動物卒中模型的制作也是臨床前實驗研究的前提,缺血性卒中的動物實驗模型具有針對性與多樣性的特點,并被不斷地進行改進與創(chuàng)新,力爭制作的動物模型能無限接近真實的人類腦卒中。目前,大鼠、小鼠、猿、猴、犬、兔、羊、豬等多種動物被用于制備局灶性腦缺血模型。線栓法、開顱法、栓子栓塞法、光化學法、FeCl3誘導法、內(nèi)皮素-1誘導法和自發(fā)性卒中法為常用方法,其中線栓法大腦中動脈栓塞(MCAO)為制作局灶性缺血卒中模型*常用的方法。 小鼠缺血性腦梗死模型也為神經(jīng)康復研究提供了有力支持。南京本地腦梗MCAO模型造模方法
腦卒中具有發(fā)病率高、病死率高、殘疾率高及復發(fā)率高的特點。其中缺血性腦卒中的發(fā)病率高于出血性腦卒中,占腦卒中總數(shù)的 60% ~ 70%。缺血性腦卒中引起的組織損傷是主要的致死原因,但研究發(fā)現(xiàn),缺血后再灌注引起的過量氧自由基是造成組織損傷的主要因素。 通過制備腦局部缺血再灌注損傷動物模型研究腦缺血再灌注損傷的作用機制已成為國內(nèi)外的研究熱點。線栓法是*常用的腦局部缺血再灌注損傷模型制備方法,此方法不需要開顱且不需要呼吸機等儀器輔助,缺血部位較恒定,能夠準確控制缺血及再灌注時間,容易控制局部條件,全身影響小,是制作腦局部缺血再灌注損傷模型*理想的方法。上海定制腦梗MCAO模型研究方案麻醉時間,麻醉程度適中,過淺影響操作,過深導致死亡。
1、大腦中動脈阻塞(MCAO)模型-嚙齒類 誘導方式:線栓法堵塞大腦中動脈動物種屬:大鼠模型特征:模型可高度再現(xiàn)的MCA梗死、具有明確的缺血半暗帶(有梗死風險但潛在可恢復的低灌注組織)、可再現(xiàn)的感覺運動和認知缺陷、可用于評估神經(jīng)保護藥物、不適合溶栓藥物研究、動物會有死亡,尤其是缺血時間越長時、分缺血再灌注模型和永jiu缺血模型 缺血再灌注模型與永jiu梗死模型差別:缺血再灌注模型包括原發(fā)性腦組織損傷和缺氧再灌注后由能量代謝紊亂引起的繼發(fā)性損傷,兩種損傷之間存在時間差;永jiu梗死模型無此特征、永jiu梗死模型梗死核*區(qū)相比缺血再灌注模型更大,缺血半暗帶可能更小、永jiu梗死模型動物死亡率相對更高
通過神經(jīng)功能缺損評分,研究人員可以定量地評估腦梗死后對動物神經(jīng)功能的影響。這對于研究腦梗死的病理過程、治*方法以及藥物效果具有重要的意義。同時,這種評分方法也可以為臨床醫(yī)生提供參考,幫助他們更好地評估患者的神經(jīng)功能缺損程度。 需要注意的是,神經(jīng)功能缺損評分只是一種評估方法,不能完全戴*動物的神經(jīng)功能狀態(tài)。因此,在實驗中還需要結(jié)合其他指標和方法進行綜合評估。此外,由于實驗動物的個體差異和環(huán)境因素的影響,實驗結(jié)果也可能存在一定的誤差。因此,在進行實驗研究時需要嚴格控制實驗條件和操作過程,以保證實驗結(jié)果的準確性和可靠性。在成功建立小鼠腦梗模型后,認知功能的檢測可以通過以下方法進行: 1. 迷宮測試:這是一個常用的方法,通過讓小鼠在迷宮中尋找食物,觀察其尋找食物的速度和正確性,來評估其認知功能。 2. 物體識別測試:給小鼠展示兩個相似的物體,觀察其是否能夠正確識別并記住這兩個物體。 3. 社交互動測試:觀察小鼠與其他小鼠的互動情況,包括是否能夠正確識別其他小鼠,以及是否能夠進行正常的社交行為。 這些測試可以幫助評估小鼠的認知功能,從而了解腦梗對其認知功能的影響。行為學檢測是評估腦梗MCAO模型動物行為變化的一種方法。
小鼠缺血性腦梗死模型在藥物開發(fā)方面具有重要應用。通過模擬腦梗死的發(fā)病過程,可以評估各種潛在藥物的治*效果,篩選出具有療效的藥物進行臨床試驗。同時,模型還可以用于研究藥物的副作用和毒性,為藥物的安全性和有效性提供評估依據(jù)。神經(jīng)康復,小鼠缺血性腦梗死模型在神經(jīng)康復方面也有重要應用。通過觀察模型中神經(jīng)細胞的再生和修復過程,可以了解神經(jīng)康復的機制,為制定有效的康復方案提供理論支持。同時,模型還可以用于評估各種康復手段的效果,為臨床實踐提供指導。血管分離,在分離右側(cè)CCA、ECA、ICA時,要注意迷走神經(jīng)的保護, 減少對迷走神經(jīng)的損傷。國內(nèi)腦梗MCAO模型行為學檢測
進一步研究小鼠缺血性腦梗死模型,科學家們可以深入了解腦梗死的發(fā)病機制、病理生理過程以及神經(jīng)功能損害。南京本地腦梗MCAO模型造模方法
檢測方法 造模完成后等待大鼠蘇醒,依據(jù)Zea longa 5分制標準篩選出2分或3分的腦缺血模型進入后續(xù)實驗。0分:無神經(jīng)功能缺損癥狀,活動正常;1分:不能伸展對側(cè)前爪;2分:爬行時出現(xiàn)向左轉(zhuǎn)圈;3分:行走時身體向偏癱側(cè)傾倒;4分:不能自發(fā)行走,意識喪失。行為學指標目前常采用跳臺法、避暗法、穿梭箱法來測定動物一次性被動回避反射能力 ; Y 形水迷宮實驗、Morris水迷宮實驗等測定動物空間分辨學習記憶能力。研究血管性癡呆、腦卒中抑郁癥等可以選擇曠場試驗作為行為學檢測指標之一。病理檢測常用HE染色觀察組織水腫炎癥反應等,尼氏染色可以反應神經(jīng)元細胞情況。南京本地腦梗MCAO模型造模方法