數(shù)字PCR平臺的評價指標(biāo)有：分割單元數(shù)，熒光通道數(shù)，操作復(fù)雜性和污染風(fēng)險。但是重要的是檢測準(zhǔn)確性，評估數(shù)字PCR平臺的一種方法是使用多個數(shù)字PCR平臺互相驗(yàn)證，另一種方法是使用定值準(zhǔn)確的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。目前的三代的PCR技術(shù)各有各的優(yōu)缺點(diǎn)，也各有各的應(yīng)用領(lǐng)域，并不是一代取代一代的關(guān)系。技術(shù)的不斷進(jìn)步給PCR技術(shù)注入了新的活力，使其能解鎖一個又一個的應(yīng)用方向，使核酸檢測更方便、更準(zhǔn)確。目前dPCR儀器的價格仍然十分昂貴，但隨著系統(tǒng)加工工藝的改進(jìn)以及使用較便宜的材料，聚合成更小的體積[556]，其價格將會不斷的降低，使其應(yīng)用到更多的檢測中。全自動數(shù)字PCR平臺，讓數(shù)字PCR真正邁入新時代，助推數(shù)字PCR普及應(yīng)用。珠三角全自動多重數(shù)字PCR系統(tǒng)
PCR已成為分子診斷領(lǐng)域重要的技術(shù)手段之一，占據(jù)分子診斷市場的半壁江山。數(shù)字PCR是一代PCR技術(shù)，也是當(dāng)前靈敏度和定量精度比較高的分子檢測技術(shù)。但數(shù)字PCR使用成本仍然相對較高，檢測靶點(diǎn)數(shù)少（一般≤6靶點(diǎn)/反應(yīng)），阻礙了其在臨床中的大規(guī)模應(yīng)用，提高數(shù)字PCR的多重檢測能力迫在眉睫。基于熒光通道數(shù)的增加和基于探針濃度梯度增加，均可以在一定程度上提高數(shù)字PCR檢測重數(shù)，然而只能達(dá)到"線性"增加的目的。基于探針濃度梯度的多重檢測技術(shù)雖然光'f明顯增加多重能力，但由于無法避免交叉反應(yīng)現(xiàn)象，不能確保獲得位點(diǎn)特異性的分簇，因此穩(wěn)定性不足、靈敏度較差，難以滿足臨床級別的數(shù)據(jù)要求。而基于創(chuàng)新的且數(shù)字PCR獨(dú)特適用的熒光編碼技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)“指數(shù)”級的多重檢測，顛覆性的提高數(shù)字PCR檢測重數(shù)，覆蓋臨床應(yīng)用多場景需求。德國全自動數(shù)字PCR技術(shù)dPCR的測量結(jié)果通常表示為含量，即拷貝數(shù)轉(zhuǎn)基因質(zhì)量百分比，而QPCR結(jié)果通常表示為拷貝數(shù)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。
了解泊松分布，我們先要從二項(xiàng)式分布說起，二項(xiàng)式分布是一個離散概率分布，它給出了m次試驗(yàn)中k次成功的可能性，每次試驗(yàn)的概率為p，例如當(dāng)擲骰子時，二項(xiàng)分布給出了在10次試驗(yàn)中恰好有7次擲出4的概率。在數(shù)字PCR的情況中，投擲骰子類似于將一個目標(biāo)實(shí)體隨機(jī)“投擲”到一組分區(qū)中，當(dāng)目標(biāo)落在選定的分區(qū)中時，就是成功。如果有n個分區(qū)，并且分區(qū)過程是完全隨機(jī)的，則目標(biāo)出現(xiàn)在所選分區(qū)中的概率為1/n。該試驗(yàn)重復(fù)m次，樣品中的每個分子一次。如下所示的二項(xiàng)式分布給出了k個成功的概率，即所選分區(qū)恰好包含k個分子的概率。數(shù)字PCR通常采用大量分區(qū)。當(dāng)n很大，并且嘗試成功的概率(1/n)很小時，二項(xiàng)分布可以近似為泊松分布。
數(shù)字PCR技術(shù)的出現(xiàn)不是為了完全取代原有分子診斷技術(shù)，而是更好的補(bǔ)充和完善現(xiàn)有技術(shù)平臺。數(shù)字PCR為不同應(yīng)用場景下的多樣化核酸檢測需求提供了新的思路，尤其是在臨床檢測方面，在 性疾病早期檢測、 疾病的伴隨診斷、生殖遺傳篩查等領(lǐng)域展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。國產(chǎn)數(shù)字PCR企業(yè)在商業(yè)化應(yīng)用方面，也不斷“攻城略地”。新羿生物在檢測及 疾病伴隨診斷方面開發(fā)了一系列試劑盒，并積極推進(jìn)注冊臨床試驗(yàn)；領(lǐng)航基因聚焦在血流 （膿毒癥）及呼吸道 領(lǐng)域，相繼推出了多款病原菌檢測試劑盒；銳訊生物聚焦于檢測，2020年其產(chǎn)品獲得FDA緊急授權(quán)。除此之外，在公共衛(wèi)生領(lǐng)域，國產(chǎn)數(shù)字PCR企業(yè)針對食源性致病菌、鼠疫、蟲媒病毒等，也推出多種檢測試劑盒。數(shù)字PCR具有諸多優(yōu)點(diǎn)，但也存在一定的不足，如成本高、儀器操作復(fù)雜、經(jīng)濟(jì)效益低等。
現(xiàn)有dPCR分析方法采用熒光探針和基于光的檢測方法來鑒定擴(kuò)增產(chǎn)物。這些方法要求足夠的靶分子擴(kuò)增以產(chǎn)生足以被檢測到的信號，但可能會導(dǎo)致額外的錯誤或偏差，因此，希望能夠提供一種改進(jìn)的、用于檢測樣品內(nèi)感興趣的核酸的方法，其采用替代性分析方法，具有提高的準(zhǔn)確度和精確度，并且其具有可以與基于dPCR的方法關(guān)聯(lián)使用的靈敏度。dPCR還在樣品內(nèi)進(jìn)行單一反應(yīng)，但是所述樣品被分離成大量的分區(qū)(partition)，并且所述反應(yīng)在每個分區(qū)中單獨(dú)進(jìn)行。這種分離允許對核酸量進(jìn)行靈敏的測量。DPCR已被證明可有效用于研究基因序列中的變異，例如拷貝數(shù)變異或點(diǎn)突變。數(shù)字PCR作為研發(fā)階段的驗(yàn)證方案之一。蘇州數(shù)字PCR市場前景
從市場規(guī)模來看，目前數(shù)字PCR市場規(guī)模并不大，全球約1.5億至2.5億美元。珠三角全自動多重數(shù)字PCR系統(tǒng)
數(shù)字PCR技術(shù)流分類目前，dPCR的基本方法都已經(jīng)建立，根據(jù)反應(yīng)單元的不同形式，主要可分為微板式、微腔式和和微滴式三大類系統(tǒng)。微液滴制備的方法，目前主流的有四種：1）芯片微孔物理分割法，俗稱物理分隔法，公司有Fluidgm，Qiagen，Roche，ThermoFisher，;2）液滴分割法，俗稱油包水，代替公司有Bio-Rad;3）雜交式芯片液滴法，公司有Stilla;4）注射振動制滴法。PS：芯片式物理分割技術(shù)所有已經(jīng)過期，目前有不少公司在這個技術(shù)的基礎(chǔ)上進(jìn)行開發(fā)，例如羅氏。珠三角全自動多重數(shù)字PCR系統(tǒng)
廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司在數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀一直在同行業(yè)中處于較強(qiáng)地位，無論是產(chǎn)品還是服務(wù)，其高水平的能力始終貫穿于其中。公司位于廣州市黃埔區(qū)銳豐三街4號617房，成立于2015-04-17，迄今已經(jīng)成長為精細(xì)化學(xué)品行業(yè)內(nèi)同類型企業(yè)的佼佼者。雙螺旋科學(xué)儀器以數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀為主業(yè)，服務(wù)于精細(xì)化學(xué)品等領(lǐng)域，為全國客戶提供先進(jìn)數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀。多年來，已經(jīng)為我國精細(xì)化學(xué)品行業(yè)生產(chǎn)、經(jīng)濟(jì)等的發(fā)展做出了重要貢獻(xiàn)。