diào)整添加順序。通常先溶解無機(jī)鹽和維生素，再加入有機(jī)物質(zhì)。3.**使用輔助溶劑**：對于某些難溶成分，可以考慮使用適當(dāng)?shù)娜軇┗蛑軇﹣韼椭芙狻?.**避免混合沉淀**：在混合不同成分時(shí)，要注意避免因成分相互作用而產(chǎn)生沉淀。例如，避免將鈣鹽和磷酸鹽直接混合。5.**控制pH值**：pH值的變化可能會影響某些成分的溶解度，因此在調(diào)節(jié)pH值時(shí)要小心，確保在成分完全溶解后再進(jìn)行。6.**分步滅菌**：如果培養(yǎng)基中某些成分不耐熱，可以考慮分步滅菌。即先滅菌大部分成分，冷卻后再添加不耐熱的成分。7.**過濾**：如果沉淀物已經(jīng)形成，可以通過過濾來去除。使用適當(dāng)孔徑的濾紙或?yàn)V網(wǎng)過濾培養(yǎng)基。8.**攪拌**：在溶解和加熱過程中，持續(xù)攪拌可以減少沉淀的形成。9.**使用螯合劑**：對于易氧化的成分，如硫酸亞鐵，可以使用螯合劑（如EDTA）來防止沉淀和氧化。APT肉湯去氧膽酸鈉的存在使得DC培養(yǎng)基對革蘭氏陽性菌具有抑制作用，而對大腸菌群等革蘭氏陰性菌則相對促進(jìn)其生長。

MD培養(yǎng)基（MinimalDextroseMedium）是一種常用于畢赤酵母（Pichiapastoris）等微生物的培養(yǎng)基，具有以下特點(diǎn)：1.**配方成分**：-MD培養(yǎng)基的主要成分包括酵母氮源、無氨基酸和硫酸銨、硫酸銨、D-葡萄糖和瓊脂糖H，還含有G418硫酸鹽用于抗生物質(zhì)的篩選。-具體成分如YNB（酵母氮源基）、D-生物素、D-葡萄糖、腺嘌呤和L-組氨酸等。YNB的具體成分可以參見相關(guān)產(chǎn)品說明。2.**用途**：-MD培養(yǎng)基主要用于畢赤酵母營養(yǎng)缺陷型菌株的轉(zhuǎn)化子篩選，特別是用于篩選his4標(biāo)記和ade2標(biāo)記。適用的酵母菌株包括GS115、X33、KM71、SMD1168、PichiaPinkstrain等。-MDA培養(yǎng)基（MinimalDextroseMedium+Adenine）即含有腺嘌呤的基礎(chǔ)葡萄糖培養(yǎng)基，用于培養(yǎng)腺嘌呤缺陷型畢赤巴斯德酵母，如PichiaPink菌株。-MDH培養(yǎng)基（MinimalDextroseMedium+Histidine）即含組氨酸的基礎(chǔ)葡萄糖培養(yǎng)基，用于培養(yǎng)組氨酸缺陷型畢赤巴斯德酵母。3.**使用方法**：-如用于配置液體培養(yǎng)基，每包含約16.7g，加入500mL水中，磁力攪拌溶解后，過濾除菌即可。-如用于配置固體培養(yǎng)基，每包含約16.7g，加入250mL水中，磁力攪拌溶解后，過濾除菌70℃?zhèn)溆茫慌渲?50mL的4%的瓊脂粉，高壓滅菌70℃水浴備用；按照1:1混合后倒平板即可。

腸球菌肉湯（EnterococcusBroth）是一種專門用于增菌培養(yǎng)腸球菌的微生物培養(yǎng)基。它的特點(diǎn)和應(yīng)用如下：1.**成分**：腸球菌肉湯的主要成分包括胰蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、牛膽粉、氯化鈉、檸檬酸鈉、七葉苷、檸檬酸鐵銨和疊氮化鈉等。這些成分為腸球菌提供氮源、維生素和生長因子，同時(shí)維持適宜的滲透壓和提供選擇性抑制其他非目標(biāo)菌種的環(huán)境。2.**選擇性**：牛膽粉和疊氮化鈉作為選擇性抑菌劑，有助于抑制非鏈球菌的細(xì)菌生長，特別是對革蘭氏陰性細(xì)菌有抑制作用。3.**應(yīng)用**：該培養(yǎng)基主要用于食品和水中腸球菌的鑒別培養(yǎng)，如GB/T5750.12-2023生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)中提到的應(yīng)用。4.**制備方法**：通常將腸球菌肉湯的粉末配方溶解在蒸餾水中，加熱煮沸至完全溶解，然后進(jìn)行高壓滅菌，以確保無菌。5.**質(zhì)量控制**：在36±0.5℃培養(yǎng)24小時(shí)后，可以觀察到特定菌株的生長情況。例如，糞鏈球菌（CMCC(B)32223）在腸球菌肉湯中生長良好，呈現(xiàn)棕黑色，并具有棕色暈輪，而金黃色葡萄球菌（ATCC6538）和大腸埃希氏菌（ATCC25922）則被抑制，不生長或生長很差。SIM培養(yǎng)基主要用于腸道菌科細(xì)菌，如沙門氏菌和志賀氏菌等的鑒定。

4.**培養(yǎng)條件**：-培養(yǎng)基的制備方法包括稱取基礎(chǔ)培養(yǎng)基14.2g加入180ml蒸餾水，加熱溶解并不停攪拌；另取1.2g李斯特氏菌添加劑，加入20ml無菌水，并加入一些玻璃球，不停振動，使其乳化均勻，將二者分別于121℃高壓滅菌15分鐘。冷至50℃左右時(shí)，把李斯特氏菌添加劑加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，并加入李斯特氏菌抑菌劑，混勻，傾入無菌平皿。5.**質(zhì)量控制**：-質(zhì)控菌株在37℃培養(yǎng)24-48小時(shí)，單增李斯特氏菌和綿羊李斯特氏菌在該培養(yǎng)基上生長良好，形成藍(lán)色菌落，菌落周圍有一不透明環(huán)。其他菌如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和沙門氏菌則不生長或生長不良。6.**儲存條件**：-制備好的固體平板保存于2-8℃，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處，保存溫度2-8℃。7.**注意事項(xiàng)**：-嚴(yán)格按照標(biāo)簽說明進(jìn)行配制培養(yǎng)基，避免混合時(shí)培養(yǎng)基和添加劑溫度過高導(dǎo)致平板出現(xiàn)絮狀物。干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。這些特點(diǎn)使得李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基在食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。VP半固體瓊脂（Voges-Proskauer Semisolid Agar）是一種生化培養(yǎng)基，主要用于細(xì)菌的V-P試驗(yàn)。改良克氏雙糖鐵培養(yǎng)基

VRBA培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、酵母膏粉、乳糖、氯化鈉、膽鹽、結(jié)晶紫和中性紅。M2培養(yǎng)基

VRE肉湯基礎(chǔ)（VREBrothBase）是一種用于分離抗萬古霉素的腸球菌（Vancomycin-ResistantEnterococci,VRE）和高耐氨基糖苷類抗生的腸球菌（High-LevelAminoglycoside-ResistantEnterococci,HLARE）的培養(yǎng)基。以下是其特點(diǎn)介紹：1.**配方**：VRE肉湯基礎(chǔ)的配方通常包含牛腦浸粉、牛心浸粉、月示蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉和磷酸氫二鈉等成分，這些成分為細(xì)菌提供必需的營養(yǎng)和生長環(huán)境。2.**pH值**：培養(yǎng)基的pH值控制在7.0±0.2（25℃），以適應(yīng)目標(biāo)細(xì)菌的生長需求。3.**選擇性**：在每升培養(yǎng)基中添加2mg美羅培南（一種碳青霉烯類抗生物質(zhì)），以抑制非目標(biāo)細(xì)菌的生長，特別是對萬古霉素敏感的細(xì)菌。4.**應(yīng)用**：主要用于從臨床樣本中分離VRE和HLARE，對于監(jiān)測和控制醫(yī)院污染具有重要意義。5.**制備方法**：稱取適量的VRE肉湯基礎(chǔ)粉末，加入蒸餾水或去離子水中，加熱煮沸至完全溶解，分裝后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌后冷卻至55℃左右，加入無菌的美羅培南，混勻后備用。6.**儲存條件**：通常建議在常溫干燥的條件下儲存，以保持培養(yǎng)基的穩(wěn)定性和有效性。7