局灶性缺血模型/線栓法引起的大腦中動(dòng)脈栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)由于大(小)鼠腦血管解剖結(jié)構(gòu)與人類相似,大腦中動(dòng)脈也是臨床缺血性卒中的高發(fā)部位,同時(shí),采用線栓法也便于觀察缺血和再灌注、永jiu(持續(xù))和短暫性損傷等多種狀態(tài),在評價(jià)藥物量效關(guān)系和確認(rèn)治*時(shí)間窗等方面有一定優(yōu)勢,因此,MCAO是目前*廣為接受一種藥效模型。將尼龍線由大(?。┦蟮念i外動(dòng)脈(ECA)插入,經(jīng)頸內(nèi)動(dòng)脈(ECA)阻斷一側(cè)MCA起始端,導(dǎo)致一側(cè)(局灶性)腦缺血。術(shù)后再使用激光散斑血流儀或多普勒血流儀對造模效果進(jìn)行驗(yàn)證和確認(rèn)。穩(wěn)定且成功率高的小鼠腦梗模型可以模擬人類腦梗的病理過程,為研究腦梗的發(fā)病機(jī)制、預(yù)防提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。北京本地腦梗MCAO模型TTC染色
腦梗MCAO模型成功的評判方法主要包括以下幾個(gè)方面: 1.腦梗死面積的評估:通過TTC(2%,17分鐘)染色法對腦梗死面積進(jìn)行分析和量化。在染色后,利用ImageJ圖像分析軟件對切片進(jìn)行處理,從而得到腦梗死面積的數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)過程中,通過比較不同處理組之間的腦梗死面積,可以評估模型的成功率。 2.神經(jīng)功能缺損評分:參照Zea-Longa評分標(biāo)準(zhǔn),對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在再灌注期內(nèi)的神經(jīng)功能進(jìn)行評估。評分越高,表示神經(jīng)功能缺損越嚴(yán)重。通過對不同處理組的神經(jīng)功能缺損評分進(jìn)行比較,可以進(jìn)一步驗(yàn)證模型的成功。 3.梗死血管的觀察:通過激光多普勒血流儀檢測相對腦血流動(dòng)脈減少情況,評估梗死血管的狹窄程度。同時(shí),觀察血管造影劑在梗死區(qū)域的分布情況,以判斷血管阻塞的效果。南京快速制作腦梗MCAO模型模型檢測實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)可以根據(jù)科研人員的需求,設(shè)計(jì)并執(zhí)行各種實(shí)驗(yàn)。
動(dòng)物卒中模型的制作也是臨床前實(shí)驗(yàn)研究的前提,缺血性卒中的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)P途哂嗅槍π耘c多樣性的特點(diǎn),并被不斷地進(jìn)行改進(jìn)與創(chuàng)新,力爭制作的動(dòng)物模型能無限接近真實(shí)的人類腦卒中。目前,大鼠、小鼠、猿、猴、犬、兔、羊、豬等多種動(dòng)物被用于制備局灶性腦缺血模型。線栓法、開顱法、栓子栓塞法、光化學(xué)法、FeCl3誘導(dǎo)法、內(nèi)皮素-1誘導(dǎo)法和自發(fā)性卒中法為常用方法,其中線栓法大腦中動(dòng)脈栓塞(MCAO)為制作局灶性缺血卒中模型*常用的方法。
腦梗MCAO模型關(guān)于禁食:很多動(dòng)物實(shí)驗(yàn)都是要求在開展實(shí)驗(yàn)的前一天對動(dòng)物進(jìn)行禁食,但小編查閱文獻(xiàn)后認(rèn)為可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康撵`活調(diào)整。當(dāng)大鼠血糖濃度高或者低時(shí),腦損傷程度加重、梗死面積增大、腦水腫加重、梗死后出血率增大,因此需要檢測大鼠的血糖狀態(tài)。必要時(shí)可在實(shí)驗(yàn)前12-24h禁食。然而嚙齒類動(dòng)物代謝率較高,一旦空腹超過6小時(shí)可能會導(dǎo)致動(dòng)物體重減輕和肝糖原耗竭,影響動(dòng)物的生理狀態(tài)和手術(shù)耐受性,以及候選藥物的神經(jīng)保護(hù)作用。缺血性腦梗死具有高發(fā)病率、高死亡率、高致殘率的特點(diǎn)。
SD大鼠MCAO模型作為世界上*通用的模型之一,在其制作時(shí)為了達(dá)成較高的成功率也需要不斷的探索和努力,我們再次總結(jié)了難點(diǎn)和問題點(diǎn),希望這篇文章可以為大家制備模型提供參考。 (1)麻醉時(shí)間,麻醉程度適中,過淺影響操作,過深導(dǎo)致死亡。 (2)血管分離,在分離右側(cè)CCA、ECA、ICA時(shí),要注意迷走神經(jīng)的保護(hù), 減少對迷走神經(jīng)的損傷, 盡量避免對迷走神經(jīng)的直接牽拉。 (3)術(shù)中狀態(tài)監(jiān)護(hù),例如發(fā)現(xiàn)呼吸異常,用鑷子將大鼠舌頭牽拉至嘴角一側(cè),防止舌頭根部堵塞呼吸道出現(xiàn)窒息情況。 (4)手術(shù)視野,可以制備金屬勾,用橡皮筋纏繞連結(jié)金屬鉤固定在固定板上,從而使手術(shù)切口左右上下拉開,擴(kuò)大手術(shù)視野。研究腦梗死發(fā)病機(jī)制、藥物開發(fā)、神經(jīng)康復(fù)等方面發(fā)揮著重要作用,同時(shí)也為神經(jīng)精神疾病的防治提供支持。南京快速制作腦梗MCAO模型模型檢測
通過迷宮實(shí)驗(yàn)、水迷宮實(shí)驗(yàn)等,評估動(dòng)物的認(rèn)知功能是否受到影響。北京本地腦梗MCAO模型TTC染色
小鼠缺血性腦梗死模型在藥物開發(fā)方面具有重要應(yīng)用。通過模擬腦梗死的發(fā)病過程,可以評估各種潛在藥物的治*效果,篩選出具有療效的藥物進(jìn)行臨床試驗(yàn)。同時(shí),模型還可以用于研究藥物的副作用和毒性,為藥物的安全性和有效性提供評估依據(jù)。神經(jīng)康復(fù),小鼠缺血性腦梗死模型在神經(jīng)康復(fù)方面也有重要應(yīng)用。通過觀察模型中神經(jīng)細(xì)胞的再生和修復(fù)過程,可以了解神經(jīng)康復(fù)的機(jī)制,為制定有效的康復(fù)方案提供理論支持。同時(shí),模型還可以用于評估各種康復(fù)手段的效果,為臨床實(shí)踐提供指導(dǎo)。北京本地腦梗MCAO模型TTC染色