在實(shí)驗(yàn)過程中,動物的表現(xiàn)會被詳細(xì)記錄。例如,它們是否能保持平衡,是否出現(xiàn)跌倒,以及跌倒的頻率和持續(xù)時(shí)間等。這些數(shù)據(jù)將被用于分析腦梗對動物平衡和協(xié)調(diào)性的影響。 這種實(shí)驗(yàn)方法有助于我們深入理解腦梗對神經(jīng)系統(tǒng)的影響,以及可能對治*方法和康復(fù)策略的改進(jìn)提供重要信息。例如,如果發(fā)現(xiàn)腦梗后的動物在轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)中的表現(xiàn)明顯下降,這可能表明腦梗影響了動物的平衡和協(xié)調(diào)能力。這可能會引導(dǎo)研究人員尋找新的治*方法,以改善或恢復(fù)這些功能。在實(shí)驗(yàn)過程中,應(yīng)建立嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系,包括實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范、數(shù)據(jù)記錄和分析等環(huán)節(jié)。上海腦局部缺血再灌注損傷腦梗MCAO模型大概價(jià)格
動物卒中模型的制作也是臨床前實(shí)驗(yàn)研究的前提,缺血性卒中的動物實(shí)驗(yàn)?zāi)P途哂嗅槍π耘c多樣性的特點(diǎn),并被不斷地進(jìn)行改進(jìn)與創(chuàng)新,力爭制作的動物模型能無限接近真實(shí)的人類腦卒中。目前,大鼠、小鼠、猿、猴、犬、兔、羊、豬等多種動物被用于制備局灶性腦缺血模型。線栓法、開顱法、栓子栓塞法、光化學(xué)法、FeCl3誘導(dǎo)法、內(nèi)皮素-1誘導(dǎo)法和自發(fā)性卒中法為常用方法,其中線栓法大腦中動脈栓塞(MCAO)為制作局灶性缺血卒中模型*常用的方法。 北京小鼠腦梗MCAO模型市場價(jià)格這種模型有助于研究腦梗的發(fā)病機(jī)制,并尋找新的治*策略。
檢測方法 造模完成后等待大鼠蘇醒,依據(jù)Zea longa 5分制標(biāo)準(zhǔn)篩選出2分或3分的腦缺血模型進(jìn)入后續(xù)實(shí)驗(yàn)。0分:無神經(jīng)功能缺損癥狀,活動正常;1分:不能伸展對側(cè)前爪;2分:爬行時(shí)出現(xiàn)向左轉(zhuǎn)圈;3分:行走時(shí)身體向偏癱側(cè)傾倒;4分:不能自發(fā)行走,意識喪失。行為學(xué)指標(biāo)目前常采用跳臺法、避暗法、穿梭箱法來測定動物一次性被動回避反射能力 ; Y 形水迷宮實(shí)驗(yàn)、Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)等測定動物空間分辨學(xué)習(xí)記憶能力。研究血管性癡呆、腦卒中抑郁癥等可以選擇曠場試驗(yàn)作為行為學(xué)檢測指標(biāo)之一。病理檢測常用HE染色觀察組織水腫炎癥反應(yīng)等,尼氏染色可以反應(yīng)神經(jīng)元細(xì)胞情況。
腦梗MCAO模型成功的評判方法主要包括以下幾個(gè)方面: 1.腦梗死面積的評估:通過TTC(2%,17分鐘)染色法對腦梗死面積進(jìn)行分析和量化。在染色后,利用ImageJ圖像分析軟件對切片進(jìn)行處理,從而得到腦梗死面積的數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)過程中,通過比較不同處理組之間的腦梗死面積,可以評估模型的成功率。 2.神經(jīng)功能缺損評分:參照Zea-Longa評分標(biāo)準(zhǔn),對實(shí)驗(yàn)動物在再灌注期內(nèi)的神經(jīng)功能進(jìn)行評估。評分越高,表示神經(jīng)功能缺損越嚴(yán)重。通過對不同處理組的神經(jīng)功能缺損評分進(jìn)行比較,可以進(jìn)一步驗(yàn)證模型的成功。 3.梗死血管的觀察:通過激光多普勒血流儀檢測相對腦血流動脈減少情況,評估梗死血管的狹窄程度。同時(shí),觀察血管造影劑在梗死區(qū)域的分布情況,以判斷血管阻塞的效果。將動物放在一個(gè)有階梯的平臺上,觀察動物是否能順利爬上爬下,以評估動物的肢體運(yùn)動能力和協(xié)調(diào)性。
迄今為止,缺血性腦卒中模型覆蓋各種小型動物(小鼠,大鼠等)和較大型動物(兔、犬、豬、猴等),并應(yīng)用于卒中治*藥物的臨床前藥理藥效研究。然而,自1970年代以來,大量在動物模型上得到驗(yàn)證的受試藥物均未能在人體臨床試驗(yàn)中獲得理想的治*效果,可能原因包括:1)以往相對簡單的動物模型不能準(zhǔn)確模擬人類卒中的病理生理過程;2)臨床前動物實(shí)驗(yàn)的藥效評價(jià)方法尚難以成功轉(zhuǎn)化到復(fù)雜的人體臨床試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。2009年國際公認(rèn)的“腦卒中治*學(xué)術(shù)工業(yè)圓桌會議”(Stroke Therapy Academic industry Roundtable,STAIR)發(fā)布了臨床前缺血性腦卒中藥物研發(fā)準(zhǔn)則,提出提高臨床前藥理藥效研究質(zhì)量的具體要求。近年來隨著更深入的基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn),更多符合人類發(fā)病機(jī)理和病理生理過程的缺血性腦卒中動物模型已被開發(fā)。行為學(xué)檢測是評估腦梗MCAO模型動物行為變化的一種方法。北京小鼠腦梗MCAO模型市場價(jià)格
建立大腦中動脈閉塞(MCAO)再灌注模型動物模型是研究此類疾病的*重要工具之一。上海腦局部缺血再灌注損傷腦梗MCAO模型大概價(jià)格
采用Longa等的5級4分法標(biāo)準(zhǔn)對模型動物進(jìn)行評價(jià),0分:無神經(jīng)功能缺損癥狀;1分:出現(xiàn)左側(cè) Honer征,輕度神經(jīng)功能缺損;2分:提尾對側(cè)前肢內(nèi)旋,肩內(nèi)收,中度神經(jīng)功能缺損;3分:向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈、向?qū)?cè)傾倒,重度神經(jīng)功能缺損;4分:不能自發(fā)行走,部分意識喪失。鼠側(cè)傾倒,評分為3分。 沿腦橋上界面切斷,去除嗅球,稱全腦重,立即放入-20℃冰箱, 20 min 后取出,由前向后做連續(xù)冠狀切片(切片厚度2 mm)。將腦切片置入0.1% TTC溶液中,后放入恒溫振蕩器中,37℃避光染色30 min,將腦切片取出后放入固定液中固定 24 h,取出腦片,相機(jī)拍照,用 Motic Images Plus 顯微圖像分析系統(tǒng)計(jì)算腦梗死面積和梗死體積。上海腦局部缺血再灌注損傷腦梗MCAO模型大概價(jià)格